氧化苦参碱在制备调控表皮细胞中表皮分化复合体基因和角化包膜基因表达的药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了氧化苦参碱在制备调控表皮细胞中表皮分化复合体基因和角化包膜基因表达的药物中的应用，属于生物技术技术领域。本发明专利技术采用全长转录组测序方法检测氧化苦参碱治疗银屑病前后皮损组织中转录水平的变化，并与正常皮肤组织进行比较。将银屑病面积和严重程度指数评分与加权基因共表达网络分相结合，构建共表达模块，并用免疫组织化学、实时定量聚合酶链式反应和Western blotting对筛选出的基因进行验证，结果显示氧化苦参碱可以用于调控以CNFN、S100A8、SPRRs为代表的基因表达，这为评估氧化苦参碱治疗银屑病提供了新的生物标志物和新机理。物标志物和新机理。物标志物和新机理。

【技术实现步骤摘要】
氧化苦参碱在制备调控表皮细胞中表皮分化复合体基因和角化包膜基因表达的药物中的应用


[0001]本专利技术属于生物技术
，尤其涉及氧化苦参碱在制备调控表皮细胞中表皮分化复合体基因和角化包膜基因表达的药物中的应用。

技术介绍

[0002]银屑病是一种慢性炎症性皮肤病，影响2％至4％的世界人口。患者的T细胞产生高水平的细胞因子，如IL
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17，刺激角质形成细胞的增殖。此外，肥胖、脂肪肝、代谢综合征、心血管疾病和糖尿病通常与中、重度银屑病有关。银屑病患者的常规系统长期治疗受到耐受性差和毒性累积的限制。相比之下，生物制剂极大地改善了银屑病的治疗，并为中到重度银屑病提供了有效的治疗。随着治疗时间的延长，可能会出现感染、过敏反应、自身免疫反应、恶性肿瘤等相关不良反应。需要为一些失败或无法耐受当前治疗的患者探索新的治疗方法。
[0003]氧化苦参碱是一种天然生物碱，主要存在于苦参中。据报道，氧化苦参碱具有广泛的生物活性，如抗氧化、抗炎、抗菌、抗病毒、抗肿瘤、保护心脏、肝脏、肺、肾脏和血管。在我们之前的临床试验中，氧化苦参碱可以有效地治疗严重的斑块型银屑病并抑制复发。此外，氧化苦参碱还可以调节脂代谢，显著改善脂肪肝和代谢综合征等银屑病的共病。因此，氧化苦参碱在治疗银屑病方面具有很大的潜力。我们希望探索氧化苦参碱治疗银屑病的靶基因和作用途径，以为研究氧化苦参碱治疗银屑病提供的新的潜在生物标志物和可能的机制。

技术实现思路

[0004]为解决上述技术问题，本专利技术提出了氧化苦参碱在制备调控表皮细胞中表皮分化复合体基因和角化包膜基因表达的药物中的应用。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供了氧化苦参碱在制备调控表皮细胞中表皮分化复合体基因和角化包膜基因表达的药物中的应用。
[0006]本专利技术还提供氧化苦参碱在制备检测表皮细胞中表皮分化复合体基因和角化包膜基因表达水平的试剂或者药物中的应用。
[0007]优选的是，所述氧化苦参碱降低表皮分化复合体基因和角化包膜基因的表达；所述降低表皮分化复合体基因和角化包膜基因的表达，通过外源使用所述氧化苦参碱的方式实现。
[0008]优选的是，所述表皮分化复合体基因包括S100A8、SPRR2A、SPRR2D以及SPRR2E基因。
[0009]优选的是，所述角化包膜基因包括CNFN基因。
[0010]与现有技术相比，本专利技术具有如下优点和技术效果：
[0011]本专利技术通过WGCNA分析显示，氧化苦参碱可能通过影响1q21上的EDC基因而改善银屑病患者的皮损。在改进的过程中，炎症相关的细胞结构、细胞周期相关的通路以及桥粒、
角化的包膜等也受到了调节。以CNFN、S100A8、SPRRs为代表的基因表达的改善也证明了氧化苦参碱的调节作用。因此，本专利技术证明氧化苦参碱可以用于制备调控以CNFN、S100A8、SPRRs为代表的基因表达的产品中，为评估氧化苦参碱治疗银屑病提供了新的生物标志物和新机理。
附图说明
[0012]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0013]图1为临床样本治疗前后牛皮癣皮损改变的图像；
[0014]图2为患者和正常对照组组织行HE染色，比例尺＝50微米；
[0015]图3为H&E染色切片图像，显示表皮增生；
[0016]图4为根据15个样本的表达数据对样本进行聚类树和热图分析；用WGCNA软件分析基因的平均表达水平，*表示与正常组相比，**p<0.01，#表示与治疗前相比，##p<0.01；
[0017]图5为牛皮癣样本中表示不同软阈值对应的log(K)和log(p(K))的相关系数的图表以及对应于不同软阈值的基因邻接系数的平均值，反映网络的平均连接水平的图表；
[0018]图6为牛皮癣样本的所有基因的聚类树形图，基于拓扑重叠的不同，以及指定的模块颜色；构建了15个共表达模块，并以不同的颜色显示；根据基因相似性组装模块；
[0019]图7为基因网络中拓扑重叠的热图；基因树状图和模块分配如左上角所示，在热图中，每行和每列对应一个基因，浅色表示拓扑重叠较少，而逐渐变深的红色表示较高的拓扑重叠；
[0020]图8为聚类分析结果；
[0021]图9为三个重要模块的特征网络中邻接关系的热图；该图可以看到哪些模块与表型银屑病面积和严重程度指数(PASI)密切相关；浅绿色模块与PASI相关性最强；红色代表高邻接(正相关)，而蓝色代表低邻接(负相关)；
[0022]图10为三个重要模块的模块
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特征关联和分析图；每行对应一个模块特征基因，列对应一个特征；每个单元格包含相应的相关性和p值；这些单元格通过相关性进行颜色编码；
[0023]图11为三个模块(浅绿色、深绿色和黑色模块)的基因(y轴)与模块成员(x轴)的散点图；
[0024]图12三个模块热图；
[0025]图13为生物过程中的GO富集；
[0026]图14为细胞成分的GO富集；
[0027]图15为分子功能的GO富集；
[0028]图16为KEGG途径的富集；
[0029]图17为HUB基因筛选和验证中，淡绿色模块基因的蛋白质
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蛋白质相互作用网络；边缘代表基因之间的相互作用；度被用来描述蛋白质节点在网络中的重要性；
[0030]图18为CNFN免疫组织化学染色及IOD值；B1为正常对照组；B2为治疗前患者；B3为
氧化苦参碱治疗后患者；
[0031]图19为免疫组织化学染色检测S100A8的IOD值；C1为正常对照组；C2为治疗前患者；C3为氧化苦参碱治疗后患者；
[0032]图20为定量RT
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PCR检测CNFN、S100A8、SPRR2A、SPRR2D和SPRR2E的mRNA表达；
[0033]图21为S100A8、SPRR2A的免疫印迹的结果；
[0034]图22为表皮分化复合物与牛皮癣和氧化苦参碱的关系示意图；*与正常组比较，*p<0.05，**p<0.01，#与治疗前比较，#p<0.05，#p<0.01；
[0035]图23为WGCNA的信使核糖核酸水平分析所有mRNA的聚类树形图；
[0036]图24为WGCNA的信使核糖核酸水平分析模块特征的聚集；
[0037]图25为WGCNA的信使核糖核酸水平分析模块
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性状关联；
[0038]图26为WGCNA的信使核糖核酸水平分析红色模块的PPI分析；
[0039]图27为对红色模块的生物过程中的GO富集本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.氧化苦参碱在制备调控表皮细胞中表皮分化复合体基因和角化包膜基因表达的药物中的应用。2.氧化苦参碱在制备检测表皮细胞中表皮分化复合体基因和角化包膜基因表达水平的试剂或者药物中的应用。3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述氧化苦参碱降低表皮分化复合体基因和角化包膜基因的表达；所述降低...

【专利技术属性】
技术研发人员：施惠娟，薛潇潇，
申请(专利权)人：宁夏医科大学总医院，
类型：发明
国别省市：