一种低出生重犊牛结肠粪菌的移植方法技术

本发明专利技术公开了一种低出生重犊牛结肠粪菌的移植方法，涉及粪菌移植技术领域，其技术方案要点是：包括供体犊牛的选择标准、受体牛的选择标准、粪菌悬液的制备流程、粪菌悬液的保存、粪菌悬液的微生物的检测和粪菌悬液的移植这五个步骤。本发明专利技术利用结肠粪菌移植方法将符合标准的供体动物粪菌悬液移植到受体犊牛的结肠内，以达到改善犊牛肠道健康、提高宿主免疫力和降低死亡率及发病率的目的，节约牧场成本。本。

【技术实现步骤摘要】
一种低出生重犊牛结肠粪菌的移植方法


[0001]本专利技术涉及粪菌移植
，更具体地说，它涉及一种低出生重犊牛结肠粪菌的移植方法。

技术介绍

[0002]粪菌移植(粪便微生物群移植，FMT)，是一种将健康供体的粪便以一定的方式放入另一个患病动物的肠道内，直接改变受体肠道微生物群以时期正常化，从而获得治疗效益的方法。FMT的第一个记录可以追溯到我国公元4世纪，人类的粪便被称为黄色汤，用于治疗严重腹泻，在16世纪的我国明代的记载中有用新鲜粪便或发酵粪便悬浮液治疗胃肠道疾病，包括腹泻、便秘和腹痛。1958年利用FMT成功治疗假膜性结肠炎，这是医学文献的第一篇报道。自2013年美国食品和药物管理局批准FMT用于治疗复发性和难治性艰难梭菌感染以来，粪菌移植成为研究热点，不仅用于胃肠道疾病，而且用于胃肠外疾病。
[0003]在人类医学中，已经报道了不同FMT的移植途径，包括上消化道(口服)、中消化道(鼻胃管、内镜、鼻空肠和鼻十二指肠)；下消化道(结肠镜和灌肠)，在人上进行FMT的操作较为复杂，不适用于动物；而在动物上，FMT的移植途径大多为口服，这种方法菌液并不会直接进入大肠，在这个过程中菌液会有很多的损失，因此我们设计了一种从结肠进行FMT的技术方法，为了更好的增加低出生重犊牛的生长性能，降低死亡率，节约牧场成本。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种低出生重犊牛结肠粪菌的移植方法，利用结肠粪菌移植方法将符合标准的供体动物粪菌悬液移植到受体犊牛的结肠内，以达到改善犊牛肠道健康、提高宿主免疫力和降低死亡率及发病率的目的，节约牧场成本。
[0005]本专利技术的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：一种低出生重犊牛结肠粪菌的移植方法，包括以下5个步骤：
[0006]S1.供体犊牛的选择标准；
[0007]S2.供体牛的选择标准；
[0008]S3.粪菌悬液的制备流程；
[0009]S4.粪菌悬液的保存；
[0010]S5.粪菌悬液的微生物的检测；
[0011]S6.粪菌悬液的移植。
[0012]本专利技术进一步设置为：所述S1中选择的供体犊牛需要在6月龄以内，健康，营养状况良好(鼻子、眼睛、嘴、尾巴、毛发等干净)；无抗菌药物的使用记录(抗生素、抗真菌药物或抗病毒药物)；没有传染病史(口蹄疫、肺炎、炭疽病等)；无直肠出血情况；粪便外观、颜色、成分无异常；检测供体牛粪便微生物，无病毒(轮状病毒、冠状病毒等)、无细菌(产气杆菌、大肠杆菌等)、无原虫(球虫、微小隐孢子虫等)感染；检测供体牛粪便微生物，存在孢子杆菌属和硒单胞菌属。
[0013]本专利技术进一步设置为：所述S2中受体牛需要出生重≤36公斤，日龄为0
‑
7日龄，无传染病史，没有抗菌药物使用记录。
[0014]本专利技术进一步设置为：所述S3中制备粪菌悬液的具体操作如下：
[0015]A、选取健康犊牛采集粪便，采样人员佩戴一次性PE手套，通过刺激直肠肠壁使得犊牛排便，用自封袋收集排出的粪便放在冰块上，迅速送至操作室进行处理；
[0016]B、在处理过程中需要保证在无菌状态下进行，按1:10的比例粪便中加入无菌、无抗的生理盐水(0.9％)进行稀释，搅拌为均质悬液；
[0017]C、利用离心机2000r/min离心10min，取上清液，分装于50ml冻存管中。
[0018]本专利技术进一步设置为：所述S5中粪菌悬液的微生物的检测具体操作如下：检测粪菌悬液中是否含有轮状病毒、冠状病毒、球虫、隐孢子虫、孢子杆菌属和硒单胞菌属。供体牛粪便中应当不存在轮状病毒、冠状病毒、球虫、隐孢子虫、产气杆菌和大肠杆菌，满足无病毒、无细菌和无原虫感染的要求；同时需要存在孢子杆菌属和硒单胞菌属，才可以作为粪菌移植的供体牛。
[0019]本专利技术进一步设置为：所述S6中粪菌悬液的移植的具体操作如下：用注射器将吸取粪菌悬液灌注至犊牛结肠中，灌注部位为肛门内10
‑
15cm。
[0020]综上所述，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术利用结肠粪菌移植方法将符合标准的供体动物粪菌悬液移植到受体犊牛的结肠内，以达到改善犊牛肠道健康、提高宿主免疫力和降低死亡率及发病率的目的，节约牧场成本，本专利技术所提供的大肠粪菌移植技术方法，可以有效改善肠道微生态环境，增强机体免疫力，提高胃肠道功能，在改善宿主肠道健康方面具有潜在优势。
具体实施方式
[0021]以下对本专利技术作进一步详细说明。
[0022]实施例：一种低出生重犊牛结肠粪菌的移植方法，包括以下5个步骤：
[0023]S1.供体犊牛的选择标准；
[0024]S2.受体牛的选择标准；
[0025]S3.粪菌悬液的制备流程；
[0026]S4.粪菌悬液的保存；
[0027]S5.粪菌悬液的微生物的检测；
[0028]S6.粪菌悬液的移植。
[0029]所述S1中选择的供体犊牛需要在6月龄以内，健康，营养状况良好(鼻子、眼睛、嘴、尾巴、毛发等干净)；无抗菌药物的使用记录(抗生素、抗真菌药物或抗病毒药物)；没有传染病史(口蹄疫、肺炎、炭疽病等)；无直肠出血情况；粪便外观、颜色、成分无异常；检测供体牛粪便微生物，无病毒(轮状病毒、冠状病毒等)、无细菌(产气杆菌、大肠杆菌等)、无原虫(球虫、微小隐孢子虫等)感染；检测供体牛粪便微生物，存在孢子杆菌属和硒单胞菌属。
[0030]所述S2中受体牛需要出生重≤36公斤，日龄为0
‑
7日龄，无传染病史，没有抗菌药物的使用记录；
[0031]所述S3中制备粪菌悬液的具体操作如下：
[0032]A、选取健康犊牛采集粪便，采样人员佩戴一次性PE手套，通过刺激直肠肠壁使得
犊牛排便，用自封袋收集排出的粪便放在冰块上，迅速送至操作室进行处理；
[0033]B、在处理过程中需要保证在无菌状态下进行，按1:10的比例粪便中加入无菌、无抗的生理盐水(0.9％)进行稀释，搅拌为均质悬液；
[0034]C、利用离心机2000r/min离心10min，取上清液，分装于50ml冻存管中。
[0035]所述S4中粪菌悬液的微生物的检测具体操作如下：检测粪菌悬液中是否含有轮状病毒、冠状病毒、球虫、隐孢子虫、孢子杆菌属和硒单胞菌属。供体牛粪便中应当不存在轮状病毒、冠状病毒、球虫、隐孢子虫、产气杆菌和大肠杆菌，满足无病毒、无细菌和无原虫感染的要求；同时需要存在孢子杆菌属和硒单胞菌属，才可以作为粪菌移植的供体牛。
[0036]所述S5中粪菌悬液的移植的具体操作如下：用注射器将吸取粪菌悬液灌注至犊牛结肠中，灌注部位为肛门内10
‑
15cm。
[0037]通过试验研究结肠粪菌移植对新生低出生重(≤36kg)犊牛的影响：选择出生体重≤36kg的荷斯坦哺乳犊牛，共200头，将其分为对照组和粪菌移植组，每组100头犊牛，其中对照组不做任何处理，按正常新生低出生重本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种低出生重犊牛结肠粪菌的移植方法，其特征是：包括以下5个步骤：S1.供体犊牛的选择标准；S2.受体牛的选择标准；S3.粪菌悬液的制备流程；S4.粪菌悬液的保存；S5.粪菌悬液的微生物的检测；S6.粪菌悬液的移植。2.根据权利要求1所述的一种低出生重犊牛结肠粪菌的移植方法，其特征是：所述S1中选择的供体犊牛需要在6月龄以内，健康，营养状况良好；无抗菌药物的使用记录；没有传染病史；无直肠出血情况；粪便外观、颜色、成分无异常；检测供体牛粪便微生物，无病毒、无细菌、无原虫感染；检测供体牛粪便微生物，存在孢子杆菌属和硒单胞菌属。3.根据权利要求1所述的一种低出生重犊牛结肠粪菌的移植方法，其特征是：所述S2中受体牛的出生体重≤36公斤，日龄为0
‑
7日龄，无传染病史，没有抗菌药物的使用记录。4.根据权利要求1所述的一种低出生重犊牛结肠粪菌的移植方法，其特征是：所述S3中制备粪菌悬液的具体操作如下：A、选取健康犊牛采集粪便，采样人员佩戴一次性PE手套，通过刺激直肠肠壁使得犊牛排便...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐明，张展赫，吴东霖，李馨童，
申请(专利权)人：内蒙古农业大学，
类型：发明
国别省市：