用于鉴别鳖甲的特征肽段及其检测方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种用于鉴别鳖甲的特征肽段及其检测方法，本发明专利技术通过大量实验筛选，筛选出序列为GTPGPVGAVGAHypGK、GSPGSDGAHypGSHypGTHypGPQGIAGQR、GPSGSAGAHypGQDGPAGEAGR、GIHypGAIGSHypGPAGGPGDRGEAGPAGPAGPAGAR、GDRGETGPAGAHypGAHypGAPGAHypGPVGPSGK、GDAGPHypGPAGPTGAHypGPSGAVGAHypGPK的鳖甲特征肽段，这些用于鉴别鳖甲的特征肽段具有很高的专属性，可用于鉴定含有鳖甲药材的药品。本发明专利技术提供的鳖甲特征肽段的检测方法，通过大量实验筛选出最佳的色谱条件和质谱条件，整个方法操作简单，判断准确，能准确区分用于鳖甲特征肽段。本发明专利技术提供的鳖甲特征肽段及其检测方法，有利于鳖甲药品的质量控制，对于含有鳖甲药品的质量保证具有重要的意义。药品的质量保证具有重要的意义。药品的质量保证具有重要的意义。

【技术实现步骤摘要】
用于鉴别鳖甲的特征肽段及其检测方法与应用


[0001]本专利技术涉及一种动物药的检测鉴别方法，具体涉及用于鉴别鳖甲的特征肽段及其检测方法及其应用。

技术介绍

[0002]鳖甲为鳖科动物鳖(Trionyx sinensis Wiegmann)的背甲，始载于《神农本草经》，谓之“主心腹症瘕坚积、寒热，去痞、息肉、阴蚀，痔(核)、恶肉。”鳖甲胶为鳖的背甲经煎煮、浓缩制成的固体胶块，鳖甲与鳖甲胶现收录于2020版《中国药典》中，通常用于阴虚发热，骨蒸劳热，阴虚阳亢，头晕目眩，虚风内动，经闭等症，是中医临床及中药制药行业的重要品种。现代药理研究表明鳖甲在抗炎、解热、治疗肝硬化、肝纤维化，调控癌细胞，免疫调节、抗血栓、增强免疫等方面具有良好效果。中医临床及中药制药行业将鳖甲及鳖甲胶应用于中成药：鳖甲煎丸、复方鳖甲软肝片、鳖甲育肝颗粒、龟鹿二仙膏等，在临床应用中均有较好疗效。鳖甲物质基础研究表明，蛋白质类、肽类、氨基酸类、甾醇类、核苷类、无机元素类等为其主要成分。鳖甲质量标准并不完善，鳖甲药材、鳖甲胶、复方鳖甲颗粒、含鳖甲的成方制剂缺少专属性鉴别、含量测定的方法，药材市场存在以其它胶类混售的现象。有研究表明基于COI序列的DNA条形码技术可用于鉴别鳖甲药材混伪品，但是中药高温提取过程会影响DNA的完整性，进而影响DNA条形码鉴定的准确性，相较于DNA分子，蛋白质、肽类成分的一级序列信息在高温提取条件下保存较好，以I型胶原(Type I Collagen)等蛋白质类成分为鳖甲、阿胶、黄明胶等胶类动物药重要物质基础。本专利技术通过检测用于鉴别鳖甲的特征肽段来检测鳖甲成分，该方法为鳖甲质量研究提供了参考与依据，有利于鳖甲及其制品质量标准进一步完善。

技术实现思路

[0003]本专利技术主要目的是针对上述存在的问题与不足，提供一种用于鉴别鳖甲的特征肽段及检测角类动物药中鳖甲特征肽段的方法。本专利技术提供的鳖甲特征肽段专属性强。提供的方法操作简单，灵敏度高，能准确鉴定角类动物药中是否含有鳖甲成分，为保证鳖甲及其制品的质量提供科学方法。
[0004]技术方案：为了实现以上目的，本专利技术采取的技术方案为：
[0005]用于鉴别鳖甲的特征肽段，所述的特征肽段包括下列P1～P6中的任意一条或它们的组合；
[0006]P1：GTPGPVGAVGAHypGK；
[0007]P2：GSPGSDGAHypGSHypGTHypGPQGIAGQR；
[0008]P3：GPSGSAGAHypGQDGPAGEAGR；
[0009]P4：GIHypGAIGSHypGPAGGPGDRGEAGPAGPAGPAGAR；
[0010]P5：GDRGETGPAGAHypGAHypGAPGAHypGPVGPSGK；
[0011]P6：GDAGPHypGPAGPTGAHypGPSGAVGAHypGPK。
[0012]以上P1～P6的氨基酸序列组成即为：
[0013]P1:Gly
‑
Thr
‑
Pro
‑
Gly
‑
Pro
‑
Val
‑
Gly
‑
Ala
‑
Val
‑
Gly
‑
Ala
‑
Hyp
‑
Gly
‑
Lys
[0014]P2:
[0015]Gly
‑
Ser
‑
Pro
‑
Gly
‑
Ser
‑
Asp
‑
Gly
‑
Ala
‑
Hyp
‑
Gly
‑
Ser
‑
Hyp
‑
Gly
‑
Thr
‑
Hyp
‑
Gly
‑
Pro
‑
Gln
‑
Gly
‑
Ile
‑
Ala
‑
Gly
‑
Gln
‑
Arg
[0016]P3:
[0017]Gly
‑
Pro
‑
Ser
‑
Gly
‑
Ser
‑
Ala
‑
Gly
‑
Ala
‑
Hyp
‑
Gly
‑
Gln
‑
Asp
‑
Gly
‑
Pro
‑
Ala
‑
Gly
‑
Glu
‑
Ala
‑
Gly
‑
Arg
[0018]P4:
[0019]Gly
‑
Ile
‑
Hyp
‑
Gly
‑
Ala
‑
Ile
‑
Gly
‑
Ser
‑
Hyp
‑
Gly
‑
Pro
‑
Ala
‑
Gly
‑
Gly
‑
Pro
‑
Gly
‑
Asp
‑
Arg
‑
Gly
‑
Glu
‑
Ala
‑
Gly
‑
Pro
‑
Ala
‑
Gly
‑
Pro
‑
Ala
‑
Gly
‑
Pro
‑
Ala
‑
Gly
‑
Ala
‑
Arg
[0020]P5:
[0021]Gly
‑
Asp
‑
Arg
‑
Gly
‑
Glu
‑
Thr
‑
Gly
‑
Pro
‑
Ala
‑
Gly
‑
Ala
‑
Hyp
‑
Gly
‑
Ala
‑
Hyp
‑
Gly
‑
Ala
‑
Pro
‑
Gly
‑
Ala
‑
Hyp
‑
Gly
‑
Pro
‑
Val
‑
Gly
‑
Pro
‑
Ser
‑
Gly
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于鉴别鳖甲的特征肽段，其特征在于，所述的特征肽段包括下列P1～P6中的任意一条或它们的组合；P1:Gly
‑
Thr
‑
Pro
‑
Gly
‑
Pro
‑
Val
‑
Gly
‑
Ala
‑
Val
‑
Gly
‑
Ala
‑
Hyp
‑
Gly
‑
LysP2:Gly
‑
Ser
‑
Pro
‑
Gly
‑
Ser
‑
Asp
‑
Gly
‑
Ala
‑
Hyp
‑
Gly
‑
Ser
‑
Hyp
‑
Gly
‑
Thr
‑
Hyp
‑
Gly
‑
Pro
‑
Gln
‑
Gly
‑
Ile
‑
Ala
‑
Gly
‑
Gln
‑
ArgP3:Gly
‑
Pro
‑
Ser
‑
Gly
‑
Ser
‑
Ala
‑
Gly
‑
Ala
‑
Hyp
‑
Gly
‑
Gln
‑
Asp
‑
Gly
‑
Pro
‑
Ala
‑
Gly
‑
Glu
‑
Ala
‑
Gly
‑
ArgP4:Gly
‑
Ile
‑
Hyp
‑
Gly
‑
Ala
‑
Ile
‑
Gly
‑
Ser
‑
Hyp
‑
Gly
‑
Pro
‑
Ala
‑
Gly
‑
Gly
‑
Pro
‑
Gly
‑
Asp
‑
Arg
‑
Gly
‑
Glu
‑
Ala
‑
Gly
‑
Pro
‑
Ala
‑
Gly
‑
Pro
‑
Ala
‑
Gly
‑
Pro
‑
Ala
‑
Gly
‑
Ala
‑
ArgP5:Gly
‑
Asp
‑
Arg
‑
Gly
‑
Glu
‑
Thr
‑
Gly
‑
Pro
‑
Ala
‑
Gly
‑
Ala
‑
Hyp
‑
Gly
‑
Ala
‑
Hyp
‑
Gly
‑
Ala
‑
Pro
‑
Gly
‑
Ala
‑
Hyp

【专利技术属性】
技术研发人员：刘睿，韩疏影，段金廒，
申请(专利权)人：南京中医药大学，
类型：发明
国别省市：