一种苦杏仁蛋白的提取方法技术

本发明专利技术公开一种苦杏仁蛋白的提取方法，包括如下步骤：步骤(1)、将苦杏仁脱皮脱苷，得到脱苷苦杏仁；步骤(2)、将脱苷苦杏仁进行脱脂，得到脱脂苦杏仁；步骤(3)、利用碱溶酸沉法与等电点

【技术实现步骤摘要】
一种苦杏仁蛋白的提取方法


[0001]本专利技术涉及蛋白提取
具体地说是一种苦杏仁蛋白的提取方法。

技术介绍

[0002]苦杏仁是传统的药食同源资源，其蛋白含量达到18％～34％，而脱脂杏仁中蛋白含量高达68％以上，其氨基酸种类齐全，组成平衡合理，是优质的蛋白资源。苦杏仁含有多种矿质元素，还富含维生素E、硫胺素VB1、核黄素VB2、尼克酸VB5以及抗坏血酸等多种维生素。国外一些研究表明，苦杏仁中含有黄酮等多酚类成分，在杏仁蛋白提取过程中，这些多酚类物质的氧化会导致蛋白颜色的变化，而影响蛋白的品质。

技术实现思路

[0003]为此，本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种苦杏仁蛋白的提取方法，以解决杏仁蛋白提取过程中由于多酚类物质的氧化等原因而导致蛋白颜色变化以及纯度差的问题。
[0004]为解决上述技术问题，本专利技术提供如下技术方案：
[0005]一种苦杏仁蛋白的提取方法，包括如下步骤：
[0006]步骤(1)、将苦杏仁脱皮脱苷，得到脱苷苦杏仁；
[0007]步骤(2)、将脱苷苦杏仁进行脱脂，得到脱脂苦杏仁；
[0008]步骤(3)、利用碱溶酸沉法与等电点
‑
盐析相结合的方法提取脱脂苦杏仁中的苦杏仁蛋白，得到苦杏仁蛋白沉淀；
[0009]步骤(4)、对苦杏仁蛋白沉淀进行纯化，即得到苦杏仁蛋白。相比传统的碱溶酸沉法，采用本专利技术的碱溶酸沉法与等电点
‑
盐析相结合的方法有利于将苦杏仁蛋白与多酚类物质彻底分离，从而避免苦杏仁中的多酚物质因氧化变色而导致得到的蛋白质外观色泽加深的现象。
[0010]上述苦杏仁蛋白的提取方法，步骤(3)包括如下步骤：
[0011]步骤(3
‑
1)、将脱脂苦杏仁粉倒入饱和氯化钠溶液中，搅拌混匀后调节其pH至碱性，置于超声条件下超声分散，得到碱性分散液；将碱性分散液用低温高速离心机离心后取上清液；使用饱和氯化钠溶液作为提取溶剂并调节其pH至碱性，能够在本专利技术的超声条件下使苦杏仁蛋白充分释放；并且在后续调节蛋白粗提取液的pH至其等电点以沉淀苦杏仁蛋白时，饱和氯化钠溶液作为溶剂能够将蛋白粗提取液中的多酚等杂质充分溶解从而保留在离心液中与苦杏仁蛋白沉淀分开，有利于得到纯度较高的苦杏仁蛋白质；另外，由于氯化钠自身无毒，其分子量小且极易溶于水，后期容易从苦杏仁蛋白质中除去；
[0012]步骤(3
‑
2)、将离心得到的沉淀部分采用步骤(3
‑
1)的方法再次进行至少两次浸提处理，将得到的上清液与步骤(3
‑
1)中的上清液合并，得到蛋白粗提液；
[0013]步骤(3
‑
3)、调节蛋白粗提取液的pH至苦杏仁蛋白的等电点，加入硫酸铵溶液混合均匀后置于冷藏中静置；静置结束后转移至低温高速离心机中离心，得到苦杏仁蛋白沉淀。
[0014]上述苦杏仁蛋白的提取方法，步骤(3
‑
1)中，脱脂苦杏仁粉过80目筛；脱脂苦杏仁粉与饱和氯化钠溶液的质量之比为1:15～25；搅拌混匀后利用1mo l/L的氢氧化钠溶液调节pH至8.5～10，当饱和氯化钠溶液的pH调节至该范围内时，能够将充分释放的苦杏仁蛋白溶解在提取液中而提高脱脂苦杏仁中苦杏仁蛋白的提取率；超声分散的温度为45～55℃，超声功率为200～250W，超声频率为20～30kHz；超声分散的时间为5～30mi n；低温高速离心机的转速为4000～6000rpm，离心时间为15～30mi n。
[0015]上述苦杏仁蛋白的提取方法，步骤(3
‑
3)中，利用1mo l/L的盐酸溶液调节蛋白粗提取液的pH至4.0～4.5；硫酸铵溶液的饱和度为50～60％；蛋白粗提取液与硫酸铵溶液的体积之比为1：1～3；在该盐析条件下，能够使蛋白粗提液中的蛋白质充分沉淀，同时使得蛋白粗提液中的其它杂质成分不会随蛋白质沉淀而进入苦杏仁蛋白沉淀影响其纯度；冷藏温度为3～8℃，静置时间为8～14h；低温高速离心机的转速为4000～6000rpm，离心时间为15～30mi n。
[0016]上述苦杏仁蛋白的提取方法，步骤(4)包括如下步骤：
[0017]步骤(4
‑
1)、将苦杏仁蛋白沉淀洗涤至洗涤液为中性后，加入磷酸缓冲液混合均匀，得到蛋白透析液；
[0018]步骤(4
‑
2)、将蛋白透析液转入透析袋中进行透析处理至蛋白透析液中不含硫酸根离子；
[0019]步骤(4
‑
3)、透析处理结束后，将透析袋内剩余物冷冻干燥即可获得苦杏仁蛋白。
[0020]上述苦杏仁蛋白的提取方法，步骤(4
‑
1)中，磷酸缓冲溶液的物质的量浓度为0.05mo l/L，pH为7.0；洗涤后的苦杏仁蛋白沉淀先用蒸馏水溶解，然后再加入磷酸缓冲液调节其pH为7.0，溶解时，苦杏仁蛋白沉淀与蒸馏水的质量之比为1:10；步骤(4
‑
2)中，透析袋的相对分子截留量为3000～5000。
[0021]上述苦杏仁蛋白的提取方法，步骤(1)包括如下步骤：
[0022]步骤(1
‑
1)、将干燥苦杏仁置于水中浸泡后，用自动脱皮机脱去红衣种皮，经色选机和人工两次筛选后，得到脱皮苦杏仁；
[0023]步骤(1
‑
2)、将脱皮苦杏仁置于水中再次进行浸泡；
[0024]步骤(1
‑
3)、浸泡结束后，换水并加入连二亚硫酸钠浸泡，
[0025]步骤(1
‑
4)、浸泡结束后再次换水并加入一水柠檬酸浸泡，浸泡结束后过滤烘干得到脱苷苦杏仁。
[0026]上述苦杏仁蛋白的提取方法，步骤(1
‑
1)中：浸泡温度为80～90℃，浸泡时间为10～15mi n；步骤(1
‑
2)中：浸泡温度为70～85℃，浸泡时间为2～5h；步骤(1
‑
3)中，水中连二亚硫酸钠的加入量为水的2
‰
，浸泡温度为70～85℃，浸泡时间为8～14h；若浸泡温度过高会破坏苦杏仁蛋白结构，影响后续蛋白得率和蛋白性质；若温度过低则需要较长的浸泡时间，效率低；步骤(1
‑
4)中，水中一水柠檬酸的加入量为水的2
‰
，浸泡温度为60～70℃，浸泡时间为5～10h；
[0027]步骤(1
‑
1)、步骤(1
‑
2)、步骤(1
‑
3)和步骤(1
‑
4)中，浸泡时，苦杏仁与水的质量之比均为1:5～10。
[0028]上述苦杏仁蛋白的提取方法，步骤(2)中，先将脱苷苦杏仁置于液压机中进行第一次脱脂，然后将液压杏仁粕粉碎后转入亚临界罐中进行二次萃取脱脂。
[0029]上述苦杏仁蛋白的提取方法，亚临界脱脂的萃取条件为：萃取时间为40～50mi n，萃取温度本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种苦杏仁蛋白的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤(1)、将苦杏仁脱皮脱苷，得到脱苷苦杏仁；步骤(2)、将脱苷苦杏仁进行脱脂，得到脱脂苦杏仁；步骤(3)、利用碱溶酸沉法与等电点
‑
盐析相结合的方法提取脱脂苦杏仁中的苦杏仁蛋白，得到苦杏仁蛋白沉淀；步骤(4)、对苦杏仁蛋白沉淀进行纯化，即得到苦杏仁蛋白。2.根据权利要求1所述的苦杏仁蛋白的提取方法，其特征在于，步骤(3)包括如下步骤：步骤(3
‑
1)、将脱脂苦杏仁粉倒入饱和氯化钠溶液中，搅拌混匀后调节其pH至碱性，置于超声条件下超声分散，得到碱性分散液；将碱性分散液用低温高速离心机离心后取上清液；步骤(3
‑
2)、将离心得到的沉淀部分采用步骤(3
‑
1)的方法再次进行至少两次浸提处理，将得到的上清液与步骤(3
‑
1)中的上清液合并，得到蛋白粗提液；步骤(3
‑
3)、调节蛋白粗提取液的pH至苦杏仁蛋白的等电点，加入硫酸铵溶液混合均匀后置于冷藏中静置；静置结束后转移至低温高速离心机中离心，得到苦杏仁蛋白沉淀。3.根据权利要求2所述的苦杏仁蛋白的提取方法，其特征在于，步骤(3
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1)中，脱脂苦杏仁粉过80目筛；脱脂苦杏仁粉与饱和氯化钠溶液的质量之比为1:15～25；搅拌混匀后利用1mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至8.5～10；超声分散的温度为45～55℃，超声功率为200～250W，超声频率为20～30kHz；超声分散的时间为5～30min；低温高速离心机的转速为4000～6000rpm，离心时间为15～30min。4.根据权利要求2所述的苦杏仁蛋白的提取方法，其特征在于，步骤(3
‑
3)中，利用1mol/L的盐酸溶液调节蛋白粗提取液的pH至4.0～4.5；硫酸铵溶液的饱和度为50～60％；蛋白粗提取液与硫酸铵溶液的体积之比为1：1～3；冷藏温度为3～8℃，静置时间为8～14h；低温高速离心机的转速为4000～6000rpm，离心时间为15～30min。5.根据权利要求1所述的苦杏仁蛋白的提取方法，其特征在于，步骤(4)包括如下步骤：步骤(4
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1)、将苦杏仁蛋白沉淀洗涤至洗涤液为中性后，加入磷酸缓冲液混合均匀，得到蛋白透析液；步骤(4
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2)、将蛋白透析液转入透析袋中进行透析处理至蛋白透析液中不含硫酸根离子；步骤(4
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【专利技术属性】
技术研发人员：乌云塔娜，朱绪春，尹明宇，王楚，朱绪有，李铁柱，黄梦真，刘慧敏，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院经济林研究所，
类型：发明
国别省市：