一种急性重症呼吸系统综合症冠状病毒抗原检测试剂盒及其应用技术方案

本发明专利技术涉及冠状病毒检测的技术领域，具体涉及一种急性重症呼吸系统综合征冠状病毒抗原检测试剂盒及其应用，所述试剂盒包括样品检测试剂液和免疫层析试纸条，所述样品检测试剂液为包含人血管紧张素转换酶2

【技术实现步骤摘要】
一种急性重症呼吸系统综合症冠状病毒抗原检测试剂盒及其应用


[0001]本专利技术涉及免疫检测
，具体涉及冠状病毒检测的
，尤其涉及一种急性重症呼吸系统综合征冠状病毒(SARS
‑
CoV
‑
1/2)抗原检测试剂盒及其应用。

技术介绍

[0002]冠状病毒疾病(covid
‑
19)由严重急性呼吸系统综合征冠状病毒
‑
2(SARS
‑
CoV
‑
2)感染及传播导致。SARS
‑
CoV
‑
2主要通过其表面刺突蛋白(spike protein,SP)结合人黏膜上皮细胞血管紧张素转化酶2(Angiotensin
‑
converting enzyme 2,ACE2)入侵宿主细胞，导致肺炎(Wenhui Li,et al,Angiotensin
‑
converting enzyme 2is a functional receptor for the SARS coronavirus,Nature,2003Nov 27；426(6965):450
‑
4.；Shang,J.et al.Structural basis ofreceptor recognition by SARS
‑
CoV
‑
2,Nature 2020,581,221
–
224.；Lan,J.et al.Structure of the SARS
‑
CoV
‑
2spike receptor
‑
binding domain bound to the ACE2receptor,Nature,2020,581,215
–
220.)。SARS
‑
CoV
‑
2变异迅速、传播不断增强，免疫层析试纸条检测病原体相关成分具有简单便捷、灵敏度较高、特异性较强、不需特制检测仪器等优势，是发展SARS
‑
CoV
‑
2检测产品的重要选择。
[0003]目前，已有研究人员已经研制出多种SARS
‑
CoV
‑
2免疫层析检测相关产品。例如，专利申CN 111879933 A公开了一种基于胶体金的SARS
‑
CoV
‑
2抗原免疫层析检测试剂盒。该技术利用ACE2与SARS
‑
CoV
‑
2刺突蛋白结合的特点，将ACE2包被在试纸条上，再采用抗原(Ag)与抗体(Ab)结合原理，发展了检测新冠病毒刺突蛋白(SP)及N蛋白两种成分相关抗原的免疫层析试剂盒。专利CN202010218543.6公开了一种用于检测新型冠状病毒的时间分辨荧光免疫层析试剂盒，通过荧光微球标记SARS
‑
CoV
‑
2抗体检测病毒N蛋白抗原。而专利CN202010136067公开了一种类似的基于抗体
‑
抗原结合原理发展检测新型冠状病毒N蛋白试剂盒技术。专利CN202010224758则公开了一种新型冠状病毒COVID
‑
19刺突蛋白(Spike protein)抗原荧光检测免疫层析试剂盒技术。专利CN202010184382公开了胶体金标记检测新型冠状病毒NP蛋白技术。申请专利保护的类似技术还有很多，在此不在赘述。
[0004]这些技术均采用了抗原
‑
抗体结合常规原理实现SARS
‑
CoV
‑
2抗原或抗体检测，局限性较大。例如，采用常规抗原
‑
抗体结合技术，灵敏度本身有所欠缺；且这些技术发展的试纸条产品均涉及使用多种抗体，降低了产品稳定性；多种抗体制备，成本较高，工艺复杂；尤其是，病毒变异可能导致抗原序列改变，从而导致灵敏度进一步降低。

技术实现思路

[0005]本专利技术完全摈弃了抗原
‑
抗体(Ag
‑
Ab)结合作用原理，开发了一种新型的针对急性重症呼吸系统综合症冠状病毒(SARS
‑
CoV
‑
1/2)抗原检测试剂盒及其应用，旨在解决现有依赖抗原
‑
抗体(Ag
‑
Ab)结合作用时，因病毒变异导致的需要依赖多种抗体，产品稳定性差，试剂条检测灵敏性会降低的技术问题。
[0006]本专利技术通过以下技术方案来实现上述目的：
[0007]一种急性重症呼吸系统综合症冠状病毒抗原检测试剂盒，包括样品检测试剂液和免疫层析试纸条，所述样品检测试剂液为包含人血管紧张素转换酶2
‑
可见信号材料
‑
亲和素三者形成的复合物(hACE2
‑
visual signal material
‑
avidin complex，简称AVA)的生理等渗溶液，或为包含人血管紧张素转换酶2
‑
可见信号材料
‑
生物素三者形成的复合物(hACE2
‑
visual signal material
‑
biotin complex，简称AVB)的生理等渗溶液，所述免疫层析试纸条包括基底板，及依次固定在基底板上的样品垫、层析膜和吸水垫，所述层析膜上设有检测线(T)和质控线(C)，所述检测线上包被有急性重症呼吸系统综合症冠状病毒抗原(以下简称Ag)，所述质控线上包被有与AVA/AVB对应的生物素/亲和素。
[0008]作为本专利技术的进一步优化方案，所述急性重症呼吸系统综合症冠状病毒为SARS
‑
CoV
‑
1或SARS
‑
CoV
‑
2病毒(SARS
‑
CoV
‑
1/2以下简称SCV)，所述抗原为SCV抗原，包括SCV刺突蛋白(SP)或SCV刺突蛋白受体结合域(RBD)或二者结合的其它物质，例如SCV病毒、重组病毒颗粒、重组抗原等。
[0009]作为本专利技术的进一步优化方案，所述样品检测试剂液中的组分还包括调节渗透压剂、流动性调节剂、pH调节剂、非特异性蛋白结合掩蔽剂和稳定剂，所述样品检测试剂液的pH为7.0
‑
8.5。
[0010]作为本专利技术的进一步优化方案，所述调节渗透压剂为氯化钠，所述流动性调节剂为吐温
‑
20，所述pH调节剂为磷酸盐或柠檬酸盐，所述稳定剂为聚乙二醇2000，所述非特异性蛋白结合掩蔽剂为牛血清蛋白BSA或酪蛋白。
[0011]作为本专利技术的进一步优化方案，所述可见信号材料指能够给出可见光信号的分子，或者能够给出可见光信号的纳米粒，例如载有能够给出可见光信号分子的脂质体、乳胶等粒子，胶体金等；这些粒子的粒径一般小于2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种急性重症呼吸系统综合症冠状病毒抗原检测试剂盒，其特征在于，包括样品检测试剂液和免疫层析试纸条，所述样品检测试剂液为包含人血管紧张素转换酶2
‑
可见信号材料
‑
亲和素三者形成的复合物AVA的生理等渗溶液，或为包含人血管紧张素转换酶2
‑
可见信号材料
‑
生物素三者形成的复合物AVB的生理等渗溶液，所述免疫层析试纸条包括基底板，及依次固定在基底板上的样品垫、层析膜和吸水垫，所述层析膜上设有检测线和质控线，所述检测线上包被有急性重症呼吸系统综合症冠状病毒抗原，所述质控线上包被有与AVA/AVB对应的生物素/亲和素。2.根据权利要求1所述的一种急性重症呼吸系统综合症冠状病毒抗原检测试剂盒，其特征在于，所述急性重症呼吸系统综合症冠状病毒为SARS
‑
CoV
‑
1或SARS
‑
CoV
‑
2病毒。3.根据权利要求2所述的一种急性重症呼吸系统综合症冠状病毒抗原检测试剂盒，其特征在于，所述抗原为SCV抗原，所述SCV抗原为SCV刺突蛋白、SCV刺突蛋白受体结合域、SCV病毒、重组病毒颗粒、重组抗原。4.根据权利要求1所述的一种急性重症呼吸系统综合症冠状病毒抗原检测试剂盒，其特征在于，所述样品检测试剂液中的组分还包括调节渗透压剂、流动性调节...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡林立，陈红军，赵期红，张良荣，
申请(专利权)人：安徽国泰国瑞医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：