一种HPLC波长切换技术同时测定人参健脾丸中12种指标成分含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种HPLC波长切换技术同时测定人参健脾丸中12种指标成分含量的方法，具体采用HPLC波长切换技术对人参健脾丸中的隐绿原酸、香草酸、斯皮诺素、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、芸香柚皮苷、3,6

【技术实现步骤摘要】
一种HPLC波长切换技术同时测定人参健脾丸中12种指标成分含量的方法


[0001]本专利技术属于药品检测
，具体涉及一种HPLC波长切换技术同时测定人参健脾丸中12种指标成分含量的方法。

技术介绍

[0002]人参健脾丸源于明代王肯堂的《证治准绳
·
类方》，现收载于《中国药典》2020年版一部等国家药品标准，由人参、白术(麸炒)、茯苓、山药、陈皮、木香、砂仁、炙黄芪、当归、酸枣仁(炒)、远志(制)11味药组方而成，均为药材原粉入药。具有补脾益气、和胃止泻的功效，临床上主要用于脾胃虚弱所致的饮食不化、脘闷嘈杂、恶心呕吐、腹痛便溏、不思饮食、体弱倦怠。现行质量标准的人参健脾丸有大蜜丸、小蜜丸、水蜜丸三种规格，但一般仅包括橙皮苷1种成分的含量测定项目，无法整体反映产品的质量状况。且目前人参健脾丸物质基础研究较少，生产企业较多，不同生产企业、不同生产批次之间的产品质量差异亦无文献报道。
[0003]中国专利CN 115541768A公开了一种同时鉴别人参健脾丸中八种原料的检测方法，利用UPLC
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Q
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Orbitrap高效液相色谱质谱联用仪同时鉴别人参健脾丸中人参、陈皮、木香、黄芪、当归、远志、白术和酸枣仁八种原料药，这种方法以特征峰保留时间和精确质量数作为判断标准，但不同原料的特征峰保留时间非常接近，如16.18min处的人参特征峰、16.80min处的酸枣仁特征峰、16.99min处的远志特征峰，17.17min处的黄芪特征峰、17.51min处的酸枣仁特征峰，此处峰比较密集，很容易出现偏差，且未实现对某一原料成分进行定量检测。
[0004]因此，研发一种测试方法简单、准确度高的评价人参健脾丸质量的方法具有重要意义。

技术实现思路

[0005]针对现有技术中存在的问题，本专利技术提供了一种HPLC波长切换技术同时测定人参健脾丸中12种指标成分含量的方法，测试方法简单，准确度高，能够从整体上反应人参健脾丸的质量。
[0006]本专利技术通过以下技术方案实现：
[0007]一种HPLC波长切换技术同时测定人参健脾丸中12种指标成分含量的方法，采用HPLC波长切换技术对人参健脾丸中的隐绿原酸、香草酸、斯皮诺素、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、芸香柚皮苷、3,6
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二芥子酰基蔗糖、橙皮苷、川陈皮素、橘皮素、藁本内酯、白术内酯I进行测定，HPLC检测波长为：0～14min，325nm；14～20min，260nm；20～21.5min，325nm；21.5～22.5min，282nm；22.5～60min，325nm；60～70min，277nm。
[0008]进一步地，所述的HPLC波长切换技术同时测定人参健脾丸中12种指标成分含量的方法，具体包括以下步骤：
[0009](1)混合对照品溶液的制备：分别称取隐绿原酸、香草酸、斯皮诺素、毛蕊异黄酮葡
萄糖苷、阿魏酸、芸香柚皮苷、3,6
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二芥子酰基蔗糖、橙皮苷、川陈皮素、橘皮素、藁本内酯、白术内酯I对照品，加甲醇制成每1mL含隐绿原酸17.75μg、香草酸20.02μg、斯皮诺素19.96μg、毛蕊异黄酮葡萄糖苷30.81μg、阿魏酸21.07μg、芸香柚皮苷84.14μg、3,6
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二芥子酰基蔗糖44.24μg、橙皮苷638.38μg、川陈皮素17.63μg、橘皮素17.17μg、藁本内酯162.48μg、白术内酯17.28μg的混合对照品溶液；
[0010](2)供试品溶液的制备：取人参健脾丸2～3g，加入甲醇，水浴加热回流0.5～2h，取出，放冷，称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，得供试品溶液；
[0011](3)标准曲线的绘制：将混合对照品溶液稀释成不同浓度梯度，注入HPLC，采用波长切换法进行检测，以质量浓度为横坐标(X)，峰面积积分值为纵坐标(Y)，绘制标准曲线；
[0012](4)供试品发检测：将供试品溶液注入HPLC，采用波长切换法进行检测，测定各色谱峰位置和峰面积，代入标准曲线，计算供试品中各成分的含量。
[0013]进一步地，步骤(2)中所述的人参健脾丸为水蜜丸、小蜜丸和大蜜丸中的一种。
[0014]进一步地，所述的HPLC色谱条件为：色谱柱为Kromasil 100
‑5‑
C
18
，250mm
×
4.6mm 5μm，流动相为以乙腈
‑
0.1％甲酸水溶液，梯度洗脱，0～5min，5％乙腈；5～60min，5％
→
65％乙腈；60～63min，65％乙腈；63～66min，65％
→
90％乙腈；66～70min，90％乙腈；流速为1.0mL
·
min
‑1；柱温为35℃；进样量为10μL。
[0015]进一步地，步骤(2)中大蜜丸或小蜜丸加入硅藻土充分研磨后剪碎，然后加入甲醇，大蜜丸或小蜜丸与硅藻土的质量比为2～3:1.5。
[0016]有益效果
[0017]本专利技术方法能够同时对人参健脾丸中隐绿原酸、香草酸、斯皮诺素、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、芸香柚皮苷、3,6
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二芥子酰基蔗糖、橙皮苷、川陈皮素、橘皮素、藁本内酯、白术内酯I12中成分进行定性和定量检测，利用HPLC波长切换技术，提高了检测灵敏度，测定结果更加准确，能够从整体上反应人参健脾丸的质量。
附图说明
[0018]图1为混合对照品溶液HPLC色谱图；
[0019]图2为人参健脾丸样品的HPLC色谱图。
具体实施方式
[0020]为了进一步理解本专利技术，下面结合实施例对本专利技术优选实施方案进行描述，但是应当理解，这些描述只是进一步说明本专利技术的特征及优点，而不是对本专利技术进行限制。
[0021]本专利技术实施例中的仪器、试剂与样品：
[0022]Waters 2695高效液相色谱仪(紫外检测器，美国Waters公司)；XSE205十万分之一电子天平(德国METTLER TOLEDO公司)；
[0023]对照品：香草酸(110776
‑
200402，以100.0％计)、斯皮诺素(111869
‑
202005，以94.8％计)、毛蕊异黄酮葡萄糖苷(111920
‑
201907，以96.8％计)、阿魏酸(110773
‑
201915，以99.4％计)、3,6
’‑
二芥子酰基蔗糖(111848
‑
202006，以96.5％计)、橙皮苷(110721
‑
201818，以96.2％计)、川陈皮素(112055
‑
202001，以99.6％计)、橘皮素(112054
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202102，以100.0％计)、藁本内酯(111737
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种HPLC波长切换技术同时测定人参健脾丸中12种指标成分含量的方法，其特征在于，采用HPLC波长切换技术对人参健脾丸中的隐绿原酸、香草酸、斯皮诺素、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、芸香柚皮苷、3,6
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二芥子酰基蔗糖、橙皮苷、川陈皮素、橘皮素、藁本内酯、白术内酯I进行测定，HPLC检测波长为：0～14min，325nm；14～20min，260nm；20～21.5min，325nm；21.5～22.5min，282nm；22.5～60min，325nm；60～70min，277nm。2.根据权利要求1所述的HPLC波长切换技术同时测定人参健脾丸中12种指标成分含量的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：(1)混合对照品溶液的制备：分别称取隐绿原酸、香草酸、斯皮诺素、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、芸香柚皮苷、3,6
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二芥子酰基蔗糖、橙皮苷、川陈皮素、橘皮素、藁本内酯、白术内酯I对照品，加甲醇制成每1mL含隐绿原酸17.75μg、香草酸20.02μg、斯皮诺素19.96μg、毛蕊异黄酮葡萄糖苷30.81μg、阿魏酸21.07μg、芸香柚皮苷84.14μg、3,6
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二芥子酰基蔗糖44.24μg、橙皮苷638.38μg、川陈皮素17.63μg、橘皮素17.17μg、藁本内酯162.48μg、白术内酯17.28μg的混合对照品溶液；(2)供试品溶液的制备：取人参健脾丸2～3g，加入甲醇，水浴加热回流0.5～2h，取出，放冷，称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，得供试品溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：栾永福，周广涛，林永强，汪冰，周倩倩，解盈盈，许丽丽，
申请(专利权)人：山东省食品药品检验研究院，
类型：发明
国别省市：