一种细胞保存液和由其制备的细胞制剂在治疗间质性肺病中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种细胞保存液和由其制备的细胞制剂在治疗间质性肺病中的应用，特别地，所述的细胞制剂为间充质干细胞制剂，其可直接用于临床，为间充质干细胞治疗间质性肺病提供一种新方法。一种新方法。

【技术实现步骤摘要】
一种细胞保存液和由其制备的细胞制剂在治疗间质性肺病中的应用


[0001]本专利技术属于生物制药领域，具体涉及一种用于治疗间质性肺病的间充质干细胞制剂及其制备方法。

技术介绍

[0002]间质性肺病(ILD)是以弥漫性肺实质、肺泡炎症和间质纤维化为病理基本病变，以活动性呼吸困难、X线胸片示弥漫阴影、限制性通气障碍、弥散功能(DLCO)降低和低氧血症为临床表现的不同类疾病群构成的临床病理实体的总称。急性期以损伤或炎症病变为主，慢性期以纤维化病变为主。
[0003]肺纤维化(PF)是以成纤维细胞增殖及大量细胞外基质聚集并伴炎症损伤、组织结构破坏为特征的一类肺疾病的终末期改变。绝大部分肺纤维化病人病因不明(特发性)，这组疾病称为特发性间质性肺炎，是间质性肺病中一大类。而特发性间质性肺炎中最常见的是以肺纤维化病变为主要表现形式的疾病类型为特发性肺纤维化(IPF)，是一种能导致肺功能进行性丧失的严重的间质性肺疾病。
[0004]近些年，虽然随着技术手段的进步，肺纤维化机制和治疗药物的研究取得一定进展，但是发病机理尚未完全阐释清楚，并且缺乏有效的治疗方法。在损伤
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炎症
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修复三期过程中，任何一项或多项过程的失调，均可以导致肺纤维化的发生。目前，肺纤维化的临床治疗方法包括抗氧化剂、抗纤维化剂、细胞因子抑制剂等，治疗手段主要有药物治疗和手术治疗等。但是，药物治疗虽然明显减缓肺活量下降速率的能力，但是治疗效果有限只能延缓肺功能的继续恶化，不能逆转肺纤维化过程，而且还可能会引起严重的胃肠道耐受性问题，并且在使用中已发现可引起肾毒性，具有较大的副作用；而肺移植作为目前治疗肺纤维化最有效的手段，由于捐献器官资源缺乏、排斥反应、感染、并发症和费用昂贵等缺陷，限制了其应用。
[0005]间充质干细胞(mesenchymal stem cell，MSC)是一种具备多向分化潜能、趋化特性、免疫调节作用及旁分泌功能的多能干细胞，能通过分泌多种细胞因子和可溶性因子，促进组织再生，具有抗感染和抗纤维化的特性，不仅降低炎性因子水平，减少活化的成纤维细胞和胶原的沉积，还能促进上皮修复。MSCs因其具有安全无毒、来源丰富、直接应用于损伤组织以及治疗范围广等优点，成为治疗肺纤维化疾病的替代方法。
[0006]间充质干细胞治疗肺纤维化的作用原理主要包括：(1)抗氧化机制：间充质干细胞具有一定的抗氧化和清除氧自由基的作用，有助于肺纤维化的减轻。(2)炎症趋化机制：干细胞具有向炎症部位趋化的特点，当肺组织出现损伤时会释放大量细胞因子、趋化因子等在内的信号分子，MSCs通过感知损伤信号后会向受损部位趋化、迁移、定植并参与组织损伤修复。(3)细胞归巢机制：归巢至损伤部位后即可通过分化为受损细胞的表型，或是通过创建微环境促进组织内源性细胞的局部再生。(4)抗炎和免疫调节机制：间充质干细胞通过分泌抗炎因子和抗菌多肽或者抑制促炎信号通路、上调炎症信号通路和细菌的吞噬作用等发
挥抗炎的免疫调节作用，减轻肺纤维化。MSCs通过提高M2型巨噬细胞水平、减少中性粒细胞浸润、抑制T细胞增殖和活化，减少T细胞的干扰素
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γ和肿瘤坏死因子
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α分泌，上调白介素
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4抑制炎症修复损伤组织。(5)旁分泌机制：间充质干细胞分泌诸多因子，包括肝细胞生长因子、血管生成素
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1、血管内皮细胞生长因子、趋化因子、炎症因子和调节肽等，直接或间接减轻肺内炎症反应和肺纤维化。
[0007]目前，大多数研究集中在间充质干细胞治疗间质性肺病的机制上，在临床应用方面缺乏可行性。因此，本领域需要开发一种新的治疗间质性肺病，特别是肺纤维化疾病的方法，保证细胞活率和细胞特征的情况下为临床治疗提供足够的使用时间，为临床治疗提供可行性。

技术实现思路

[0008]本专利技术目的是提供一种特定成分和特定比例的细胞保存液，由其制备的细胞制剂，为间充质干细胞治疗间质性肺病提供一种新方法。
[0009]本专利技术的第一方面，提供一种细胞保存液，其由二甲基亚砜(DMSO)、人血白蛋白和复方电解质溶液组成。
[0010]在另一优选例中，二甲基亚砜的体积百分比为1％
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10％，优选地为5％
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10％，按细胞保存液的总体积计。
[0011]在另一优选例中，人血白蛋白的体积百分比为30％
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40％，优选地为30％
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35％，按细胞保存液的总体积计。
[0012]在另一优选例中，所述的细胞保存液由5％二甲基亚砜(DMSO)、35％人血白蛋白和60％复方电解质溶液组成，按细胞保存液的总体积计。
[0013]在另一优选例中，所述DMSO为临床级DMSO。
[0014]在另一优选例中，所述复方电解质溶液的组成包括：氯化钠、葡萄糖酸钠、醋酸钠、氯化钠、氯化镁。
[0015]本专利技术第二方面，提供一种如第一方面所述的细胞保存液的用途，用于制备或保存细胞的制剂。
[0016]本专利技术第三方面，提供一种细胞制剂，其中，所述细胞制剂包含如第一方面所述的细胞保存液和间充质干细胞。
[0017]在另一优选例中，所述的细胞制剂可制剂用于临床。
[0018]在另一优选例中，所述细胞制剂还包含药学上可接受的载体。
[0019]在另一优选例中，所述间充质干细胞为脐带间充质干细胞或脂肪间充质干细胞。
[0020]在另一优选例中，所述细胞为培养至P6的脐带间充质干细胞。
[0021]本专利技术第四方面，提供一种如第三方面所述的细胞制剂的方法，包括步骤：
[0022]1)将细胞悬于培养基中，过滤；
[0023]2)将过滤后的细胞悬液进行离心，获得细胞沉淀；
[0024]3)将所得细胞沉淀悬于如上所述的细胞保存液中，得到所述的细胞制剂。
[0025]本专利技术第五方面，提供一种细胞冻存方法，包括步骤：取细胞与如第一方面所述的细胞保存液混合，冻存。
[0026]在另一优选例中，所述细胞冻存密度为1.0x106‑
1.0x108/ml，优选地为1.0x106‑
1.0x107/ml。
[0027]在另一优选例中，冻存体积为10ml
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100ml，优选地为10ml
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30ml。
[0028]本专利技术第六方面，提供一种如第三方面所述的细胞制剂在制备治疗间质性肺病的药物中的用途。
[0029]在另一优选例中，所述的间质性肺病为肺纤维化。
[0030]应理解，在本专利技术范围内中，本专利技术的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
附图说明
[0031]图1示出了人脐带间充质干细胞注射液气道内滴注两次对肺纤维化大鼠肺组织病变的影响。
[0032]图2示出了人脐带间充质干细胞注射本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种细胞保存液，其特征在于，其由二甲基亚砜(DMSO)、人血白蛋白和复方电解质溶液组成。2.如权利要求1所述的细胞保存液，其特征在于，二甲基亚砜的体积百分比为1％
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10％，优选地为5％
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10％，按细胞保存液的总体积计。3.如权利要求1
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2中任一项所述的细胞保存液，其特征在于，人血白蛋白的体积百分比为30％
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40％，优选地为30％
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35％，按细胞保存液的总体积计。4.如权利要求1
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3中任一项所述的细胞保存液的用途，其特征在于，用于制备或保存细胞的制剂。5.一种细胞制剂，其特征在于，所述细胞制剂包含如权利要求1
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3中任一项所述的细胞保存液和间充质干细...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋蕊，陈保鼎，高莹，高宏，
申请(专利权)人：上海莱馥医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：