用于结直肠癌早期检测的肿瘤自身抗原/抗体组合及应用制造技术

本发明专利技术涉及用于结直肠癌早期检测的肿瘤自身抗原/抗体组合及应用。具体地，本发明专利技术提供了自身抗体的诊断试剂的用途。本发明专利技术的研究证实，本发明专利技术的自身抗体组合可用于结直肠癌的早期筛查或鉴别诊断，以及结直肠癌患者干预治疗后疗效评估。本发明专利技术的检测方法简单快捷，患者依从性高，具有高灵敏度和高特异性，从而有助于更准确、更早期地进行结直肠癌的诊断和预后评估。评估。评估。

【技术实现步骤摘要】
用于结直肠癌早期检测的肿瘤自身抗原/抗体组合及应用


[0001]本专利技术涉及生物技术和医学诊断领域，具体地，本专利技术涉及用于结直肠癌早期检测的肿瘤自身抗原/抗体组合及应用。

技术介绍

[0002]在世界范围内，结直肠癌(CRC)是男性中第三大最常见的癌症，女性中第二位。据估计，CRC年新发病例140万，占全球癌症负担的9.9%。与此同时，每年造成约70万人死亡，使其成为癌症相关死亡的第四大常见原因。男性的CRC死亡率高于女性，具有显着的地区差异。
[0003]在中国，结直肠癌的发病率在男性所有癌症中排名第五，在女性中排名第四，在男性和女性中死亡率均排名第五。我国CRC发病率为15～25/10万人，死亡率为7～13/10万人，呈上升趋势。城市地区发病率高于农村地区，经济较发达地区发病率较高，近期东南沿海地区发病率较快上升。
[0004]CRC的危险因素包括年龄、性别、家族性腺瘤性息肉病、腺瘤性多发性个体或家族史、炎症性肠病、糖尿病和胰岛素抵抗力、饮酒、肥胖、吸烟、红肉和高脂肪摄入、盆腔放疗等。
[0005]在过去的20年中，结直肠癌筛查极大地促使CRC发病率和死亡率呈下降趋势。筛查的临床价值体现在其预防癌症发生、致死和过度治疗费用的方面，在组织病变发展成为癌症和早期癌症扩散到肠壁之前，检测就能及时发现这些病变的存在，起到积极的作用。
[0006]患有早期局部结直肠癌症（I期和II期）的患者5年生存率接近90%。被诊断患有晚期CRC的患者，通常伴有远端器官转移，他们存活率为仅13.1%，在这个阶段，治疗往往成为姑息治疗，与治疗相关的经济负担最大。
[0007]结肠镜检查是目前CRC筛查的参考方法，建议在50岁或以上的平均风险人群中每10年一次。结肠镜检查通过直接可视化检测癌性和癌前病变的能力已在几个大型队列研究中得到证实。结肠镜检查检测CRC的敏感性大于95%，而其检测晚期腺瘤（直径10毫米以上）的敏感性为88%
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98%。病例对照研究表明，结肠镜检查可降低53%
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72%的CRC发病率和31%的CRC相关死亡率。结肠镜检查的最大优势之一是能够在检测时去除癌前病变和小的癌性病变。它还可以检测结肠的近端和远端。与结肠镜检查相关的弊端包括检测过程的侵入性、所需的肠道准备、镇静剂或麻醉剂的使用、需要检测后的护理。肠道准备通常令人不适且耗时过程，需要临时改变药物和饮食，并且需要使用清洁剂。结肠镜检查期间存在肠穿孔的风险和结肠镜检查后出血的风险，尤其是在息肉切除术后患者中。这些弊端导致患者结肠镜检查的依从性低。此外，这项检查高度依赖内窥镜检查人员的技术来可视化和去除病变，尤其是近端结肠中的病变，这些病变可能更难以发现。扁平或无蒂息肉可能特别难以检测，需要更丰富的专业技术。
[0008]CT结肠造影在日常临床实践中检测CRC和晚期腺瘤的敏感性，对大于10mm的病灶为90%，对于大于6毫米的病灶为78%。它主要使用于由于其他合并症或结构问题而无法对结
肠进行充分光学检查的患者，这些患者不适合进行结肠镜检查。CT结肠成像具有可视化检测整个结肠的优点，但是它是半侵入性的。为了更好地可视化，结肠需要被充入空气；虽然这对许多患者来说是不舒服的，但它不需要镇静剂。CT结肠造影的弊端包括令人不快的肠道准备，类似于结肠镜检查，以及使用电离辐射，这会带来额外的安全问题和成本。这种筛查方法高度依赖于放射科医生的技术专长来解释检查结果。
[0009]愈创木脂粪便隐血检查（FOBT）和粪便免疫化学测试(FIT)旨在检测血红蛋白作为粪便中潜血的标志物。大多FOBT/FIT研究是观察性的，这可能高估了它们的敏感性。在以结肠镜检查为参考标准的研究中，FIT检测CRC和癌前病变的敏感性分别为71%
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75%和27%
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29%，高于FOBT的33%
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75%和11%
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25％。FOBT的特异性(98%
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99%)高于FIT(94%
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95%)。FOBT已被证明可将CRC死亡率降低15%
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33%。当无其它筛查方法时，应每年重复进行FOBT和FIT检测。FOBT和FIT可以在家中进行，是无创的，不需要大量的肠道准备。早期病灶出血较少、频率低，可能导致假阴性检测结果，因此这些检查更有可能检测到更成熟的病灶并漏诊癌前病灶。此外，膳食摄入维生素C会导致假阴性结果，因为它会抑制FOBT的过氧化物酶活性，而摄入红肉的膳食血红蛋白会导致FOBT的假阳性结果。尽管FIT试剂盒只要求进行一次测试，但某些FOBT测试要求测试一式两份或三次。在一项针对超过100万筛查年龄参与者的研究中，发现男性每年FOBT的依从率为42.1%，女性为42.9%。同样，那些阳性检测结果的人，进行结肠镜检查随访率很低，因此影响了进行FOBT/FIT筛查的价值。
[0010]多靶点粪便DNA(mt
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sDNA)检测是一种非侵入性的旨在检测粪便样本中异常DNA和潜血的筛查方法。该测试旨在检测粪便中的十种基于DNA的标志物和人类血红蛋白。然后将检测DNA和血红蛋白生物标志物的测定结果结合到一个诊断算法中，产生阴性或阳性的检测结果。在一项盲法、横断面筛选研究中，该研究包括至少10,000名年龄大于50岁且处于平均风险的无症状参与者，他们具有FIT和结肠镜检查的结果。
[0011]在这项研究中，mt
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sDNA测试具有灵敏度为92.3%，而FIT测试的灵敏度为73.8%。mt
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sDNA检测对检测癌前病变表现出较高的灵敏度，检测出42.4%的晚期腺瘤受试者、69.2%的高度不典型增生癌前病变受试者和42.4%的无柄锯齿状息肉受试者。该方法的局限性包括该测试需更广泛的临床研究证据，虽然它具有较高的灵敏度，但特异性稍差，同时检测成本高。因此，根据中国医疗体系的现状，使用血液作为早期肿瘤筛查的样本更加切实可行。
[0012]循环肿瘤DNA(ctDNA)，也称为无细胞DNA，是在循环系统中检测到的源自凋亡的肿瘤细胞的DNA序列。在癌细胞中发现的带有变异或突变的DNA片段可能是肿瘤的特定标志物，例如用于结直肠癌检测的Septin9甲基化检测。然而，血浆中发现的突变DNA片段的数量因肿瘤类型而异。ctDNA水平可以指征总体肿瘤负荷（更高水平与更大或更晚期的肿瘤相关），但一些晚期肿瘤患者没有可检测到的ctDNA。此外，对于某些特定的肿瘤类型，尚不清楚为什么有些患者有可检测到的ctDNA而另一些则没有。ctDNA片段的数量可低至每1ml血浆1个位点突变片段，因此需采用新一代测序和大规模并行测序的数字基因组技术来扩增突变ctDNA片段。这些系统需要辨认DNA的突变片段是来自癌细胞还是正常细胞中DNA聚合酶的随机错误。
[0013]肿瘤自身抗体（TAA）可在免疫级联诱导下，高水平地稳定存在，尽管相应抗原水平较低。因此，已提出自身抗体作为早期检测癌症的生物标志物。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种自身抗体的诊断试剂的用途，其特征在于，用于制备一诊断试剂或试剂盒，所述试剂或试剂盒用于（a）诊断结直肠癌的发生风险；和/或（b）结直肠癌的预后评估；其中，所述诊断试剂用于检测所述自身抗体的水平，并且所述自身抗体包括以下组合：（A1）Anti
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PSMC1、（A2）Anti
‑
PBRM1和（A3）Anti
‑
FGFR2。2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述自身抗体还包括选自下组的任一抗体、或其组合：（A4）Anti
‑
COPB1；（A5）Anti
‑
PEBP1；（A6）Anti
‑
ATP4A；（A7）Anti
‑
DAL
‑
1；（A8）Anti
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PARP1。3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述自身抗体还包括：（B1）Anti
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P53。4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述自身抗体包括以下组合：（A1）Anti
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PSMC1；（A2）Anti
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PBRM1；（A3）Anti
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FGFR2；（A4）Anti
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COPB1；（A5）Anti
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PEBP1（A6）Anti
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ATP4A；和（B1）Anti
‑
P53。5.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒含有一检测试剂，所述检测试剂用于检测自身抗体，其中，所述自身抗体包括以下组合：（A1）Anti
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PSMC1、（A2）Anti
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PBRM1和（A3）Anti
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FGFR2。6.一种检测方法，其特征在于，包括步骤：(a)提供一检测样本；(b)检测所述检测样本中自身抗体水平，记为Y1；和(c)将所述自身抗体水平与对照参比值Y0进行比较；其中，所述的针对靶抗原的自身抗体包括以下组合：（A1）Anti
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PSMC1、（A2）Anti
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PBRM1和（A3）Anti
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FGFR2；如果检测对象的自身抗体的检测结果满足以下条件时，则提示所述对象的结直肠癌发生风险高：当某一自身抗体的水平高于参考值或标准值Y0时，则提示所述检测对象的结直肠癌发生风险高。7.如权利要求6所述的检...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙苏彭，康美华，阴亮，孙立平，
申请(专利权)人：上海秤信生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：