检测标志物的试剂在制备用于诊断哮喘的试剂盒中的应用制造技术

本发明专利技术提出了一种检测标志物的试剂在制备用于诊断哮喘的试剂盒中的应用。本发明专利技术的标志物为PDK4、TM4SF1、WIF1、WNT5A中的任意一种或几种。本发明专利技术的检测标志物的试剂是检测样本中标志物的表达水平和/或甲基化水平的试剂，可以用在诊断哮喘的试剂盒中，通过这个试剂盒来诊断哮喘，实现了哮喘的早期准确诊断，具有很好的诊断效能，从而筛选预防或治疗哮喘的药物，解决了传统的依赖于临床表现、肺功能检查或峰流速测量来诊断哮喘的技术存在判断不准确和操作不方便的问题，填补了诊断哮喘的试剂盒的空白，提供了一种快捷方便的哮喘诊断方法。法。法。

【技术实现步骤摘要】
检测标志物的试剂在制备用于诊断哮喘的试剂盒中的应用


[0001]本专利技术涉及生物医药的
，特别是指检测标志物的试剂在制备用于诊断哮喘的试剂盒中的应用。

技术介绍

[0002]哮喘(Asthma)是由气道上皮细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞等多种细胞以及细胞组分参与的慢性气道炎症性疾病，以气道炎症、气道高反应性、气道重塑为特点。近年来，哮喘患病率呈逐年增长的趋势，已成为严重危害人类健康的慢性气道炎症疾病之一，其反复发作可导致慢性阻塞性肺疾病、支气管扩张、肺源性心脏病等，严重影响患者的生活质量，造成沉重的社会负担。对于大部分哮喘患者，传统疗法如糖皮质激素、支气管扩张剂治疗有效，临床症状得到控制，但是，仍有部分患者病情得不到缓解。因此，必须改进对哮喘的诊断和监测以筛选出易感个体实施早期预防治疗。传统的诊断技术依赖于临床表现、肺功能检查或峰流速测量，而哮喘的临床表现非特异性，肺功能检查不是敏感指标，部分哮喘患者肺功能检查表现为正常或变化不明显。因此，需要一种用于诊断哮喘的试剂盒。

技术实现思路

[0003]为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种检测标志物的试剂在制备用于诊断哮喘的试剂盒中的应用，本专利技术的技术方案是这样实现的：
[0004]在一个方面，本专利技术的一种检测标志物的试剂在制备用于诊断哮喘的试剂盒中的应用，所述标志物为PDK4、TM4SF1、WIF1、WNT5A中的任意一种或几种。
[0005]本专利技术的检测标志物的试剂是检测样本中标志物的表达水平和/或甲基化水平的试剂，可以用在诊断哮喘的试剂盒中，通过这个试剂盒来诊断哮喘，实现了哮喘的早期准确诊断，具有很好的诊断效能，从而筛选预防或治疗哮喘的药物，解决了传统的依赖于临床表现、肺功能检查或峰流速测量来诊断哮喘的技术存在判断不准确和操作不方便的问题，填补了诊断哮喘的试剂盒的空白，提供了一种快捷方便的哮喘诊断方法。其中，组合标志物的诊断效能优于单个标志物。这是一种用于检测样本中标志物的表达水平和/或甲基化水平的试剂在制备用于诊断哮喘的试剂盒中的用途，样本包括组织、体液。
[0006]作为一种优选的实施方案，所述试剂盒为qPCR试剂盒、免疫印迹检测试剂盒、免疫层析检测试剂盒、流式细胞分析试剂盒、免疫组化检测试剂盒、ELISA试剂盒、电化学发光检测试剂盒中的任意一种。这是一种用于诊断哮喘的试剂盒，这种试剂盒包含检测样本中标志物的表达水平和/或甲基化水平的试剂，标志物为PDK4、TM4SF1、WIF1、WNT5A中的任意一种或几种，其中，PDK4、TM4SF1、WIF1和WNT5A的多种组合的效果更好。
[0007]作为一种优选的实施方案，所述试剂为通过聚合酶链反应、核酸酶保护分析、原位杂交法、核酸微阵列、RNA印迹或DNA芯片检测标志物的表达水平的试剂。
[0008]作为一种优选的实施方案，所述聚合酶链反应为实时荧光定量逆转录多聚酶链反应、逆转录聚合酶链反应、竞争性聚合酶链反应中的任意一种。
[0009]作为一种优选的实施方案，所述试剂还包括通过甲基化芯片、甲基化特异性PCR、亚硫酸氢盐测序法、联合亚硫酸氢钠的限制性内切酶分析法、荧光定量法、高通量测序、焦磷酸测序定量、DNA印迹法、限制性界标基因组扫描、单核苷酸引物延伸、CpG岛微阵列、单核苷酸引物延伸SNUPE、质谱检测所述标志物的甲基化水平的试剂。
[0010]作为一种优选的实施方案，所述试剂包括对所述标志物具有特异性的抗体、对所述标志物具有特异性的探针和/或对所述标志物具有特异性的引物。
[0011]在另一个方面，本专利技术的一种用于诊断哮喘的试剂盒，所述试剂盒包括检测标志物的试剂，所述标志物为PDK4、TM4SF1、WIF1、WNT5A中的任意一种或几种。
[0012]这种试剂盒包含检测样本中标志物的表达水平和/或甲基化水平的试剂，标志物为PDK4、TM4SF1、WIF1、WNT5A中的任意一种或几种，通过这个试剂盒来诊断哮喘，实现了哮喘的早期准确诊断，具有很好的诊断效能，从而筛选预防或治疗哮喘的药物，解决了传统的依赖于临床表现、肺功能检查或峰流速测量来诊断哮喘的技术存在判断不准确和操作不方便的问题，填补了诊断哮喘的试剂盒的空白，提供了一种快捷方便的哮喘诊断方法。
[0013]在再一个方面，本专利技术的一种标志物在筛选预防或治疗哮喘的药物中的应用，所述标志物为PDK4、TM4SF1、WIF1、WNT5A中的任意一种或几种。本专利技术还提供了一种标志物在筛选预防或治疗哮喘的药物中的应用，标志物为PDK4、TM4SF1、WIF1、WNT5A中的任意一种或几种。
[0014]作为一种优选的实施方案，所述筛选预防或治疗哮喘的药物的方法包括以下步骤：1)在测试组中，向待测对象施用测试化合物，检测测试组中来源于所述对象的样品中所述标志物的水平V1；在对照组中，向待测对象施用空白对照，检测对照组中来源于所述对象的样品中所述标志物的水平V2；2)比较步骤1)检测得到的水平V1和水平V2，从而确定所述测试化合物是否是预防或治疗哮喘的候选化合物。所述水平包括表达水平和/或甲基化水平，待测对象为体外细胞体系，是脱离生命体的样品。
[0015]在还一个方面，本专利技术还提供了一种标志物在构建哮喘的诊断系统中的应用，所述标志物为PDK4、TM4SF1、WIF1、WNT5A中的任意一种或几种，所述诊断系统包括：(1)检测单元：包括标志物检测模块；(2)分析单元：将检测单元检测得到的标志物的表达水平和/或甲基化水平作为输入变量，输入哮喘的诊断模型进行分析，所述哮喘的诊断模型为XGBoost、随机森林、glmnet、cforest、机器学习的分类与回归树、treebag、K
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毗邻、神经网络、支持向量机径向、支持向量机线性、朴素贝叶斯或多层感知中的任意一种或几种；(3)评估单元：输出样本对应的个体患哮喘的风险值。这是一种计算机诊断系统，哮喘的诊断模型使用上述的算法来确定。
[0016]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术的检测标志物的试剂是检测样本中标志物的表达水平和/或甲基化水平的试剂，可以用在诊断哮喘的试剂盒中，通过这个试剂盒来诊断哮喘，实现了哮喘的早期准确诊断，具有很好的诊断效能，从而筛选预防或治疗哮喘的药物，解决了传统的依赖于临床表现、肺功能检查或峰流速测量来诊断哮喘的技术存在判断不准确和操作不方便的问题，填补了诊断哮喘的试剂盒的空白，提供了一种快捷方便的哮喘诊断方法。
附图说明
[0017]图1为GSE64913数据集中PDK4的差异表达的箱线图；
[0018]图2为GSE64913数据集中TM4SF1的差异表达的箱线图；
[0019]图3为GSE64913数据集中WIF1的差异表达的箱线图；
[0020]图4为GSE64913数据集中WNT5A的差异表达的箱线图；
[0021]图5为GSE64913数据集中PDK4的ROC曲线分析结果图；
[0022]图6为GSE64913数据集中TM4SF本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测标志物的试剂在制备用于诊断哮喘的试剂盒中的应用，其特征在于：所述标志物为PDK4、TM4SF1、WIF1、WNT5A中的任意一种或几种。2.根据权利要求1所述的检测标志物的试剂在制备用于诊断哮喘的试剂盒中的应用，其特征在于：所述试剂盒为qPCR试剂盒、免疫印迹检测试剂盒、免疫层析检测试剂盒、流式细胞分析试剂盒、免疫组化检测试剂盒、ELISA试剂盒、电化学发光检测试剂盒中的任意一种。3.根据权利要求1所述的检测标志物的试剂在制备用于诊断哮喘的试剂盒中的应用，其特征在于：所述试剂为通过聚合酶链反应、核酸酶保护分析、原位杂交法、核酸微阵列、RNA印迹或DNA芯片检测标志物的表达水平的试剂。4.根据权利要求3所述的检测标志物的试剂在制备用于诊断哮喘的试剂盒中的应用，其特征在于：所述聚合酶链反应为实时荧光定量逆转录多聚酶链反应、逆转录聚合酶链反应、竞争性聚合酶链反应中的任意一种。5.根据权利要求3所述的检测标志物的试剂在制备用于诊断哮喘的试剂盒中的应用，其特征在于：所述试剂还包括通过甲基化芯片、甲基化特异性PCR、亚硫酸氢盐测序法、联合亚硫酸氢钠的限制性内切酶分析法、荧光定量法、高通量测序、焦磷酸测序定量、DNA印迹法、限制性界标基因组扫描、单核苷酸引物延伸、CpG岛微阵列、单核苷酸引物延伸SNUPE、质谱检测所述标志物的甲基化水平的试剂。6.根据权利要求1所述的检测标志物的试剂在制备用于诊断哮喘的试剂盒中的应用，其特征在于：所述试剂包括对所述标志物具有特异性的抗体、对所述标志物具有特异性的探针和/或对所述标...

【专利技术属性】
技术研发人员：王宗玲，潘文，戴丽娜，王风良，王立志，安淑媛，
申请(专利权)人：青岛阜外心血管病医院有限公司，
类型：发明
国别省市：