Lhx2蛋白及其相关生物材料在制备青光眼药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了Lhx2蛋白及其相关生物材料在制备青光眼药物中的应用。本发明专利技术提供了Lhx2蛋白在制备青光眼药物中的应用。本发明专利技术还提供了Lhx2蛋白的相关生物材料在制备青光眼药物中的应用。本发明专利技术还提供Lhx2蛋白在制备药物中的应用；所述药物为针对视网膜神经节细胞损伤和/或死亡的药物。本发明专利技术还提供Lhx2蛋白的相关生物材料在制备药物中的应用；所述药物为针对视网膜神经节细胞损伤和/或死亡的药物。发明专利技术人发现，Lhx2可以促进视神经急性损伤后的RGCs的存活和轴突再生。进一步，发明专利技术人发现，Lhx2可以显著促进高眼压下的RGCs的存活。本发明专利技术为临床治疗青光眼奠定了坚实的基础。明为临床治疗青光眼奠定了坚实的基础。

【技术实现步骤摘要】
Lhx2蛋白及其相关生物材料在制备青光眼药物中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药领域，涉及Lhx2蛋白及其相关生物材料在制备青光眼药物中的应用。

技术介绍

[0002]青光眼是世界上导致不可逆性失明的最主要原因，主要临床症状是眼压升高。青光眼最常见的两种形式是原发性开角型青光眼(primary open
‑
angle glaucoma，POAG)和原发性闭角型青光眼(primary angle
‑
closure glaucoma，PACG)，亚洲人群最主要的是原发性闭角型青光眼。据统计，2020年全球40
‑
80岁人群中青光眼患者约7600万，中国青光眼患者数尤为突出，约2180万，致盲人数约567万。随着全球老龄化的快速增长，预计到2040年全球40
‑
80岁人群中青光眼患者超过1.1亿。
[0003]青光眼的主要特征是眼压升高造成的视神经机械损伤和视网膜神经节细胞(Retinal ganglion cells,RGCs)的退化和凋亡，视网膜神经节细胞是位于视网膜内唯一投射神经元，神经节细胞的损失造成视网膜功能性障碍，严重的导致视力不可逆的丧失。目前眼压升高造成神经节细胞死亡的具体机制尚不清楚。在临床治疗方面，如何有效降低眼压和高眼压情况下保护RGCs的存活是治疗青光眼疾病的必然选择。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供Lhx2蛋白及其相关生物材料在制备青光眼药物中的应用。
[0005]本专利技术提供了Lhx2蛋白在制备青光眼药物中的应用。
[0006]本专利技术还提供了Lhx2蛋白的相关生物材料在制备青光眼药物中的应用。
[0007]本专利技术还提供了一种青光眼药物，其活性成分包括Lhx2蛋白。
[0008]本专利技术还提供了一种青光眼药物，其活性成分包括Lhx2蛋白的相关生物材料。
[0009]本专利技术还提供Lhx2蛋白在制备药物中的应用；所述药物为针对视网膜神经节细胞损伤和/或死亡的药物。
[0010]本专利技术还提供Lhx2蛋白的相关生物材料在制备药物中的应用；所述药物为针对视网膜神经节细胞损伤和/或死亡的药物。
[0011]本专利技术还提供了一种药物，其活性成分包括Lhx2蛋白；所述药物为针对视网膜神经节细胞损伤和/或死亡的药物。
[0012]本专利技术还提供了一种药物，其活性成分包括Lhx2蛋白的相关生物材料；所述药物为针对视网膜神经节细胞损伤和/或死亡的药物。
[0013]以上任一所述药物为治疗和/或预防药物。
[0014]所述视网膜神经节细胞损伤和/或死亡是由视神经急性损伤造成的。
[0015]所述视网膜神经节细胞损伤和/或死亡是由NMDA造成的。
[0016]NMDA可以引起视网膜神经节细胞兴奋毒性死亡(NMDA可以引起RGCs过度兴奋，造成RGCs兴奋毒性死亡)。
[0017]所述视网膜神经节细胞损伤和/或死亡是高眼压造成的。
[0018]Lhx2(LIM homeobox protein 2)是LIM蛋白家族成员一种重要的转录因子。
[0019]Lhx2蛋白具体为鼠源Lhx2蛋白或人源Lhx2蛋白。
[0020]鼠源Lhx2蛋白具体为如下(a1)或(a2)：
[0021](a1)SEQ ID NO：1所示的蛋白质；
[0022](a2)在(a1)所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白。
[0023]Lhx2蛋白的相关生物材料具体可为如下(b1)或(b2)或(b3)或(b4)或(b5)：
[0024](b1)核酸分子，其为编码Lhx2蛋白的核酸分子；
[0025](b2)表达盒，其具有(b1)所述核酸分子；
[0026](b3)重组载体，其具有(b1)所述核酸分子或(b2)所述表达盒；
[0027](b4)载体组合，其由(b3)所述重组载体和其他载体组成；
[0028](b5)重组微生物，其具有(b1)所述核酸分子或(b2)所述表达盒或(b3)所述重组载体。
[0029]所述核酸分子可为DNA分子或RNA分子。
[0030]编码鼠源Lhx2蛋白的核酸分子具体为如下(c1)或(c2)或(c3)：
[0031](c1)编码区如SEQ ID NO：2所示的DNA分子；
[0032](c2)来源于鼠且与(c1)具有95％以上同一性且编码所述蛋白质的DNA分子；
[0033](c3)在严格条件下与(c1)限定的核苷酸杂交且编码所述蛋白质的DNA分子。
[0034]上述严格条件可为用0.1
×
SSPE(或0.1
×
SSC)，0.1％SDS的溶液，在DNA或者RNA杂交实验中65℃下杂交并洗膜。
[0035]所述鼠为大鼠或小鼠。
[0036]所述重组载体可为重组质粒。
[0037]所述重组质粒具体可为重组质粒AAV2
‑
LHX2。
[0038]所述其他载体为包装质粒和/或辅助质粒。
[0039]所述其他载体为AAV包装质粒和/或AAV辅助质粒。
[0040]所述包装质粒为质粒pAAV2/2。
[0041]所述辅助质粒为质粒pAdDeltaF6。
[0042]所述重组微生物具体可为重组腺病毒。
[0043]所述重组微生物具体可为重组腺相关病毒。
[0044]所述重组微生物具体可为重组AAV病毒。
[0045]所述重组微生物具体可为重组AAV2病毒。
[0046]所述重组AAV2病毒的制备方法具体可为：将重组质粒AAV2
‑
LHX2进行腺相关病毒包装和纯化，得到重组AAV2病毒。
[0047]所述重组AAV2病毒的制备方法具体可为：将重组质粒AAV2
‑
LHX2采用AAV
‑
293细胞进行腺相关病毒包装和纯化，得到重组AAV2病毒。
[0048]所述重组AAV2病毒的制备方法具体可为：将重组质粒AAV2
‑
LHX2、质粒pAAV2/2和质粒pAdDeltaF6共转染AAV
‑
293细胞，培养，然后进行病毒的纯化浓缩，得到AAV2
‑
LHX2病毒液。
[0049]所述重组AAV2病毒的制备方法具体可为：采用15cm直径的培养皿培养AAV
‑
293细
胞至70％
‑
80％密度，然后利用PEI将重组质粒AAV2
‑
LHX2(6μg/培养皿)、质粒pAAV2/2(10μg/培养皿)和质粒pAdDeltaF6(12μg/培养皿)共转染AAV
‑
293细胞，培养72小时，然后采用碘克沙醇密度梯度离心(15％，25％，40％，60％)的方法进行病毒的纯化浓缩，得到AAV2
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.Lhx2蛋白在制备青光眼药物中的应用。2.Lhx2蛋白的相关生物材料在制备青光眼药物中的应用。3.一种青光眼药物，其活性成分包括Lhx2蛋白。4.一种青光眼药物，其活性成分包括Lhx2蛋白的相关生物材料。5.Lhx2蛋白在制备药物中的应用；所述药物为针对视网膜神经节细胞损伤和/或死亡的药物。6.Lhx2蛋白的相关生物材料在制备药物中的应用；所述药物为针对视网膜神经节细胞损伤和/或死亡的药物。7.一种药物，其活性成分包括Lhx2蛋白；所述药物为针对视网膜神经节细胞损伤和/或死亡的药物。8.一种药物，其活性成分包括Lhx2蛋白的相关...

【专利技术属性】
技术研发人员：权利要求书一页说明书七页序列表电子公布附图四页，
申请(专利权)人：首都医科大学附属北京同仁医院，
类型：发明
国别省市：