二芳基苯甲胺类化合物、制备及作为载体合成多肽的应用制造技术

本发明专利技术涉及二芳基苯甲胺类化合物、制备及作为载体合成多肽的应用，涉及多肽合成领域以及抗菌领域。本发明专利技术提供了二芳基苯甲胺类化合物作为可溶性载体在液相合成多肽链中的应用，其作为起始模板试剂依次偶联氨基酸构建多肽链并最终在温和条件下脱除该模板的方法本发明专利技术提供的多肽合成方法兼具固相和液相合成的优点，可以减少生产成本、简化提纯过程、实现高效大规模工业化生产；提供的两亲性抗菌肽序列长度短、组成简单且具有高效的广谱抗菌活性，在多肽化学和抗菌领域具有良好的前景和应用价值。价值。价值。

【技术实现步骤摘要】
二芳基苯甲胺类化合物、制备及作为载体合成多肽的应用


[0001]本专利技术涉及多肽合成领域以及抗菌领域，更具体地，涉及二芳基苯甲胺类化合物、制备及作为载体合成多肽的应用，并且涉及一种两亲性抗菌肽，其序列设计和制备。

技术介绍

[0002]近年来，由于传统抗生素靶标单一且长期广泛使用，导致多重耐药菌进化速度的加快，使得许多细菌产生耐药性。此外，目前抗生素的成本正在增加，新抗生素的开发速度远远落后于新型耐药细菌的出现速度。因此，迫切需要开发高效、低毒、不诱导细菌耐药的抗菌药物。
[0003]其中，抗菌肽作为天然免疫系统的重要组成部分，在过去的二十年里引起了众多研究者的关注。抗菌肽的主要杀菌机制为：通过静电作用接近细胞膜，破坏其完整性并产生穿孔现象，造成细胞内容物溢出而死亡。这种快速的膜溶解机制使得抗菌肽作用于多个靶点，具有广谱抗菌活性，减少了产生耐药菌株的可能，有望成为新一代高效抑菌药物。但天然抗菌肽存在序列长，合成成本高；抗菌活性相对较低；易被蛋白酶降解等问题。为了弥补天然抗菌肽的这些缺点，保留并优化抗菌肽的有利特性，设计能够人工化学合成的序列简单的两亲性抗菌肽，为新型抗菌肽的研发应用提供了巨大帮助。
[0004]多肽的化学合成主要分为两条途径：固相合成和液相合成。在多肽化学的早期发展阶段，多肽合成反应一般都是在液相中进行的，但是传统的液相合成方法分离提纯困难、后处理繁琐。于是，在1963年，美国著名生物化学家Robert Bruce Merrifield提出在固相树脂上进行多肽合成。固相多肽合成方法有效的避免了液相多肽合成繁琐的分离提纯步骤，具有明显的优越性：(1)多肽合成过程中，多肽链连接于聚合物树脂上，得到的产物多肽是不溶的，易洗涤过滤；(2)反应过程中过量的试剂和副产物可以通过洗涤和过滤除去；(3)整个反应在同一容器中进行，避免了多次沉淀、洗涤以及分离造成的损失，操作简便；(4)操作具有强重复性。
[0005]然而，固相合成法也存在着一些问题：(1)合成多肽的序列短，当肽链残基超过50个时，肽链的合成就会受到一定程度的制约；(2)合成时间长；(3)合成效率和纯度低，成本高。随着氨基酸数量的增加，合成效率逐步下降，非目标多肽含量逐步增加，目标多肽的纯度逐步降低，后续的纯化和重复性愈加困难。合成多肽的树脂和保护氨基酸等原料昂贵，多肽合成成本高，还不能完全满足作为商业化生产的要求。
[0006]近年来，为了改进传统固相合成方法的缺点，科学家们专利技术了一类采用固相和液相合成相结合的方式进行多肽的合成。通过设计具有特定结构的可溶性载体，在液相中进行氨基酸偶联，结合了固相和液相合成中间体纯化和后处理方法进行多肽合成，大大提高了多肽的生产规模和纯度，实现了大规模生产。
[0007]鉴于上述问题，本专利技术提供了一种操作简便、收率较高的液相多肽合成方法以及一类序列较短、组成简单的两亲性抗菌肽。主要解决目前多肽合成中分离纯化步骤多、耗时长，生产成本高的问题，以及提供一种解决细菌耐药性的手段。在多肽合成和治疗细菌感染
性疾病方面有着重要作用。

技术实现思路

[0008]本专利技术提供了二芳基苯甲胺类化合物及其制备方法，原料简单易得、成本低，制备步骤温和、简单。使用该载体作为多肽链起始端，可以实现困难氨基酸的偶联，并且存在提纯简单、成本低、产量高的优势，最终得到C端酰胺化的多肽链。以解决现有技术中多肽合成中分离纯化步骤多、耗时长，生产成本高的技术问题。
[0009]根据本专利技术第一方面，提供了一种二芳基苯甲胺类化合物，所述二芳基苯甲胺类化合物的结构式如式Ⅰ所示：
[0010][0011]其中，R为C12～C22的烷基链。
[0012]根据本专利技术另一方面，提供了所述二芳基苯甲胺类化合物的制备方法，反应式如下：
[0013][0014]其中，R为C12～C22的烷基链，X为卤素；
[0015]所述制备方法包括以下步骤：
[0016]a、将式1所示的物质溶解，加入取代反应试剂RX和缚酸剂进行取代反应，生成化合物2；
[0017]b、将化合物2、还原剂和助溶剂加入溶剂中，进行还原反应后生成化合物3；
[0018]c、将化合物3溶解，加入取代反应试剂氨基甲酸乙酯和催化剂，进行取代反应后生成化合物4；
[0019]d、将化合物4溶解，加入碱液和助溶剂，进行水解反应后生成式Ⅰ所示的化合物。
[0020]优选地，步骤a中，所述缚酸剂为无水碳酸钾、无水碳酸钠、吡啶、二异丙基乙胺和三乙胺中的一种或两种以上的混合物；溶剂为DMF、DMAc、DMSO、THF、NMP和甲苯中的一种或两种以上的混合物；化合物1、取代反应试剂RX与缚酸剂的物质的量之比为1.0：(4.0～
4.5)：(6.0～8.0)，取代反应温度为70～100℃，取代反应时间为16～20小时。
[0021]优选地，步骤b中，所述还原剂为硼氢化钠、氢化铝锂或硼烷，溶剂为THF、甲苯、二甲苯中的一种或多种的混合物；化合物2与还原剂的物质的量之为1.0：(4.5～5.0)，还原反应的温度为60～80℃，还原反应时间为4～6小时；
[0022]优选地，步骤c中，所述催化剂为甲烷磺酸，溶剂为THF、甲苯和二甲苯中的一种或多种的混合物；化合物3、取代反应试剂氨基甲酸乙酯与催化剂的物质的量之比为1.0：(2.0～2.5)：(0.2～0.5)，取代反应温度为100～120℃，取代反应时间3～6小时。
[0023]优选地，步骤d中，所述碱液为氢氧化钠，溶剂为THF、甲苯、二甲苯中的一种或多种的混合物，助溶剂为甲醇或乙醇，化合物4与水解反应试剂的物质的量之比为1.0：(7.0～7.5)，水解反应温度为100～120℃，水解反应时间为16～20小时。
[0024]根据本专利技术另一方面，提供了所述二芳基苯甲胺类化合物作为可溶性载体在液相合成多肽链中的应用。
[0025]优选地，所述应用具体为：以式Ⅰ所示的化合物为可溶性载体，以活化剂活化羧基组分，并在碱性条件下与氨基酸通过缩合剂进行缩合，脱除氨基保护基团，并且继续偶联下一氨基酸直至完成多肽的合成，最终裂解载体，得到不含起始端载体且N端酰胺化的多肽链。
[0026]根据本专利技术另一方面，提供了一种两亲性抗菌肽，所述两亲性抗菌肽的氨基酸序列为(AB)
n
，其中n为3～6的整数，A为阳离子型亲水氨基酸，B为疏水氨基酸；
[0027]优选地，所述多肽链为两亲性抗菌肽序列(AB)
n
，其中n为3～6的整数，A为阳离子型亲水氨基酸，B为疏水氨基酸；
[0028]优选地，所述阳离子型亲水性氨基酸为赖氨酸、精氨酸或组氨酸；疏水氨基酸为亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、丙氨酸、缬氨酸或色氨酸。
[0029]根据本专利技术另一方面，提供了所述的两亲性抗菌肽在制备抗菌药物中的应用；
[0030]优选地，所述药物能杀灭的细菌为粪肠球菌、金色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、沙门氏菌或大肠本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种二芳基苯甲胺类化合物，其特征在于，所述二芳基苯甲胺类化合物的结构式如式Ⅰ所示：其中，R为C12～C22的烷基链。2.如权利要求1所述二芳基苯甲胺类化合物的制备方法，其特征在于，反应式如下：其中，R为C12～C22的烷基链，X为卤素；所述制备方法包括以下步骤：a、将式1所示的物质溶解，加入取代反应试剂RX和缚酸剂进行取代反应，生成化合物2；b、将化合物2、还原剂和助溶剂加入溶剂中，进行还原反应后生成化合物3；c、将化合物3溶解，加入取代反应试剂氨基甲酸乙酯和催化剂，进行取代反应后生成化合物4；d、将化合物4溶解，加入碱液和助溶剂，进行水解反应后生成式Ⅰ所示的化合物。3.如权利要求2所述二芳基苯甲胺类化合物的制备方法，其特征在于，步骤a中，所述缚酸剂为无水碳酸钾、无水碳酸钠、吡啶、二异丙基乙胺和三乙胺中的一种或两种以上的混合物；溶剂为DMF、DMAc、DMSO、THF、NMP和甲苯中的一种或两种以上的混合物；化合物1、取代反应试剂RX与缚酸剂的物质的量之比为1.0：(4.0～4.5)：(6.0～8.0)，取代反应温度为70～100℃，取代反应时间为16～20小时。4.如权利要求2所述二芳基苯甲胺类化合物的制备方法，其特征在于，步骤b中，所述还原剂为硼氢化钠、氢化铝锂或硼烷，溶剂为THF、甲苯、二甲苯中的一种或多种的混合物；化合物2与还原剂的物质的量之为1.0：(4.5～5.0)，还原反应的温度为60～80℃，还原反应时间为4～6小时。5.如权利要求2所述二芳基苯甲胺类化合物的制备方法，其特征在于，步骤c中，所述催化剂为甲烷磺酸，溶剂为THF、甲苯和二甲苯中的一种或多种的混合物；化合物3、取代反应试剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱锦涛，杜钶涵，蒋皓，杨卓燃，周增太，夏建新，
申请(专利权)人：襄阳维恩生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：