使用嵌合CD40配体和冠状病毒疫苗增强免疫力制造技术

本公开提供了通过施用冠状病毒疫苗和嵌合CD40L多肽来增强免疫力的方法和组合物。冠状病毒疫苗可包含灭活的冠状病毒颗粒或抗原多肽、优选冠状病毒刺突蛋白。冠状病毒抗原多肽可以是纯化的抗原多肽或编码抗原多肽的核酸表达构建体。本发明专利技术的组合物中的嵌合CD40L多肽可以是纯化的嵌合CD40L多肽或编码嵌合CD40L多肽的核酸表达构建体。CD40L多肽的核酸表达构建体。CD40L多肽的核酸表达构建体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用嵌合CD40配体和冠状病毒疫苗增强免疫力
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于2020年9月11日提交的第63/077,204号临时申请的权益，其通过引用并入本文。
[0003]专利技术背景
1.专利

[0004]本专利技术总体上涉及疫苗和疫苗佐剂以及增强针对感染因子的免疫力的方法。特别地，本专利技术涉及嵌合CD40配体(CD40L)作为疫苗佐剂、特别是关于冠状病毒疫苗的佐剂的用途。
[0005]2.相关技术描述
[0006]身体使用固有免疫系统和适应性免疫系统抵御传染性病原体和微生物。固有免疫系统通常通过关键效应细胞(如中性粒细胞、巨噬细胞和自然杀伤细胞)作为第一道防线发挥作用，这通过它们对病原体上发现的通常不存在于哺乳动物细胞上的特征结构的识别和应答来进行。这些致病结构作为信号起作用，称为损伤相关分子模式(DAMP)和病原体相关分子模式(PAMP)。通过适应性免疫系统的第二道防线主要由B细胞和T细胞介导，B细胞和T细胞分别构成体液免疫和细胞介导的免疫。适应性免疫系统可以进化为特异性靶向和消除特定病原体，并在病原体再次攻击或进攻时提供长期监视和应答。
[0007]疫苗是一种可以刺激人的免疫系统产生对特定疾病的免疫力，从而保护人免受该疾病侵害的产品。可以向人或动物施用刺激其免疫系统产生针对病原体上存在的一种或多种抗原的体液(抗体)免疫应答和/或细胞(T细胞)免疫应答以试图防止由病原体感染引起的疾病的疫苗。这会启动免疫系统，以便将来当身体暴露于病原体时，适应性免疫系统的记忆细胞会识别该病原体，并且身体消除病原体的应答会更强。典型的疫苗由灭活或减毒的病毒颗粒、抗原多肽或编码抗原性多肽的遗传构建体组成。最近疫苗开发的一个特定领域与冠状病毒有关，包括例如SARS
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CoV
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1和SARs
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CoV
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2。
[0008]许多疫苗在引发免疫应答方面表现出希望，但应答不足以完全预防这种疾病。为此，一些疫苗与佐剂结合使用。佐剂可以与疫苗共同施用以在接受疫苗的人或动物中产生更强的免疫应答。
[0009]
技术介绍
中讨论的所有主题不一定是现有技术，并且不应仅仅因为在背景部分中对其进行讨论而被假定为现有技术。按照这些原则，对
技术介绍
中讨论的或与此类主题相关的现有技术中的问题的任何认识不应被视为现有技术，除非明确声明为现有技术。相反，
技术介绍
中对任何主题的讨论应被视为专利技术人解决特定问题的方法的一部分，其本身也可以具有创造性。

技术实现思路

[0010]以下呈现本公开的简化概要以便提供对本公开的某些方面的基本理解。该概要不是本公开的详尽概述。它不旨在鉴别本公开的关键或重要要素或描绘本公开的范围。它的
唯一目的是以简化的形式呈现一些构思，作为随后讨论的更详细描述的序言。
[0011]本公开通过提供通过施用冠状病毒疫苗和嵌合CD40L多肽来增强免疫力的方法和组合物，从而克服了与当前技术相关的几个主要问题。嵌合CD40L多肽可作为多肽提供或通过施用可表达嵌合CD40L的表达构建体来提供。具体而言，预期用于嵌合CD40L多肽的表达构建体可以是病毒载体，例如包括与嵌合CD40L的蛋白质编码序列和转录终止序列可操作地连接的真核转录启动子的腺病毒构建体。如下所述，嵌合CD40L在与冠状病毒疫苗一起施用时充当增强对冠状病毒的免疫力的佐剂。本专利技术预期，针对冠状病毒的疫苗可包含灭活的冠状病毒颗粒或抗原多肽，优选冠状病毒刺突蛋白。此外，本专利技术预期，冠状病毒疫苗可包含通过表达构建体施用的冠状病毒抗原，该表达构建体可以是病毒载体，例如，包括与冠状病毒抗原(优选冠状病毒刺突蛋白)的蛋白质编码序列和转录终止序列可操作地连接的真核转录启动子的腺病毒构建体。在某些实施方式中，嵌合CD40L多肽和冠状病毒抗原由同一表达构建体表达。
[0012]嵌合CD40L多肽包括至少一个来自两个不同物种的亚结构域。在某些实施方式中，嵌合CD40L多肽包括来自人CD40L和鼠CD40L两者的结构域和/或亚结构域。例如，嵌合CD40L多肽选自由ISF30、ISF31、ISF32、ISF33、ISF34、ISF35、ISF36、ISF37、ISF38、ISF39、ISF40和ISF41组成的组。特别地，嵌合CD40L多肽是ISF35。
[0013]在进一步的方面，嵌合CD40L多肽和/或冠状病毒抗原通过如下方式施用至受试者：在支持表达所述嵌合CD40L多肽和冠状病毒抗原(如适用时)的条件下，提供在表达载体中并且在在真核细胞中具有活性的启动子的控制下的嵌合CD40L多肽和/或冠状病毒抗原的编码区。在一些方面，表达盒在病毒载体中。例如，病毒载体是腺病毒载体、逆转录病毒载体、冠状病毒载体、痘病毒载体、疱疹病毒载体、腺相关病毒载体或多瘤病毒载体。特别地，病毒载体是腺病毒载体。
[0014]下文的描述中阐述了一种或多种实施方式的细节。结合一种示例性实施方式示出或描述的特征可以与其他实施方式的特征组合。因此，如果需要，可以修改各种实施方式中的任何实施方式以采用如本文所认定的各种专利、申请和出版物的构思来提供更多的实施方式。其他特征、目的和优点将从描述、附图和权利要求中显而易见。
附图说明
[0015]以下附图构成本说明书的一部分并且被包括以进一步展示本专利技术的某些方面。通过参考这些附图中的一个或多个并结合本文呈现的特定实施方式的详细描述，可以更好地理解本专利技术。
[0016]图1显示了编码嵌合CD40L多肽的腺病毒表达构建体的图。
[0017]图2显示了编码嵌合CD40L多肽和冠状病毒抗原的腺病毒表达构建体的图。
[0018]图3显示了通过ELISPOT IFNγ分泌测量的冠状病毒刺突蛋白抗原特异性T细胞的数量。
[0019]图4显示了通过ELISA测量的冠状病毒刺突蛋白特异性抗体(IgG)体液免疫应答。
[0020]序列的简要描述
[0021]SEQ ID NO：1至12是编码嵌合人/小鼠CD40L的核酸序列(由这些序列编码的嵌合人/小鼠CD40L分别称为ISF30、ISF31、ISF32、ISF33、ISF34、ISF35、ISF36、ISF37、ISF38、
ISF39、ISF40和ISF41)。
[0022]SEQ ID NO：13至24是嵌合CD40L氨基酸序列的示例(分别是ISF30、ISF31、ISF32、ISF33、ISF34、ISF35、ISF36、ISF37、ISF38、ISF39、ISF40和ISF41)。
[0023]SEQ ID NO 25是编码SARS
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CoV
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1的冠状病毒刺突蛋白的核酸序列。
[0024]SEQ ID NO 26是SARS
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CoV
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1的冠状病毒刺突蛋白的氨基酸序列。
[0025]SEQ ID NO 27是编码SARS
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Co本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种组合物，包含：冠状病毒疫苗；和嵌合CD40L多肽或编码嵌合CD40L多肽的核酸中的至少一种。2.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述CD40L多肽选自由ISF30、ISF31、ISF32、ISF33、ISF34、ISF35、ISF36、ISF37、ISF38、ISF39、ISF40和ISF41组成的组。3.根据权利要求2所述的组合物，其中，所述嵌合CD40L多肽或编码嵌合CD40L多肽的核酸是ISF35。4.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述编码嵌合CD40L多肽的核酸包含载体。5.根据权利要求4所述的组合物，其中，所述载体是DNA或RNA载体。6.根据权利要求5所述的组合物，其中，所述载体是病毒载体或质粒DNA载体。7.根据权利要求6所述的组合物，其中，所述病毒载体选自由腺病毒、痘病毒、甲病毒、沙粒病毒、黄病毒、弹状病毒、逆转录病毒、慢病毒、疱疹病毒、副粘病毒、冠状病毒和小核糖核酸病毒组成的组。8.根据权利要求7所述的组合物，其中，所述病毒载体是腺病毒载体。9.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述冠状病毒疫苗包含编码冠状病毒抗原的表达构建体。10.根据权利要求9所述的组合物，其中，所述冠状病毒抗原是SARS
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CoV
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1或SARS
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CoV
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2的冠状病毒刺突蛋白。11.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述冠状病毒疫苗包含冠状病毒抗原。12.根据权利要求11所述的组合物，其中，所述冠状病毒抗原包含纯化的多肽。13.根据权利要求12所述的组合物，其中，所述纯化的多肽是冠状病毒刺突蛋白。14.根据权利要求11所述的组合物，其中，所述冠状病毒抗原包含灭活的冠状病毒颗粒。15.根据权利要求1所述的组合物，其适合施用于人受试者或动物受试者。16.根据权利要求9所述的组合物，其中，所述编码嵌合CD40L多肽的核酸和所述冠状病毒抗原由相同的表达载体编码。17.一种增强免疫力的方法，包括：向人或动物施用有效量的根据权利要求1所述的组合物。18.根据权利要求17所述的方法，其中，施用有效量的根据权利要求1所述的组合物包括选自由口服、鼻腔、局部和注射组成的组中的施用途径。19.根据权利要求18所述的方法，其中，所述施用途径是注射并且选自由皮下、皮内、肌内、静脉内、气管内和腹膜内注射组成的组。20.一种增强免疫力的方法，包括：施用包含冠状病毒疫苗的药物制剂；和施用包含嵌合CD40L多肽或编码嵌合CD40L多肽的核酸中的至少一种的药物制剂。21.根据权利要求20所述的方法，其中，施用包含嵌合CD40L多肽或编码嵌合CD40L多肽的核酸中的至少一种的药物制剂的步骤与施用包含冠状病毒疫苗的药物制剂的步骤在大约相同的时间进行。22.一种增强免疫力的方法，包括：
将包含冠状病毒疫苗的药物制剂与包含嵌合CD40L多肽或编码嵌合CD40L多肽的核酸中的至少一种的药物制剂混合；向人...

【专利技术属性】
技术研发人员：马克，
申请(专利权)人：马克，
类型：发明
国别省市：