一种含脂肪间充质干细胞冻干粉的化妆品制备方法技术

本发明专利技术提供了一种含脂肪间充质干细胞冻干粉的化妆品制备方法。本发明专利技术首次提供了针对Caspase

【技术实现步骤摘要】
一种含脂肪间充质干细胞冻干粉的化妆品制备方法


[0001]本专利技术涉及化妆品领域，特别涉及一种含脂肪间充质干细胞冻干粉的化妆品制备方法。

技术介绍

[0002]人脂肪间充质干细胞是一种富含于人体脂肪组织中的成体间充质干细胞。这些干细胞具有多向分化潜能，在体外可以向脂肪，骨，软骨，肌肉和神经细胞分化。并且人脂肪间充质干细胞能够分泌多种生物活性物质，包括蛋白质、多肽及细胞因子等，比如干细胞生长因子(SCGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、胰岛素样生长因子(IGF)、肝细胞生长因子(HGF)和转化生长因子等，这些细胞生长因子能够控制或者维持受伤组织细胞，引导其自身修复。与胚胎干细胞相比，人脂肪间充质干细胞作为成体干细胞可以避免相关的伦理问题，与骨髓干细胞相比，人脂肪间充质干细胞获取方式微创。综合以上优点，人脂肪间充质干细胞在细胞治疗及再生医学中具有广泛的应用前景。
[0003]目前临床使用的MSCs大多就是经体外培养、低温保存后的。冻存过程中导致的损伤一般是由细胞在冷冻过程中脱水、氧自由基产生和细胞凋亡酶如caspase的激活所致。caspase
‑
3在细胞凋亡中起着不可替代的作用，caspase
‑
3基因转染昆虫Sf9细胞后引起细胞凋亡，这个过程可以被Bcl
‑
2阻断；在发生凋亡的细胞提取液中去除caspase
‑
3后，这些提取液就失去了诱导细胞凋亡的能力；再加入纯化的caspase
‑
3它又能恢复致凋亡的功能。有研究显示用早期代数的MSCs的治疗效果要比晚期的效果好。因此，通过抑制细胞冻存过程中的凋亡可以有效维持MSCs移植时细胞状态。

技术实现思路

[0004]针对现有技术所存在的技术问题，本专利技术提供了一种含脂肪间充质干细胞冻干粉的化妆品制备方法。所述冻干粉能够促进成纤维细胞的活性，延缓细胞衰老。
[0005]具体而言，本专利技术首先提供了一种脂肪间充质干细胞冻干粉，所述冻干粉是将脂肪间充质干细胞与冻存保护剂混合后冻干制备到。
[0006]优选地，所述冻存保护剂包括Caspase
‑
3单克隆抗体、牛血清白蛋白、海藻糖、蔗糖和PEG。
[0007]优选地，所述冻存保护剂是采用DMEM完全培养基配置。
[0008]优选地，所述冻存保护剂包括5
‑
15％Caspase
‑
3单克隆抗体、2
‑
20％牛血清白蛋白、2
‑
20％海藻糖、2
‑
20％蔗糖和2
‑
20％PEG。
[0009]进一步优选地，所述冻存保护剂包括5％Caspase
‑
3单克隆抗体、10％牛血清白蛋白、10％海藻糖、10％蔗糖、10％PEG。
[0010]进一步优选地，所述冻存保护剂包括10％Caspase
‑
3单克隆抗体、15％牛血清白蛋白、15％海藻糖、15％蔗糖、15％PEG。
[0011]进一步优选地，所述冻存保护剂包括15％Caspase
‑
3单克隆抗体、20％牛血清白蛋
白、20％海藻糖、20％蔗糖、20％PEG。
[0012]优选地，所述Caspase
‑
3单克隆抗体的重链可变区序列如SEQ ID NO:2所示，轻链可变区序列如SEQ ID NO:3所示。
[0013]进一步优选地，所述Caspase
‑
3单克隆抗体的重链可变区包括CDR
‑
H1、CDR
‑
H2、CDR
‑
H3，所述CDR
‑
H1
‑
3的序列如SEQ ID NO.4
‑
6所示，轻链可变区包括CDR
‑
L1、CDR
‑
L2、CDR
‑
L3，所述CDR
‑
L1
‑
3的序列如SEQ ID NO.7
‑
9所示。
[0014]另一方面，本专利技术还提供了所述冻存保护剂在制备间充质干细胞冻干粉中的用途。
[0015]进一步，所述冻干粉能够促进成纤维细胞的活性，延缓细胞衰老。
[0016]另一方面，本专利技术还提供了一种间充质干细胞冻干粉的制备方法，其特征在于，所述方法是将脂肪间充质干细胞与冻干保护剂混合后冻干制备到。
[0017]优选地，本专利技术还提供了所述间充质干细胞冻干粉在制备化妆品中的用途，所述冻干粉能够促进成纤维细胞的活性，延缓细胞衰老。
[0018]优选地，所述化妆品中还包括抗氧化剂、稳定剂，乳化剂，可溶化剂，颜料及香料等通常的助剂。
[0019]另一方面，本专利技术还提供了一种含有脂肪间充质干细胞冻干粉的化妆品，其特征在于，所述化妆品可有效促进成纤维细胞的增殖和刺激胶原蛋白的分泌。
[0020]优选地，所述化妆品中包括所述的脂肪间充质干细胞冻干粉以及抗氧化剂、稳定剂、乳化剂、可溶化剂、颜料及香料。
[0021]另一方面，本专利技术还提供了一种制备所述的化妆品的方法，其特征在于，所述方法包括将所述的脂肪间充质干细胞冻干粉与抗氧化剂、稳定剂，乳化剂，可溶化剂，颜料及香料混合均匀即可制备得到。
[0022]另一方面，本专利技术还提供了一种Caspase
‑
3单克隆抗体，其特征在于重链可变区序列如SEQ ID NO:2所示，轻链可变区序列如SEQ ID NO:3所示。
[0023]优选地，本专利技术还提供了所述Caspase
‑
3单克隆抗体在制备冻存保护剂中的用途。
[0024]本专利技术的优点如下：
[0025]1)本专利技术首次提供了针对Caspase
‑
3的单克隆抗体，该抗体具备良好的结合活性和特异性，能有效抑制细胞中的Caspase
‑
3蛋白的活性，抑制细胞凋亡，延长细胞的冻存周期。经实验验证，以含有Caspase
‑
3单克隆抗体的冻存保护剂可以有效提升冻存细胞的复苏活性，减少因冻存过程中因为环境变化而激发的凋亡刺激。延长细胞的冻存时间。
[0026]2)采用本专利技术实验组冻存保护剂冻存1个月后复苏的脂肪间充质干细胞可以高效率地促进成纤维细胞进行增殖和促进成纤维细胞分泌I型和III型胶原，且其效果明显优于对照组(P＜0.05)，差异显著，具有统计学意义。
具体实施方式
[0027]下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的详细说明，以使本领域的技术人员更加清楚地理解本专利技术。
[0028]以下各实施例，仅用于说明本专利技术，并不用来限制本专利技术的范围。基于本专利技术中的具体实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的情况下，所获得的其他所有实
施例，都属于本专利技术的保护范围。
[0029]在本专利技术实施例中，若无特殊说明，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种脂肪间充质干细胞冻干粉，其特征在于，所述冻干粉是将脂肪间充质干细胞与冻存保护剂混合后冻干制备到，其中所述冻存保护剂包括Caspase
‑
3单克隆抗体、牛血清白蛋白、海藻糖、蔗糖和PEG。2.如权利要求1所述的冻干粉，其特征在于，所述冻存保护剂是采用DMEM完全培养基配置。3.如权利要求2所述的冻干粉，其特征在于，所述冻存保护剂包括5
‑
15％Caspase
‑
3单克隆抗体、2
‑
20％牛血清白蛋白、2
‑
20％海藻糖、2
‑
20％蔗糖和2
‑
20％PEG。4.如权利要求1
‑
3任一项所述的冻干粉，其特征在于，所述Caspase
‑
3单克隆抗体的重链可变区包括CDR
‑
H1、CDR
‑
H2、CDR
‑
H3，所述CDR
‑
H1
‑
3的序列如SEQ ID NO.4
‑
6所示，轻链可变区包括CDR
‑
L1、CDR
‑
L2、CDR
‑
L3，所述CDR
‑
L1
‑
3的序列如SEQ ID NO.7
‑
9所示。5.如权利要求1
‑
3任一项所述的冻干粉，其特征在于，所述Caspase
‑
3单克隆抗体的重链可变区序列...

【专利技术属性】
技术研发人员：王正汉，任巍，王正亚，
申请(专利权)人：广州研智化妆品有限公司，
类型：发明
国别省市：