本发明专利技术属于微生物技术领域,具体涉及一株小木偶热芽孢杆菌及其应用。所述小木偶热芽孢杆菌,具体为Caldibacillus kokeshiiformis MT,保藏编号CGMCCNO.25356,该菌株具有高产吲哚乙酸、分解有机磷、产嗜铁素的能力,可用于生产吲哚乙酸,也可用于植物生长过程中,能够明显促进作物的生长,缩短作物栽培时间,提高产量。量。量。
【技术实现步骤摘要】
一株高产IAA的小木偶热芽孢杆菌及其应用
:
[0001]本专利技术属于微生物
,具体涉及一株高产IAA,且具有分解有机磷和产嗜铁素能力的小木偶热芽孢杆菌及其应用。
技术介绍
:
[0002]作物在生长发育过程中常受到根际微生物的影响,有些根际微生物可代谢产生促进植物生长类的物质,如吲哚乙酸、赤霉素等。吲哚乙酸(吲哚
‑3‑
乙酸,IAA)作为植物激素的一种,能够刺激植物细胞生长,在合适的浓度下明显促进植物根、茎、叶的生长,缩短栽培时间,提高产量。还有些根际微生物可以分解土壤中难溶解的营养物质如难溶有机磷,代谢为植物可以直接吸收利用的有效磷,增加植物对磷元素的吸收,减少磷肥使用,促进作物生长。还有些根际微生物可以分泌嗜铁素,嗜铁素能够特异性结合土壤中Fe
3+
形成螯合物,当土壤中Fe
3+
含量很低时仍可螯合,螯合物可直接被植物吸收利用,从而改善作物缺铁问题,而且嗜铁素还可以与植物病原菌竞争有限的铁离子,抑制病原菌生长,从而起到防治植物病害的作用。
[0003]中国专利文献CN111484946A公开了一种产IAA耐高温芽孢杆菌及其应用,该菌株为贝莱斯芽孢杆菌,该菌能够促进种子萌发,而且既能解磷又能固氮,可提高土壤肥力,为植物生长提供充足的营养,增强农作物抗逆能力,还具有耐高温性能,有利于农业废弃物的堆肥处理;中国专利文献CN112342162A公开了一种产IAA的溶磷菌及其应用,该溶磷菌菌株为地衣芽孢杆菌,该菌株通过产IAA、溶磷等方式促进植物生长,达到增产增收目的,提高必需元素的利用率以减少化肥的使用量,保护生态环境,可广泛应用于农业生产中;中国专利文献CN111057665A公开了一株产IAA的纤维素降解菌n3及其应用,纤维素降解菌n3产CMC酶能力强,且能产IAA,CMC酶活力最高可达到24.96U/mL,IAA的分泌量最高可达19.07mg/L,该菌可用于制备产IAA和/或CMC酶或具促生功能的秸秆促腐菌剂,从而应用于秸秆促腐、作物促生,实现秸秆还田效率和农作物产量提升。中国专利文献CN114517165A公开了一株产IAA和EPS的耐盐促生细菌KVP3及其制备,耐盐促生细菌KVP3能够在高盐浓度下促进植物种子的萌发及生长,且能够分泌IAA和EPS,IAA的分泌量最高可达305.9mg/L,EPS分泌量最高可达0.37g/100mL,所述耐盐促生细菌KVP3可用于制备产IAA和/或EPS或具促生功能的耐盐浸种剂等新型微生物接种剂,从而应用于盐渍土中的作物促生和农作物产量提升。
[0004]上述专利文献中公开的菌株均具有合成IAA能力,但合成IAA能力有限,因此筛选高产IAA菌株是本领域技术人员的迫切需求。
技术实现思路
:
[0005]为了解决上述技术问题,本专利技术从牛粪堆垛发酵物筛选获得一株小木偶热芽孢杆菌,具有高产吲哚乙酸、分解有机磷、产嗜铁素的能力,在农业微生物领域具有广泛的应用。
[0006]本专利技术提供的技术方案之一,是一株小木偶热芽孢杆菌,具体为Caldibacillus kokeshiiformis MT,该菌株已于2022年7月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普
通微生物中心,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,邮编100101,保藏编号CGMCC NO.25356。
[0007]本专利技术提供的技术方案之二,是小木偶热芽孢杆菌Caldibacillus kokeshiiformis MT的应用,特别是在生产IAA中的应用;具体地,采用小木偶热芽孢杆菌Caldibacillus kokeshiiformis MT发酵生产IAA的方法如下:
[0008]将小木偶热芽孢杆菌MT种子液按5
‑
15%(v/v)的接种量接入产IAA液体培养基,35
‑
55℃、150
‑
200rpm培养8
‑
72h;
[0009]产IAA液体培养基:酵母粉4.5
‑
5.5g,胰蛋白胨8
‑
12g,氯化钠10
‑
20g,L
‑
色氨酸0
‑
500mg,蒸馏水1L,pH7.2;
[0010]优选地,发酵温度为50℃;
[0011]优选地,培养时间为8
‑
48h;
[0012]优选地,L
‑
色氨酸浓度为400mg/L。
[0013]本专利技术还提供小木偶热芽孢杆菌Caldibacillus kokeshiiformis MT的应用,特别是在促进植物生长中的应用,可用于提高黄瓜、番茄、生菜等蔬菜的产量,还可以用于植物病害的防治,以及畜禽粪便等农业废弃物的高温堆肥发酵等领域。
[0014]本专利技术提供的技术方案之三,是一种包含小木偶热芽孢杆菌Caldibacillus kokeshiiformis MT的菌剂;
[0015]进一步地,所述菌剂为小木偶热芽孢杆菌MT浸种剂,具体为采用小木偶热芽孢杆菌Caldibacillus kokeshiiformis MT发酵生产IAA获得的发酵液:将小木偶热芽孢杆菌MT种子液按5
‑
15%(v/v)的接种量接入产IAA液体培养基,35
‑
55℃、150
‑
200rpm培养8
‑
72h获得发酵液;
[0016]产IAA液体培养基:酵母粉4.5
‑
5.5g,胰蛋白胨8
‑
12g,氯化钠10
‑
20g,L
‑
色氨酸0
‑
500mg,蒸馏水1L,pH7.2;
[0017]更进一步地,所述发酵液中小木偶热芽孢杆菌MT菌活为2.0
‑
3.7
×
108cfu/mL,IAA含量为38.83
‑
469.21mg/L。
[0018]进一步地,所述菌剂是一种微生物菌剂,由小木偶热芽孢杆菌MT制备,制备方法如下:
[0019]将固态发酵培养基湿热灭菌,待温度降至50
‑
60℃时添加0.05
‑
1%(w/w)L
‑
色氨酸,将MT菌种种子液按5
‑
15%(v/w)接种到固态发酵培养基中,35
‑
55℃培养1
‑
3d,发酵结束后35
‑
55℃烘干,研磨粉碎,即获得微生物菌剂;
[0020]所述微生物菌剂菌活为2.7
‑
4.3
×
109cfu/g,IAA含量为139.76
‑
301.74mg/kg;
[0021]进一步地,将小木偶热芽孢杆菌MT划线到LB平板上,50℃培养2d进行活化;
[0022]进一步地,将小木偶热芽孢杆菌MT活化后,挑取菌体接种到种子液培本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一株小木偶热芽孢杆菌,具体为Caldibacillus kokeshiiformis MT,保藏编号CGMCC NO.25356。2.权利要求1所述Caldibacillus kokeshiiformis MT的应用。3.如权利要求2所述的应用,其特征在于,应用于IAA的生产中。4.如权利要求3所述的应用,其特征在于,生产IAA的方法如下:将小木偶热芽孢杆菌MT种子液按5
‑
15%的接种量接入产IAA液体培养基,35
‑
55℃、150
‑
【专利技术属性】
技术研发人员:周天惠,张彤,黄英菊,劳永春,李学辉,王灵敏,韩晓伟,边福超,曹小军,王丽,
申请(专利权)人:河北木美土里科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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