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一种实时荧光定量PCR实验内标的设计方法技术

技术编号:3806649 阅读:542 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
一种实时荧光定量PCR实验内标的设计方法,其包括以下步骤:(1)针对要检测的目的基因设计一套引物序列,选择对应的内标基因,其引物序列与目的基因相同;(2)设计目的基因的探针,确定浓度,在其5’端标记一个荧光报告基团;(3)设计内标基因的两种探针,一种探针针对内标基因,另一种探针则是针对目的基因的另一序列,在两种探针的5’端分别标记一个相同的荧光报告基团;(4)提取纯化目的核酸,进行实时荧光定量PCR扩增。本发明专利技术可有效监测核酸提取、扩增及产物分析中出现的误差,从而避免假阴性结果。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种实时荧光定量PCR实验内标的设计方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)针对要检测的目的基因设计一套引物序列,选择对应的内标基因,其引物序列与目的基因相同;(2)设计目的基因的探针,确定浓度,在其5’端标记一个荧光报告基团;(3)设计内标基因的两种探针,一种探针针对内标基因,另一种探针则是针对目的基因的另一序列,在两种探针的5’端分别标记一个相同的荧光报告基团;(4)提取纯化目的核酸,进行实时荧光定量PCR扩增。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:蔡鸣镝戴立忠熊晓燕
申请(专利权)人:戴立忠
类型:发明
国别省市:43[中国|湖南]

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