一种抗HLA-G的NK细胞制造技术

本发明专利技术公开了一种抗HLA

【技术实现步骤摘要】
一种抗HLA
‑
G的NK细胞


[0001]本专利技术属于免疫治疗领域，具体涉及一种抗HLA
‑
G的NK细胞的制备及其应用。

技术介绍

[0002]人类白细胞抗原G(HLA
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G)分子是一种非典型的MHC I类分子，目前发现有7种亚型的HLA
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G蛋白，大多数研究集中在全长分子HLA
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G1及其可溶性亚型HLA
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G5。其受体是LILRB1(ILT2)和LILRB2(ILT4)，ILT2是免疫调节受体ILT家族的一员，是一种在先天性和适应性免疫细胞上都表达的抑制性受体，与MHC I类分子(如HLA
‑
G，在多种肿瘤类型上表达的一种免疫抑制性蛋白)结合。HLA
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G通过和受体的相互作用抑制细胞毒性T细胞、自然杀伤(NK)细胞和B细胞，诱导T细胞无反应性，调节骨髓细胞和促进T调节细胞(Tregs)。HLA
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G在淋巴癌、黑素瘤、乳腺癌和肺癌中皆有表达。作为机体内重要的免疫耐受分子，有助于免疫逃逸或免疫细胞无能，近年来被认为是一种新型的免疫检查点，成为一个有潜力的实体瘤治疗靶点。
[0003]自然杀伤细胞(Natural killer，NK)是细胞毒性淋巴细胞的一种类型，是天然免疫系统的主要组成部分。NK细胞在肿瘤和病毒感染细胞的宿主排斥反应中起重要作用，NK细胞更被认为是CD8+T细胞在天然免疫系统里的对应细胞。NK细胞的功能由多种细胞表面受体控制，包括ILT2、NKG2A、NKp80、NKp44、NKp46和CD226等。NK细胞的细胞毒性受激活和抑制信号相互作用的调节，抑制性受体通过识别自身MHC
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I类分子来阻止NK细胞的激活。
[0004]如何阻止HLA
‑
G与抑制性受体相互作用抑制NK细胞，从而激活NK细胞是一个亟需解决的问题。

技术实现思路

[0005]为了解决现有技术存在的上述问题，本专利技术提供了一种抗HLA
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G的NK细胞，该NK细胞分泌ILT2
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Fc，通过其和HLA
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G分子的结合，阻断HLA
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G和膜受体结合，解除HLA
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G分子对NK细胞杀伤力的抑制，从而提高肿瘤细胞的杀伤效率。
[0006]本专利技术一方面提供了一种抗原结合片段，所述抗原结合片段与HLA
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G特异性地结合；所述抗原结合片段包含ILT2和Fc；所述ILT2的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；所述Fc的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
[0007]其中ILT2的cDNA序列(SEQ ID NO:1)：
[0008]atgaccccgattctgaccgtgctgatttgcctgggcctgagcctgggcccgcgcacccatgtgcaggcgggccatctgccgaaaccgaccctgtgggcggaaccgggcagcgtgattacccagggcagcccggtgaccctgcgctgccagggcggccaggaaacccaggaatatcgcctgtatcgcgaaaaaaaaaccgcgccgtggattacccgcattccgcaggaactggtgaaaaaaggccagtttccgattccgagcattacctgggaacataccggccgctatcgctgctattatggcagcgataccgcgggccgcagcgaaagcagcgatccgctggaactggtggtgaccggcgcgtatattaaaccgaccctgagcgcgcagccgagcccggtggtgaacagcggcggcaacgtgaccctgcagtgcgatagccaggtggcgtttgatggctttattctgtgcaaagaaggcgaagatgaacatccgcagtgcctgaacagccagccgcatgcgcgcggcagcagccgcgcgatttttagcgtgggcccggtgagcccgagccgccgctggtggtatcgctgctatgcgtat
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[0009]其中Fc片段的cDNA序列(SEQ ID NO:2)
[0010]Acccatacctgcccgccgtgcccggcgccggaactgctgggcggcccgagcgtgtttctgtttccgccgaaaccgaaagataccctgatgattagccgcaccccggaagtgacctgcgtggtggtggatgtgagccatgaagatccgcaggtgaaatttaactggtatgtggatggcgtgcaggtgcataacgcgaaaaccaaaccgcgcgaacagcagtataacagcacctatcgcgtggtgagcgtgctgaccgtgctgcatcagaactggctggatggcaaagaatataaatgcaaagtgagcaacaaagcgctgccggcgccgattgaaaaaaccattagcaaagcg本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗原结合片段，其特征在于，所述抗原结合片段与HLA
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G特异性地结合；所述抗原结合片段包含ILT2和Fc；所述ILT2的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；所述Fc的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。2.一种分离的多核苷酸分子，其特征在于，所述多核苷酸分子包括编码权利要求1所述的抗原结合片段的核苷酸序列。3.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体包含权利要求2所述的多核苷酸分子；所述载体包括质粒、和/或病毒来源的载体；所述病毒来源的载体包括慢病毒载体、和/或逆转录病毒载体、和/或腺病毒载体、和/或腺相关病毒载体。4.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包含权利要求3所述的表达载体；所述细胞包括NK细胞。5.权利要求1所述的抗原结合片段、权利要求2所述的多核苷酸分子、权利要求3所述的表达载体或权利要求4所述的宿主细胞中在...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴丹莉，陈莉，邓长江，尚现岗，李春娜，
申请(专利权)人：山东赛恩福干细胞工程集团有限公司，
类型：发明
国别省市：