【技术实现步骤摘要】
化合物或中药提取物在制备核酸递送试剂中的应用及其相关产品
[0001]相关申请
[0002]本申请是申请号为201980023092.6、申请日为2019年03月28日、专利技术名称为“化合物或中药提取物在制备核酸递送试剂中的应用及其相关产品”的中国专利技术专利申请的分案申请，原申请为国际申请号为PCT/CN2019/080175的国家阶段申请，并要求了2018年3月29日提交的申请号PCT/CN2018/081155的专利技术名称为“化合物或中药提取物在制备核酸递送试剂中的应用及其相关产品”的PCT申请的优先权，其全文通过引用并入本文。
[0003]本申请涉及从中药中提取多种能够促进核酸递送的化合物或合成的化合物，并利用所提取的化合物或多种组合促进核酸如sRNA吸收和进入靶细胞中，并能促进进入有此需要的对象体内的靶部位。
技术介绍
[0004]在过去几十年中，用核酸分子包括RNA分子作为治疗药物的理念从概念走向了临床现实。事实上，核酸分子拥有许多的属性使得它可以作为治疗药物。它们能够折叠形成复杂的构象让它们可以与蛋白质、小分子或者其他核酸相互结合，有些甚至可以形成催化中心。小干扰RNA(siRNA)作为RNAi的效应分子，其作为治疗药物具有越来越广阔的前景。目前已经有多种siRNA药物进入临床实验，预示着其良好的发展前景。通常，人们一般把siRNA，miRNA及其它非编码小RNA不加区分地称之为小核酸或小RNA(sRNA)。然而，由于核酸分子容易降解，在体内有相对较短的半衰期，因此作为治疗药物来说，...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.来自于任何自然的(包括中药提取物)或合成的具有下式的化合物在制备用于核酸递送的试剂中的用途，其中所述提取物具有下式结构或包含具有下式结构的化合物：其中L1、L2、L3不存在，或L1、L2、L3各自独立选自
‑
C(O)O
‑
CH2‑
，
‑
CH(OH)
‑
，
‑
C(O)
‑
NH
‑
CH2‑
，
‑
CH2‑
O
‑
C(O)
‑
，
‑
CH2‑
NH
‑
C(O)
‑
，
‑
C(O)O
‑
，
‑
C(O)NH
‑
，
‑
O
‑
C(O)
‑
，
‑
NH
‑
C(O)
‑
，
‑
CH2‑
，，条件是L1、L2、L3中至多两个不存在；对于二价基团L1、L2而言，左侧的破折号
“‑”
分别连接至基团A和B，而右侧的破折号
“‑”
分别连接至中心碳原子；对于二价基团L3而言，左侧的破折号
“‑”
连接至中心碳原子，而右侧的破折号
“‑”
连接至Q；A，B，Q各自独立选自H，
‑
OH，C1‑
20
烷基，C1‑
20
烯基，C1‑
20
杂烷基，C1‑
20
杂烯基，
‑
NH2，和
‑
NR
3+
，R为H或C1‑6烷基；和n为整数0，1，2，3或4；其中优选地，所述核酸是小核酸，优选是单链或双链的，优选地所述小核酸的长度是14
‑
32bp、16
‑
28bp或18
‑
24bp；优选地，所述中药选自红景天，蒲公英，穿心莲和金银花中药饮片，优选所述提取物通过Bligh&Dyer法提取脂溶性成分获得，更优选通过将所述中药饮片在水中浸泡，然后依次进行强火煎煮和弱火煎煮，将煎煮后的中药药液浓缩，然后依次添加氯仿
‑
甲醇、氯仿和水搅拌处理，取氯仿层获得；优选地，所述试剂是口服试剂；优选地，所述核酸用于治疗疾病，例如心脏、脾、肾、胃、肺和/或肠疾病，例如癌症，例如胃癌或肺癌；优选地，核酸递送是对细胞或器官的核酸递送，优选地所述器官选自心脏、脾、肾、胃、肺和肠。2.权利要求1的用途，其中所述结构中的L1不存在，或L1选自
‑
C(O)O
‑
CH2‑
和
‑
CH(OH)
‑
，L2不存在，或L2选自
‑
C(O)O
‑
和
‑
C(O)NH
‑
，L3不存在，或L3选自
‑
C(O)O
‑
，
‑
CH2‑
O
‑
C(O)
‑
，
‑
CH2‑
和A选自H，C1‑
20
烷基和C1‑
20
烯基；B选自H，
‑
NH2，C1‑
20
烷基和C1‑
20
烯基；
Q选自H，
‑
OH，C1‑
20
烷基和C1‑
20
烯基，和
‑
NR
3+
，其中R为H或C1‑6烷基。3.权利要求1或2的用途，其中所述化合物具有下式4.前述权利要求中任一项的用途，其中所述结构中的A选自H，C
10
‑
20
烷基和C
10
‑
20
烯基；B选自H，
‑
NH2，C
10
‑
20
烷基和C
10
‑
20
烯基；Q选自H，
‑
OH，C
10
‑
20
烷基和C
10
‑
20
烯基，和
‑
NR
3+
，其中R为H或C1‑4烷基。5.权利要求4的用途，其中所述结构中的A选自H，直链C
15
‑
18
烷基和直链C
15
‑
18
烯基；B选自H，
‑
NH2，直链C
15
‑
18
烷基和直链C
15
‑
18
烯基；Q选自H，
‑
OH，直链C
15
‑
18
烷基和直链C
15
‑
18
烯基，和
‑
NR
3+
，其中R为H或C1‑4烷基；在A，B，Q中，所述烯基具有1
‑
5个双键。6.权利要求5的用途，其中在所述结构的A，B，Q中，所述烯基具有1
‑
4个双键，且呈Z构型。7.权利要求6的用途，其中：在A，B，Q中，所述烯基具有1
‑
3个双键，且呈Z构型。8.前述权利要求中任一项的用途，其中所述提取物选自下式或包含选自下式的化合物：其中A选自直链C
15
‑
18
烷基和直链C
15
‑
18
烯基；B选自直链C
15
‑
18
烷基和直链C
15
‑
18
烯基；Q选自H，
‑
OH，直链C
15
‑
18
烷基和直链C
15
‑
18
烯基，和
‑
NR
3+
，其中R为H或甲基；L3为
‑
C(O)O
‑
。9.前述权利要求中任一项的用途，其中所述提取物为或包含溶血卵磷脂、神经酰胺、甘油二酯、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、甘油三酯、单半乳糖甘油二酯、(神经)鞘氨醇、磷脂酰
乙醇、单酰基甘油、脂肪酸、血小板活化因子、或二甲基磷脂酰乙醇胺。10.前述任一项权利要求的用途，其中所述提取物选自表1所示的脂质或包含选自表1所示的任一种或多种脂质。11.前述任一项权利要求的用途，其中所述提取物包含表1中第41号、第71号、第11号、第12号、第38号、第64号、第40号、第37号、第39号、第60号、第62号、第33号、第35号、第42号、第43号、第44号、第45号、第46号、第47号、第48号、第49号、第50号、第51号、第52号、第53号、第54号、第55号、第56号、第57号、第58号、第59号、第61号、第65号、第66号、第67号、第68号、第69号、第70号所示的脂质中任一种，或其与表1中的任何一种或多种其它脂质的组合，或与任何一种或多种脂质及其他相关化学物质的组合。12.包含选自表1所示的任一种或多种脂质的组合在制备用于核酸递送的试剂中的用途，其中优选地，所述组合包含表1中第41号、第71号、第11号、第12号、第38号、第64号、第40号、第37号、第39号、第60号、第62号、第33号、第35号、第42号、第43号、第44号、第45号、第46号、第47号、第48号、第49号、第50号、第51号、第52号、第53号、第54号、第55号、第56号、第57号、第58号、第59号、第61号、第65号、第66号、第67号、第68号、第69号、第70号所示的脂质中任一种，或其与表1中的任何一种或多种其它脂质的组合，或与任何一种或多种脂质及其他相关化学物质的组合，优选地，所述核酸是小核酸，优选是单链或双链的，优选地所述小核酸的长度是14
‑
32bp、16
‑
28bp或18
‑
24bp；优选地所述试剂是口服试剂；优选地，所述核酸用于治疗疾病，例如心脏、脾、肾、胃、肺和/或肠疾病，例如癌症，例如胃癌或肺癌；优选地，其中核酸递送是对细胞或器官的核酸递送；优选地，所述器官选自心脏、脾、肾、胃、肺和肠。13.中药在制备核酸递送的试剂中的用途，其中优选地，所述核酸是小核酸，优选是单链或双链的，优选地所述小核酸的长度是14
‑
32bp、16
‑
28bp或18
‑
24bp；优选地所述试剂是口服试剂；优选地，所述核酸用于治疗疾病，例如心脏、脾、肾、胃、肺和/或肠疾病，例如癌症，例如胃癌或肺癌；优选地，其中核酸递送是对细胞或器官的核酸递送；优选地，所述器官选自心脏、脾、肾、胃、肺和肠。14.权利要求13所述的用途，其中所述的中药选自红景天，蒲公英，穿心莲和金银花中药饮片。15.权利要求13或14所述的用途，其中所述试剂含有从中药中提取的或人工合成的化合物，优选地，所述化合物通过Bligh&Dyer法提取脂溶性成分获得，或者通过中药的煎煮制备提取，更优选通过将所述中药饮片在水中浸泡，然后依次进行强火煎煮和弱火煎煮，将煎煮后的中药药液浓缩，然后依次添加氯仿
‑
甲醇、氯仿和水搅拌处理，取氯仿层获得。16.权利要求15所述的用途，其中所述的化合物具有权利要求1至11中任一项中所示的结构，或者所述试剂包含表1中所示的任一种或多种脂质，优选表1中第41号、第71号、第11号、第12号、第38号、第64号、第40号、第37号、第39号、第60号、第62号、第33号、第35号、第42号、第43号、第44号、第45号、第46号、第47号、第48号、第49号、第50号、第51号、第52号、第53号、第54号、第55号、第56号、第57号、第58号、第59号、第61号、第65号、第66号、第67号、第68号、第69号、第70号所示的脂质中的任一种，或其与表1中的任何一种或多种其它脂质的组合，或与任何一种或多种脂质及其他相关化学物质的组合。
17.权利要求16所述的用途，其中所述的化合物选自溶血卵磷脂、神经酰胺、甘油二酯、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、甘油三酯、单半乳糖甘油二酯、(神经)鞘氨醇、磷脂酰乙醇、单酰基甘油、脂肪酸、血小板活化因子、或二甲基磷脂酰乙醇胺。18.权利要求17所述的用途，其中所述化合物选自于表1。19.权利要求18所述的用途，其中所述化合物选自表1中第41号、第71号、第11号、第12号、第38号、第64号、第40号、第37号、第39号、第60号、第62号、第33号、第35号、第42号、第43号、第44号、第45号、第46号、第47号、第48号、第49号、第50号、第51号、第52号、第53号、第54号、第55号、第56号、第57号、第58号、第59号、第61号、第65号、第66号、第67号、第68号、第69号、第70号所示的脂质。20.权利要求13
‑
18任一项所述的用途，其中所述的递送包括体外细胞递送，或体内消化道递送。21.权利要求13
‑
20任一项所述的用途，其包括制备脂质核酸混合物。22.权利要求21所述的用途，其中所述的脂质核酸混合物通过水煮法制备，或通过逆向蒸发法，或者通过直接混合制备。23.权利要求22所述的用途，其中所述水煮法的制备温度为约4℃至约100℃，约25℃至约100℃，优选约80℃至约100℃，例如4℃，37℃，60℃，80℃或100℃；所述逆向蒸发法的制备温度为约25℃至约70℃，优选约55℃。24.一种药物组合物，其包含一种或多种权利要求1
‑
11任一项中所述结构的脂质提取物以及核酸，优选地所述脂质选自表1中的任一种或多种，优选表1中第41号、第71号、第11号和第12号、第38号、第64号、第40号、第37号、第39号、第60号、第62号、第33号、第35号、第42号、第43号、第44号、第45号、第46号、第47号、第48号、第49号、第50号、第51号、第52号、第53号、第54号、第55号、第56号、第57号、第58号、第59号、第61号、第65号、第66号、第67号、第68号、第69号、第70号所示的脂质中的任一种，或其与表1中的任何一种或多种其它脂质的组合，或与任何一种或多种脂质及其他相关化学物质的组合，其中优选地，所述核酸是小核酸，优选是单链或双链的，优选地所述小核酸的长度是14
‑
32bp、16
‑
28bp或18
‑
24bp；优选地，所述药物组合物是口服药物组合物；优选地，所述药物组合物用于治疗疾病，例如心脏、脾、肾、胃、肺和/或肠疾病，例如癌症，例如胃癌或肺癌。25.根据权利要求24所述的药物组合物，其中所述脂质和核酸至少部分地或全部以脂质核酸混合物的形式存在。26.权利要求25所述的药物组合物，其中所述脂质核酸混合物是通过水煮法制备，或通过逆向蒸发法，或者通过直接混合制备。27.权利要求26所述的药物组合物，其中所述水煮法的制备温度为约4℃至约100℃，25℃至约100℃，优选约80℃至100℃，例如4℃，37℃，60℃，80℃或100℃；所述逆向蒸发法的制备温度为约25℃至约70℃，优选约55℃。28.一种套装组合，其包含一种或多种根据权利要求1
‑
11任一项所述结构的脂质，优选地所述脂质选自表1中的任一种或多种，优选表1中第41号、第71号、第11号和第12号、第38号、第64号、第40号、第37号、第39号、第60号、第62号、第33号、第35号、第42号、第43号、第44号、第45号、第46号、第47号、第48号、第49号、第50号、第51号、第52号、第53号、第54号、第55号、第56号、第57号、第58号、第59号、第61号、第65号、第66号、第67号、第68号、第69号、第70
号所示的脂质或其与表1中的任何一种或多种其它脂质的组合或其与任何一种或多种脂质及其他相关化学物质的组合以及核酸，其中所述脂质和核酸各自独立地提供于第一容器和第二容器中，所述第一容器和第二容器相同或不同，其中优选地，所述核酸是小核酸，优选是单链或双链的，优选地所述小核酸的长度是14
‑
32bp、16
‑
28bp或18
‑
24bp；优选地，所述套装组合是口服套装组合；优选地，所述套装组合用于治疗疾病，例如心脏、脾、肾、胃、肺和/或肠疾病，例如癌症，例如胃癌或肺癌。29.根据权利要求28所述的套装组合，其中在临使用前将所述脂质和所述核酸至少部分地或全部地配制成脂质核酸复合物。30.权利要求29所述的套装组合，其中所述脂质核酸复合物的配制方法是通过水煮法制备，或通过逆向蒸发法，或者通过直接混合制备。31.权利要求30所述的套装组合，其中所述水煮法的制备温度为约4℃至约100℃，25℃至约100℃，优选约80℃至约100℃，例如4℃，37℃，60℃，80℃或100℃，所述逆向蒸发法的制备温度为约25℃至约70℃，优选约55℃。32.一种将核酸递送至靶细胞中的方法，其中以权利要求24
‑
27任一项所述的药物组合物或者以权利要求28
‑
31任一项所述的套装组合的形式提供所述核酸，其中优选地，所述核酸是小核酸，优选是单链或双链的，优选地所述小核酸的长度是14
‑
32bp、16
‑
28bp或18
‑
24bp；优选地，所述核酸用于治疗疾病，例如心脏、脾、肾、胃、肺和/或肠疾病，例如癌症，例如胃癌或肺癌。33.一种将核酸体内递送至有此需要的对象中的方法，其中以权利要求24
‑
27任一项所述的药物组合物或者以权利要求28
‑
31任一项所述的套装组合的形式提供所述核酸，其中优选地，所述核酸是小核酸，优选是单链或双链的，优选地所述小核酸的长度是14
‑
32bp、16
‑
28bp或18
‑
24bp；优选地，所述核酸用于治疗疾病，例如心脏、脾、肾、胃、肺和/或肠疾病，例如癌症，例如胃癌或肺癌。34.根据权利要求33所述的方法，其中所述对象是人或动物，如哺乳动物。35.根据权利要求33
‑
34中任一项所述的方法，其中将所述核酸体内递送至所述对象的血液循环中或者靶组织/细胞中，所述靶组织选自心脏、脾、肾、胃、肺和肠。36.权利要求35所述的方法，其包括直接将权利要求24
‑
27任一项所述的药物组合物或者以权利要求28
‑
31任一项所述的套装组合通过消化道递送至有此需要的对象中。37.权利要求24
‑
27任一项的药物组合物，或权利要求28
‑
31任一项所述的套装组合，其中所述核酸和脂质配制成经表面施用和/或注射施用。38.根据权利要求37所述的药物组合物或套装组合，其中所述核酸和脂质配制成经消化道、经呼吸道施用。39.根据权利要求37或38所述的药物组合物或套装组合，其中所述核酸和脂质配制成经口服、吸入施用。40.根据权利要求37
‑
39中任一项所述的药物组合物或套装组合，其中所述核酸是小RNA。41.根据权利要求37
‑
40中任一项所述的药物组合物或套装组合，其中所述核酸具有茎环结构。42.根据权利要求37
‑
41中任一项所述的药物组合物、或套装组合，其中所述小RNA长度
为14
‑
32bp、18
‑
24bp，例如长度为14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32bp。43.提取自中药或人工合成的并能用于核酸递送的化合物，其具有如下结构：L1、L2、L3不存在，或L1、L2、L3各自独立选自
‑
C(O)O
‑
CH2‑
，
‑
CH(OH)
‑
，
‑
C(O)
‑
NH
‑
CH2‑
，
‑
CH2‑
O
‑
C(O)
‑
，
‑
CH2‑
NH
‑
C(O)
‑
，
‑
C(O)O
‑
，
‑
C(O)NH
‑
，
‑
O
‑
C(O)
‑
，
‑
NH
‑
C(O)
‑
，
‑
CH2‑
，，条件是L1、L2、L3中至多两个不存在；对于二价基团L1、L2而言，左侧的破折号
“‑”
分别连接至基团A和B，而右侧的破折号
“‑”
分别连接至中心碳原子；对于二价基团L3而言，左侧的破折号
“‑”
连接至中心碳原子，而右侧的破折号
“‑”
连接至Q；A，B，Q各自独立选自H，
‑
OH，C1‑
20
烷基，C1‑
20
烯基，C1‑
20
杂烷基，C1‑
20
杂烯基，
‑
NH2，和
‑
NR
3+
，R为H或C1‑6烷基；和n为整数0，1，2，3或4，优选地所述化合物是口服化合物；优选地，所述核酸用于治疗疾病，例如心脏、脾、肾、胃、肺和/或肠疾病，例如癌症，例如胃癌或肺癌；优选地，核酸递送是对细胞或器官的核酸递送，优选地所述器官选自心脏、脾、肾、胃、肺和肠。44.权利要求43的化合物，其中L1不存在，或L1选自
‑
C(O)O
‑
CH2‑
和
‑
CH(OH)
‑
，L2不存在，或L2选自
‑
C(O)O
‑
和
‑
C(O)NH
‑
，L3不存在，或L3选自
‑
C(O)O
‑
，
‑
CH2‑
O
‑
C(O)
‑
，
‑
CH2‑
和A选自H，C1‑
20
烷基和C1‑
20
烯基；B选自H，
‑
NH2，C1‑
20
烷基和C1‑
20
烯基；Q选自H，
‑
OH，C1‑
20
烷基和C1‑
20
烯基，和
‑
NR
3+
，其中R为H或C1‑6烷基，其中优选所述中药选自红景天，蒲公英，穿心莲和金银花中药饮片，优选所述化合物通过Bligh&Dyer法提取脂溶性成分获得，更优选通过将所述中药饮片在水中浸泡，然后依次进行强火煎煮和弱火煎煮，将煎煮后的中药药液浓缩，然后依次添加氯仿
‑
甲醇、氯仿和水搅拌处理，取氯仿层获得，其中优选地，所述核酸是小核酸，优选是单链或双链的，优选地所述小核酸的长度是14
‑
32bp、
16
‑
28bp或18
‑
24bp。45.权利要求43或44的化合物，其具有下式46.权利要求43
‑
45中任一项的化合物，其中：A选自H，C
10
‑
20
烷基和C
10
‑
20
烯基；B选自H，
‑
NH2，C
10
‑
20
烷基和C
10
‑
20
烯基；Q选自H，
‑
OH，C
10
‑
20
烷基和C
10
‑
20
烯基，和
‑
NR
3+
，其中R为H或C1‑4烷基。47.权利要求43
‑
46中任一项的化合物，其中：A选自H，直链C
15
‑
18
烷基和直链C
15
‑
18
烯基；B选自H，
‑
NH2，直链C
15
‑
18
烷基和直链C
15
‑
18
烯基；Q选自H，
‑
OH，直链C
15
‑
18
烷基和直链C
15
‑
18
烯基，和
‑
NR
3+
，其中R为H或C1‑4烷基；在A，B，Q中，所述烯基具有1
‑
5个双键。48.权利要求43
‑
47中任一项的化合物，其中：在A，B，Q中，所述烯基具有1
‑
4个双键，且呈Z构型。49.权利要求43
‑
48中任一项的化合物，其中：在A，B，Q中，所述烯基具有1
‑
3个双键，且呈Z构型。50.权利要求43
‑
49中任一项的化合物，其选自下式：其中A选自直链C
15
‑
18
烷基和直链C
15
‑
18
烯基；B选自直链C
15
‑
18
烷基和直链C
15
‑
18
烯基；Q选自H，
‑
OH，直链C
15
‑
18
烷基和直链C
15
‑
18
烯基，和
‑
NR
3+
，其中R为H或甲基；L3为
‑
C(O)O
‑
。51.权利要求43
‑
50中任一项的化合物，其选自表1中所示的脂质。52.权利要求43
‑
51中任一项所述的化合物，其选自表1中第41号、第71号、第11号、第12
号、第38号、第64号、第40号、第37号、第39号、第60号、或第62号、第33号、第35号、第42号、第43号、第44号、第45号、第46号、第47号、第48号、第49号、第50号、第51号、第52号、第53号、第54号、第55号、第56号、第57号、第58号、第59号、第61号、第65号、第66号、第67号、第68号、第69号、或第70号所示的脂质。53.一种有助于核酸递送的方法，其包括将核酸和如权利要求1
‑
11中任一项中所述的中药提取物或任何自然的或者合成的...
【专利技术属性】
技术研发人员：蒋澄宇，李晓芸，杜涧超，梁竹，王志清，王晨轩，
申请(专利权)人：中国医学科学院基础医学研究所，
类型：发明
国别省市：
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