一种去除热原的方法技术

本发明专利技术提供一种使用羟基氯化铝去除透明质酸或其衍生物或他们的盐等生物相容性高分子中热原的方法，不仅能有效去除热原，而且能够提高透明质酸或其衍生物或他们的盐的水溶液的稳定性。液的稳定性。

【技术实现步骤摘要】
一种去除热原的方法


[0001]本专利技术属于医药技术与生物医药领域，具体涉及一种去除热原的方法，由此方法可制备获得不含热原的透明质酸或其衍生物或它们的盐等。

技术介绍

[0002]透明质酸，英文名称为hyaluronic acid，英文缩写为HA，常称为玻璃酸，常常是钠盐形式，即透明质酸钠。透明质酸是人类在自然界中发现的保湿性最好的物质之一，被誉为理想的天然保湿因子。
[0003]透明质酸是由美国的Meyer等人于1934年首先从牛眼玻璃体中分离得到的一种以乙酰氨基葡萄糖与葡萄糖醛酸双糖单元交替连接而成的直链酸性黏多糖。HA普遍存在于人和动物的皮肤、血清、组织细胞间液中，具独特的皮肤保湿、营养、抗衰老、稳定乳化、抗菌消炎、促进伤口愈合及药物载体等特殊功能，是一种在日化、制药及医学美容、生化与保健食品等领域内用途极为广泛、性能优良的功能性生物相容性高分子化合物。
[0004]透明质酸在医疗美容领域的常见应用形式为：制成透明质酸钠凝胶作为皮下填充剂，以实现美容和填充的作用；用作透明质酸钠外用敷贴的主要成分；用作透明质酸钠外用修复生物膜或外用修复贴的主要成分等。透明质酸在制药领域的常见应用形式包括：作为主药成分制成滴眼剂等药品，如玻璃酸钠滴眼液；作为药用辅料用作多种剂型的处方组成成分；经修饰或结构改造过的透明质酸可作为新型给药系统的载体等。在透明质酸钠的各项应用中，目前最为常见和知名的是注射用透明质酸钠凝胶，注射用透明质酸钠凝胶也称为玻尿酸。
[0005]中国对注射用透明质酸钠凝胶是按医疗器械进行管理，由于其适用范围或预期用途为用于面部真皮组织中层至深层注射以纠正中重度鼻唇部皱纹等，且对人体具有潜在风险的医疗器械类型或药品类型，因此，对注射用透明质酸钠凝胶等产品生产过程中各潜在风险、各杂质成分或污染成分的控制或有效去除，已成为在此类产品生产过程中需要重点关注的问题，而这些问题的彻底解决，可以由此促成上述这些产品在临床和医疗美容应用中的避免关键风险点，从而为患者和医疗美容用户提供安全性更高的产品。
[0006]修饰化透明质酸也可称为透明质酸衍生物，修饰化透明质酸钠最常见的类型是交联透明质酸钠，在各种交联透明质酸钠中，因交联方式、制备过程等的不同而对应各种交联透明质酸钠产品；目前在文献及产品上市信息中还可查到的修饰化透明质酸包括
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SH化透明质酸、PEG修饰化透明质酸等。氧化透明质酸，是多种修饰化或结构改造型透明质酸的一个新兴类别。氧化透明质酸，除了可以用作构建医美用交联水凝胶的核心原料之外，还可作为创新型外用型医疗器械及创新型外用药品的核心原料。
[0007]氧化透明质酸，即醛基透明质酸，其英文缩写一般为AHA。氧化程度可根据产品开发的需要及产品特征而相应调节，氧化位点可以通过个性化的调节化学合成工艺实现并达到预期效果，分子量范围与用作原料的透明质酸的初始分子量相关，可经交联反应形成凝胶网络的特征。
[0008]热原，是由微生物产生的，能引起恒温动物体温异常升高的致热物质。热原包括细菌性热原、内源性高分子热原、内源性低分子热原及化学热原等。这里所指的“热原”，主要是指细菌性热原，是某些细菌的代谢产物、细菌尸体及内毒素。致热能力最强的是革兰氏阴性杆菌的产物，其次是革兰阳性杆菌类，革兰阳性球菌则较弱，霉菌、酵母菌、甚至病毒也能产生热原。热原通常是磷脂多醇与蛋白质结合而成的复合物。磷脂多醇是复合物的活性中心，致热作用最强。其化学组成因菌种不同而有所差异。分子量一般为5
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104～5
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105Da，分子量越大致热作用也越强。当注入人体的注射剂中含有热原量达1μg/kg时，就可引起不良反应，发热反应通常在注入人体1小时后出现，可使人体产生发冷、寒颤、发热、出汗、恶心、呕吐等症状，有时体温可升至40℃以上，严重者甚至昏迷、虚脱，如不及时抢救，可危及生命。该现象称为“热原反应”。对于注射型的医疗器械，其中若携带有热原，也会导致人体出现热原反应。细菌内毒素，是革兰氏阴性菌细胞壁上的一种脂多糖和微量蛋白的复合物，它是细菌死亡或解体后才释放出来的一种具有内毒素生物活性的物质。
[0009]《中国药典》2000年版规定热原检查采用家兔法，细菌内毒素检查采用鲎试剂法。在此后历版药典之中，对热原的检查都沿用上述这些方法。
[0010]由于家兔对热原的反应与人基本相似，目前家兔法仍为各国药典规定的检查热原的法定方法。《中国药典》2005年版规定的热原检查法系将一定剂量的供试品，静脉注入家兔体内，在规定时间内，观察家兔体温升高的情况，以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定。检查结果的准确性和一致性取决于试验动物的状况、试验室条件和操作的规范性。家兔法检测内毒素的灵敏度为0.001μg/ml，试验结果接近人体真实情况，但操作繁琐费时，不能用于注射剂生产过程中的质量监控，且不适用于放射性药物、肿瘤抑制剂等细胞毒性药物制剂。
[0011]细菌内毒素检查法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。细菌内毒素的量用内毒素单位(EU)表示。
[0012]细菌内毒素检查包括凝胶法和光度测定法两种方法，前者利用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应的原理来检测或半定量内毒素，后者包括浊度法和显色基质法，系分别利用鲎试剂与内毒素反应过程中的浊度变化及产生的凝固酶使特定底物释放出呈色团的多少来测定内毒素。
[0013]鲎试剂法检查内毒素的灵敏度为0.0001μg/ml，比家兔法灵敏10倍，操作简单易行，试验费用低，结果迅速可靠，适用于注射剂生产过程中的热原控制和家兔法不能检测的某些细胞毒性药物制剂，但其对革兰阴性菌以外的内毒素不灵敏，目前尚不能完全代替家兔法。
[0014]热原的特性有：耐热性、滤过性、水溶性、不挥发性，且不耐强酸、强碱和强氧化剂。
[0015]热原包括细菌内毒素，是药品注射剂和注射型医疗器械中不可避免的可引起不良反应的有害成分。
[0016]在药品注射剂和注射型医疗器械的生产过程中，典型的热原污染途径包括：1、从溶剂中引入，这是药品注射剂和注射型医疗器械出现热原污染的主要原因，以下的因素：蒸馏器结构不合理、操作不当、注射用水贮存时间过长，都会带来热原的污染。因此，在药品和医疗器械生产过程中，应使用新鲜注射用水，最好能随蒸随用。2、从原料中带入，容易滋长
微生物的药物，如葡萄糖等，因贮存时间较长包装破损常致热原污染；用生物方法制造的药品，如右旋糖酐、水解蛋白、抗生素等，常因热原成分未除尽而在后续注射剂或医疗器械生产中带入热原。3、从容器、器具、管道和装置中带入。4、制备过程中带入，制备过程中，由于车间的环境控制不到位、操作时间长、装置达不到充分密闭等，均增加污染细菌的机会，从而导致了热原的产生。5、从输液器引入。这种热原污染一般体现于药品注射剂和注射型医疗器械的使用过程中，但对于预灌装式注射型医疗器械，也可能在预灌装生产环节由输液器引入热原。6、可能使产品中本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种去除透明质酸或其衍生物或他们的盐中热原的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将羟基氯化铝溶于水中，得羟基氯化铝的水溶液；(2)将透明质酸或其衍生物或他们的盐溶于水中，得透明质酸或其衍生物或他们的盐的水溶液；(3)搅拌下，向步骤(2)所得溶液中滴加步骤(1)所得溶液，静置，取上清，先后用0.45μm微孔滤膜和0.22μm微孔滤膜过滤。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，进一步包括步骤(4)去除水。3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述透明质酸衍生物为交联透明质酸、氧化透明质酸、巯基化透明质酸、PEG化透明质酸。4.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述透明质酸或其衍生物的盐为碱金属盐或碱土金属盐。优选，所述盐为钠盐或钾盐。所述透明质酸或其衍生物或他们的盐优选透明质酸钠。5.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，透明质酸或其衍生物或他们的盐的重均分子量为5万
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200万道尔顿，优选10
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50万道尔顿。6.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，羟基氯化铝为[Al2(OH)5Cl]
m
，m为正整数且m≤10。7.如权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：李静，赵海光，薛秀生，何可莹，段瑞，杨茂伟，徐福建，
申请(专利权)人：稳得希林杭州生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：