玉米谷氨酰胺肽及其制备方法与应用技术

本发明专利技术提供了玉米谷氨酰胺肽及其制备方法与应用，属于生物活性肽技术领域。本发明专利技术提供的两种玉米谷氨酰胺肽对ABTS自由基清除率的IC

【技术实现步骤摘要】
玉米谷氨酰胺肽及其制备方法与应用


[0001]本专利技术属于生物活性肽
，尤其涉及玉米谷氨酰胺肽及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]氧化应激是由活性氧(ROS)的产生和机体消除活性氧的能力之间的失衡引起的，与疾病的产生密切相关。活性氧是细胞氧化呼吸过程中产生的代谢产物，过度的氧化应激反应会对细胞脂质、蛋白质、DNA等物质造成伤害，导致细胞炎症和组织损伤。在食品中，氧化反应也会对食品品质产生影响，破坏食物的结构，改变食物的味道和香气，从而导致食物变质。因此，抑制氧化反应和自由基的形成是十分重要的。目前，从食源性组分中摄取天然抗氧化物质已被证明是一种有效方式。
[0003]谷氨酰胺(Glutamine，Gln)是人体中一种含量丰富的游离氨基酸，具有保护肠道屏障、增强机体免疫力等多种生理功能。正常情况下，人体可以通过自身合成满足谷氨酰胺的需求；但是当受到外部刺激时，谷氨酰胺的需求量增加，自身合成的谷氨酰胺含量不能满足，此时需要通过针剂或者服用的方式进行补充。但是，谷氨酰胺单体溶解性低且易分解，加热时会产生有毒物质焦谷氨酸，这些因素限制了谷氨酰胺的广泛应用。谷氨酰胺肽是保留了谷氨酰胺原有的各种营养和生理功能的多肽，还具有更好的稳定性和溶解性，现在常被用作谷氨酰胺的稳定化替代品。目前，生产谷氨酰胺肽的方法主要有植物蛋白酶解法和人工合成法两种。人工合成法主要生产谷氨酰胺二肽，但是这种方法成本高、合成量低，对环境有污染，因此产品推广受到限制。相比之下植物蛋白酶解法成本低，原料来源广，受到研究者们的关注。/>[0004]玉米黄粉(CGM)是玉米湿法生产淀粉过程中的主要副产物，其蛋白质含量约60％，主要由玉米醇溶蛋白(zein)和谷蛋白(glutelin)组成。谷蛋白中富含谷氨酰胺，其谷氨酰胺含量约占总氨基酸含量的1/3。但是由于其水溶性差，消化利用率低，常被用作饲料原料，限制了其在食品工业的应用。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供具有高氧化活性且含有谷氨酰胺的玉米活性肽。
[0006]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：
[0007]本专利技术提供了一种玉米谷氨酰胺肽，所述玉米谷氨酰胺肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示。
[0008]本专利技术还提供了一种玉米蛋白酶解液，包括上述的玉米谷氨酰胺肽。
[0009]本专利技术还提供了上述玉米谷氨酰胺肽或上述玉米蛋白酶解液在制备抗氧化产品中的应用。
[0010]优选的，所述抗氧化产品包括抗氧化药品和食品抗氧化剂。
[0011]本专利技术还提供了一种上述玉米蛋白酶解液的制备方法，包括如下步骤：以玉米黄粉为原料，先采用复合蛋白酶进行酶解，然后采用胰蛋白酶进行酶解，酶解结束后取上清液中分子量小于3kDa的液体即为所述玉米蛋白酶解液。
[0012]优选的，采用复合蛋白酶进行酶解的条件为：加酶量1300U/g、酶解温度55℃、pH 7.0、酶解时间150min。
[0013]优选的，采用胰蛋白酶进行酶解的条件为：加酶量450U/g、酶解温度45℃、pH 8.0、酶解时间180min。
[0014]本专利技术还提供了一种玉米谷氨酰胺肽的制备方法，在上述制备方法的基础上，还包括如下步骤：将玉米蛋白酶解液进行凝胶色谱交换层析，收集分子量小于1kDa的组分进行质谱测序，获得上述玉米谷氨酰胺肽的序列，化学合成即得所述玉米谷氨酰胺肽。
[0015]优选的，质谱测序后采用R语言的Peptides对质谱测序所得肽段的生物活性进行预测。
[0016]本专利技术的有益效果：
[0017]本专利技术提供的两种玉米谷氨酰胺肽对ABTS自由基清除率的IC
50
值分别为0.008mg/mL和0.054mg/mL；其中RQPQCSPL对DPPH自由基清除率的IC
50
值为0.056mg/mL，效果与谷胱甘肽相当，可以做为天然抗氧化剂应用于食品抗氧化剂及医药中。另外，本专利技术提供的玉米蛋白酶解液也具有高抗氧化活性，且具有制备方法简单易实施的优势。
附图说明
[0018]图1为不同分子量分布玉米谷氨酰胺肽的OH自由基清除率，其中图注肩标(A
‑
D)表示组内比较差异显著(P<0.05)；肩标(a
‑
d)表示组间比较差异显著(P<0.05)；
[0019]图2为不同分子量分布玉米谷氨酰胺肽的Fe
2+
螯合能力，其中图注肩标(A
‑
D)表示组内比较差异显著(P<0.05)；肩标(a
‑
d)表示组间比较差异显著(P<0.05)；
[0020]图3为不同分子量分布玉米谷氨酰胺肽的DPPH自由基清除率，其中图注肩标(A
‑
D)表示组内比较差异显著(P<0.05)；肩标(a
‑
d)表示组间比较差异显著(P<0.05)；
[0021]图4为不同分子量分布玉米谷氨酰胺肽的ABTS自由基清除率，其中图注肩标(A
‑
D)表示组内比较差异显著(P<0.05)；肩标(a
‑
d)表示组间比较差异显著(P<0.05)；
[0022]图5为实施例1得到的玉米蛋白酶解液凝胶色谱图；
[0023]图6为RQPQCSPL单肽对DPPH自由基清除率结果；
[0024]图7为QYPL和RQPQCSPL单肽对ABTS自由基清除率结果。
具体实施方式
[0025]本专利技术提供了一种玉米谷氨酰胺肽，所述玉米谷氨酰胺肽的氨基酸序列为QYPL(SEQ ID NO:1)或RQPQCSPL(SEQ ID NO:2)。
[0026]本专利技术还提供了一种玉米蛋白酶解液，包括上述的玉米谷氨酰胺肽。
[0027]本专利技术还提供了上述玉米谷氨酰胺肽或上述玉米蛋白酶解液在制备抗氧化产品中的应用。
[0028]在本专利技术中，所述抗氧化产品优选的包括抗氧化药品和食品抗氧化剂，本专利技术对于抗氧化药品和食品抗氧化剂中的其他辅料成分没有特殊限定，采用本领域常规药品和食
品抗氧化剂辅料即可。
[0029]本专利技术还提供了一种上述玉米蛋白酶解液的制备方法，包括如下步骤：以玉米黄粉为原料，先采用复合蛋白酶进行酶解，然后采用胰蛋白酶进行酶解，酶解结束后取上清液中分子量小于3kDa的液体即为所述玉米蛋白酶解液。
[0030]在本专利技术中，所述玉米黄粉为经挤压膨化并除去淀粉的玉米黄粉。本专利技术对于复合蛋白酶和胰蛋白酶的具体来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品均可。在本专利技术中，采用复合蛋白酶进行酶解的条件优选为：加酶量1300U/g、酶解温度55℃、pH 7.0、酶解时间150min；采用胰蛋白酶进行酶解的条件优选为：加酶量450U/g、酶解温度45℃、pH 8.0本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种玉米谷氨酰胺肽，其特征在于，所述玉米谷氨酰胺肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示。2.一种玉米蛋白酶解液，其特征在于，所述玉米蛋白酶解液包括权利要求1所述的玉米谷氨酰胺肽。3.权利要求1所述玉米谷氨酰胺肽或权利要求2所述玉米蛋白酶解液在制备抗氧化产品中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述抗氧化产品包括抗氧化药品和食品抗氧化剂。5.权利要求2所述玉米蛋白酶解液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：以玉米黄粉为原料，先采用复合蛋白酶进行酶解，然后采用胰蛋白酶进行酶解，酶解结束后取上清液中分子量小于3kDa的液体即为所述玉米蛋白酶解液。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，采用复合蛋白酶进行...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘晓兰，郑喜群，赵玉昊，景言，李冠龙，
申请(专利权)人：齐齐哈尔大学，
类型：发明
国别省市：