一种检测肾上腺素和磺酸肾上腺素含量的方法技术

本发明专利技术提供了一种检测肾上腺素和磺酸肾上腺素含量的方法，包括：使用高效液相色谱法对待测样品进行检测，得到待测样品中肾上腺素和磺酸肾上腺素的色谱峰面积，根据峰面积得到待测样品溶液中肾上腺素和磺酸肾上腺素的含量；其中，所述高效液相色谱所用检测器为荧光检测器，激发波长为275nm～285nm，发射波长为315nm～325nm。该方法检测效率和准确度高，且可同时检测肾上腺素和磺酸肾上腺素的含量。可同时检测肾上腺素和磺酸肾上腺素的含量。

【技术实现步骤摘要】
一种检测肾上腺素和磺酸肾上腺素含量的方法


[0001]本专利技术涉及药物分析
，尤其涉及一种检测肾上腺素和磺酸肾上腺素含量的方法。

技术介绍

[0002]肾上腺素旧称“副肾上腺素”，一般作用是使心脏收缩力上升；心脏、肝、和筋骨的血管扩张和皮肤、粘膜的血管缩小。在药物上，肾上腺素在心脏停止时用来刺激心脏，或是哮喘时扩张气管。肾上腺素能使心肌收缩力加强、兴奋性增高，传导加速，心输出量增多。对全身各部分血管的作用，不仅有作用强弱的不同，而且还有收缩或舒张的不同。对皮肤、粘膜和内脏(如肾脏)的血管呈现收缩作用；对冠状动脉和骨骼肌血管呈现扩张作用等。由于它能直接作用于冠状血管引起血管扩张，改善心脏供血，因此是一种作用快而强的强心药。
[0003]关于肾上腺素检测，现有标准中的方法，流动相中用到了四甲基硫酸氢胺、庚烷磺酸钠离子对试剂和乙二胺四乙酸二钠，首先基线噪音波动较大，主峰积分准确度差；再者检测波长为205nm，接近多数溶剂的截止波长，紫外吸收存在干扰；况且也存在与国家注册标准(YBH17082004
‑
2015Z)同样的情况，就是紫外吸收响应值很低，峰面积系统适用性不稳定。
[0004]因此，有必要研究一种能够快速准确检测肾上腺素的方法。

技术实现思路

[0005]为了解决现有技术中存在的上述技术问题之一，本专利技术提供了一种检测肾上腺素和磺酸肾上腺素含量的方法。该方法检测效率高，准确度高，可同时检测肾上腺素和磺酸肾上腺素的含量。
[0006]本专利技术采用如下技术方案：
[0007]一种检测肾上腺素和磺酸肾上腺素含量的方法，包括：使用高效液相色谱法对待测样品进行检测，得到待测样品中肾上腺素和磺酸肾上腺素的色谱峰面积，根据峰面积得到待测样品溶液中肾上腺素和磺酸肾上腺素的含量；
[0008]其中，所述高效液相色谱所用检测器为荧光检测器，激发波长为275nm～285nm，发射波长为315nm～325nm。
[0009]本专利技术发现，肾上腺素的紫外响应低，但其与磺酸肾上腺素结构相似，且荧光响应值正常，与磺酸肾上腺素具有相同的最大激发波长和最大发射波长，因此，肾上腺素和磺酸肾上腺素均采用荧光检测器进行检测，将磺酸肾上腺素和肾上腺素检测条件合并统一，可实现两种激素的同时检测。
[0010]本专利技术中，荧光检测器的激发波长可以是275nm，276nm，277nm，278nm，279nm，280nm，281nm，282nm，283nm，284nm或285nm，优选278nm～283nm。荧光检测器的发射波长可以是315nm，316nm，317nm，318nm，319nm，320nm，321nm，322nm，323nm，324nm或325nm，优选318nm～323nm。
[0011]在一些实施方案中，所述高效液相色谱所用流动相包括流动相A和流动相B。在一些具体实施方案中，所述流动相A为庚烷磺酸钠溶液或辛烷磺酸钠溶液。在一些具体实施方案中，所述流动相B为醇类或腈类有机溶剂，例如甲醇、乙腈等。本专利技术流动相A优选为庚烷磺酸钠溶液，流动相B优选为乙腈。
[0012]在一些实施方案中，所述流动相A与流动相B的体积比为(25～80):(20～75)，例如80：20、75：25、70：30、30：70等。
[0013]在一些实施方案中，所述流动相A中庚烷磺酸钠溶液或辛烷磺酸钠的质量体积浓度为0.9％～1.3％(w/v)。
[0014]在一些实施方案中，所述流动相A的pH值为2.3～2.7，例如2.3、2.4、2.5、2.6或2.7。
[0015]在一些实施方案中，所述高效液相色谱的色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱。
[0016]在一些实施方案中，所述流动相在色谱柱中的流速为0.6mL/min～1.0mL/min，例如0.6mL/min、0.7mL/min、0.8mL/min、0.9mL/min或1.0mL/min。
[0017]在一些实施方案中，使用所述流动相进行梯度洗脱。在一些具体实施方案中，所述洗脱的时间为20～30min。在一些具体实施方案中，所述洗脱的温度为15℃～30℃。
[0018]在一些更具体实施方案中，所述梯度洗脱的时间为25min。在一些优选实施方案中，在梯度洗脱0～8min内，所用流动相中流动相A与流动相B的体积比为(70～80):(20～30)，例如80：20；在梯度洗脱8～19min内，所用流动相中流动相A与流动相B的体积比为(25～35):(65～75)，例如30：70；在梯度洗脱19～25min内，所用流动相中流动相A与流动相B的体积比为(70～80):(20～30)，例如80：20。
[0019]在一些具体实施方案中，所述方法包括如下步骤：
[0020](1)使用磷酸调节庚烷磺酸钠或辛烷磺酸钠溶液的pH值为2.3～2.7，得到流动相A，将流动相A与流动相B混合，得到流动相，其中，所述庚烷磺酸钠或辛烷磺酸钠溶液的浓度为0.9％～1.3％；
[0021](2)配制一定浓度的肾上腺素对照品溶液和磺酸肾上腺素对照品溶液，使用溶剂将待测样品稀释配制成肾上腺素浓度为2.5μg/mL～10.0μg/mL的供试品溶液；
[0022](3)使用高效液相色谱，以步骤(1)得到的流动相进行梯度洗脱，并用荧光检测器进行检测，激发波长为280nm，发射波长为320nm，得到液相色谱图；
[0023](4)根据得到的液相色谱图计算肾上腺素和磺酸肾上腺素的含量，计算公式为：
[0024][0025]其中：H％代表肾上腺素或磺酸肾上腺素的含量；
[0026]A
样
代表供试品溶液中肾上腺素或磺酸肾上腺素的峰面积，单位是mAU
·
min；
[0027]A
对
代表肾上腺素或磺酸肾上腺素对照品溶液的峰面积，单位是mAU
·
min；
[0028]C
对
代表肾上腺素或磺酸肾上腺素对照品溶液的浓度，单位是μg/mL；
[0029]C
样标示
代表待测样品中肾上腺素的标示含量，单位是μg/mL。
[0030]在一些实施方案中，步骤(2)中所用溶剂为流动相A与流动相B的体积比为(70～80)：(20～30)的流动相，例如所用溶剂为庚烷磺酸钠溶液与乙腈以体积比80:20的混合液。
[0031]与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：
[0032]1、本专利技术的方法可以实现在一个色谱条件下同时检测肾上腺素含量和磺酸肾上腺素的含量，峰形良好，能够达到基线分离；
[0033]2、本专利技术的方法分析灵敏度高、结果准确可靠、方法简便快捷，可用于含有肾上腺素类注射液的分析检测；
[0034]3、本专利技术的方法采用荧光检测器，比普通的紫外检测器灵敏度更高，能够检测到磺酸肾上腺素杂质的最低量达到0.072ng(检测限)；
[0035]4、本专利技术的方法供试品溶液本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测肾上腺素和磺酸肾上腺素含量的方法，包括：使用高效液相色谱法对待测样品进行检测，得到待测样品中肾上腺素和磺酸肾上腺素的色谱峰面积，根据峰面积得到待测样品溶液中肾上腺素和磺酸肾上腺素的含量；其中，所述高效液相色谱所用检测器为荧光检测器，激发波长为275nm～285nm，发射波长为315nm～325nm。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱所用流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为庚烷磺酸钠或辛烷磺酸钠溶液，所述流动相B为醇类或腈类有机溶剂。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述流动相A与流动相B的体积比为(25～80):(20～75)。4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述流动相A中庚烷磺酸钠或辛烷磺酸钠的浓度为0.9％～1.3％；和/或所述流动相A的pH值为2.3～2.7。5.根据权利要求2～4任一项所述的方法，其特征在于，所述流动相B为甲醇或乙腈，优选乙腈。6.根据权利要求1～5任一项所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱的色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱；优选地，所述流动相在色谱柱中的流速为0.6mL/min～1.0mL/min。7.根据权利要求1～6任一项所述的方法，其特征在于，使用所述流动相进行梯度洗脱，优选地，所述洗脱的时间为20～30min，所述洗脱的温度为15℃～30℃。8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱的时间为25min；优选地，在梯度洗脱0～8min内，所用流动相中流动相A与流动相B的体积比为(70～80):(20～30)；在梯度洗脱8～19min内，所用流动相中流动相A与流动相B的体积比...

【专利技术属性】
技术研发人员：张杰，蔡雪燕，胡思旭，江惠莲，徐正秀，施务务，
申请(专利权)人：蚌埠丰原医药科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：