三聚氰胺快速检测试剂盒及其制造方法技术

本发明专利技术涉及一种三聚氰胺快速检测试剂盒以及该试剂盒的制造方法，在检 测试剂盒的检测单元中包含用于支撑整个检测系统的塑料外壳、支撑反应体系 的PVC板条、用于提供层析系统的吸水纸、用于吸附反应物的硝酸纤维素膜和 玻璃纤维、反应物(包括三聚氰胺-BSA偶联物，抗驴(或者马、羊)IgG抗体、 结合生物染色剂的三聚氰胺-BSA抗体等等)。在整个试剂盒内还包括用于防 止潮湿的干燥剂。本发明专利技术的试剂盒检测速度快，并且在检测过程中不需要任何 辅助设备，检测成本低廉，不需要投入大量昂贵的检测设备。这使得现场快速 检测成为可能并将成为限制三聚氰胺滥用的有力手段。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种快速检测样品内是否含有三聚氰胺的试剂盒以及该试剂盒 的制造方法。
技术介绍
三聚氰胺(melamine)简称三胺，学名三氨三嗪，别名蜜胺、氰尿酰胺、三聚 酰胺，分子式C3N6H6、 C3N3(NH2)3。分子量126.12，是一种重要的氮杂环 有机化工原料〔2〕。三聚氰胺显弱碱性，能够与各种酸反应生成三聚氰胺盐。 在强酸或强碱液中，三聚氰胺发生水解，胺基逐步被羟基取代，生成三聚氰酸 二酰胺、三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸。三聚氰胺与醛类反应生成加成化合物。 三聚氰胺与醛反应制成树脂，三聚氰胺树脂是一种多种用途的材料，防火耐热 且有很高的稳定性，用于生产塑料、厨房用具、防火纤维、商业滤膜、胶水和 阻燃剂，部分亚洲国家，也被用来制造化肥。三聚氰胺事件变成社会热点话题是在07年3月份，美国大量召回被三聚氰 胺污染的宠物饲料，起因于宠物饲料致死猫狗的事件。据不完全统计，北美地 区仅美国因食用有毒饲料而死亡的宠物就有上万只，相关投诉不计其数，美国 食品药品管理局调查显示，在回收的宠物食品、死亡动物的尿液结晶和肾脏细 胞中都发现有三聚氰胺，研究人员还发现，回收宠物食品所用的小麦谷蛋白添加 物中有较高浓度的三聚氰胺存在。尽管国内尚无动物中毒死亡或产生不良反应 的报道，对于三聚氰胺的毒性也有些争议，但三聚氰胺不是饲料原料，也不是 国家允许使用的饲料添加物。某些不法厂商添加三聚氰胺主要是为了增加产品 的表观蛋白质含量，三聚氰胺被广泛的添加到淀粉、谷朊粉、蛋白粉中，致使 不仅是饲料生产商，其它的食品工厂也需要三聚氰胺的检测以保证他们产品的 安全。目前,国内检测三聚氰胺的方法主要是高效液相法，确诊方法是气相质谱联 用法,但是，这两种方法比较复杂,耗时，而且检测成本较高，将会浪费大量的人力物 力。并且因为这两种方法因为需要特殊、昂贵的检测设备，不适合基层单^f立大 量开展。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有检测技术中存在的不足，提供一种操作简单、方 便，不需要依靠专业仪器和专业人士就能快速定性检测样本内是否含有三聚氰 胺的试剂盒。本专利技术的另一目的则是提供一种上述试剂盒的制备方法。 按照本专利技术提供的技术方案，在检测试剂盒的检测单元中包含用于支纟掌整 个检测系统的塑料外壳，用于支撑反应体系的PVC板条，用于提供层析系统的 吸水纸，用于吸附反应物的硝酸纤维素膜和玻璃纤维，以及反应物；所述反应物包括抗三聚氰胺-BSA抗体，抗驴IgG抗体、抗马IgG抗体或 抗羊IgG抗体，抗三聚氰胺-BSA抗体-染料复合物。 在整个试剂盒内还包括用于防止潮湿的干燥剂。 所述三聚氰胺快速检测试剂盒的方法包含如下步骤(一) 反应物(1) 抗三聚氰胺-BSA抗体；(2) 抗驴-IgG抗体、抗马-IgG抗体或抗羊-IgG抗体；(3) 抗三聚氰胺-BSA抗体-染料复合物将抗三聚氰胺-BSA抗体与生物染 色剂按照l: 1 8的比例进行混合，搅拌过夜后高速离心，取离心处理后的沉淀 物用蒸馏水复溶至三聚氰胺-BSA抗体-染料复合物的浓度为0.5~2mg/l;(二) 试剂盒的制备A、 反应物的包被与吸附(1) 抗三聚氰胺-BSA抗体的包被与干燥将抗三聚氰胺-BSA抗体按照 0.5 1.5mg/l的浓度，以0.5 1.5mL/cr^的用量喷涂到硝酸纤维素膜的下端；然后 通风晾干；(2) 抗三聚氰胺-BSA抗体-染料复合物的吸附与干燥将三聚氰胺-BSA抗 体-染料复合物按照0.5~2mg/l的浓度，以0.5 1.5mL/cr^的用量使之吸附在玻璃 纤维上，干燥密封保存；(3) 抗驴-IgG抗体、抗马-IgG抗体或抗羊-IgG抗体的包被与干燥将抗驴 -IgG抗体、抗马-IgG抗体或抗羊-IgG抗体按照0.8~2mg/l的浓度，以 0.5 1.5mL/cm2的用量喷涂到所述硝酸纤维素膜的上端，然后通风晾干；(4) 吸水纸的处理用5 20g/l浓度的奶粉溶液浸泡辅材上下端的吸水纸， 通风晾干；B、 反应体系的组装与切割(1) 将所述硝酸纤维素膜粘贴到用于支撑整个反应体系的PVC板条上， 同时将所述玻璃纤维与所述硝酸纤维素膜相连形成一个桥式结构；(2) 在PVC板条上靠近粘贴有抗驴-IgG抗体、抗马-IgG抗体或抗羊-IgG 抗体的一端粘贴吸水纸，在PVC板条上的另一端也粘贴吸水纸，并使位于两端 的所述吸水纸相连形成联通的吸水桥式结构，保证毛细管虹吸作用的形成；(3) 用切纸刀将板条按照需要切割成试剂条；C、 试剂盒的组装和分装(1) 将切割好的试剂条装入塑料壳，封闭成型；(2) 将封闭成型的试剂按照包装规格进行分装。 本专利技术利用免疫学的原理，利用三聚氰胺-BSA及其偶联物抗体的特点，迅速检测样品中是否含有三聚氰胺以达到快速检测的目的。整个现场检测只需5 分钟，并且在检测过程中不需要任何辅助设备，这使得现场快速检测成为可能。 具体实施例方式本专利技术的一种三聚氰胺快速检测试剂盒，在检测试剂盒的检测单元中包含 用于支撑整个检测系统的塑料外壳、支撑反应体系的PVC板条、用于提供层析系统的吸水纸、用于吸附反应物的硝酸纤维素膜和玻璃纤维、反应物(包括三聚氰胺-BSA偶联物，抗驴(或者马、羊)IgG抗体、结合生物染色剂的抗三聚 氰胺-BSA抗体、等等)。在整个试剂盒内还包括用于防止潮湿的干燥剂。 下面结合具体实施例对本专利技术作进一步地说明。(一) 反应物制备1、 抗三聚氰胺-BSA抗体的制备将三聚氰胺-BSA复合物与佐剂按照10: 1~15: l的比例混合，然后对兔子进行免疫注射，共进行3次免疫。最后取兔子 血清，用硫胺沉淀法取得抗三聚氰胺-BSA抗体。2、 抗驴(或者马、羊)IgG抗体的制备将驴(或者马、羊)IgG与佐剂 按照10 15: l的比例混合，然后对驴进行免疫注射，共进行3次免疫，最后取 血清，用硫胺沉淀法取得抗驴(或者马、羊)IgG抗体。3、抗三聚氰胺-BSA抗体-染料复合物的制备将抗三聚氰胺-BSA抗体与 生物，色剂按照l: 1 8的比例进行混合，搅拌过夜后高速离心，取沉淀用蒸馏 水复融。(二) 试剂盒的制备1、 反应物的包被与吸附(1) 抗三聚氰胺-BSA抗体的包被与干燥将抗三聚氰胺-BSA抗体按照 0.5M.5mg/1的浓度喷涂到硝酸纤维素膜上。然后通风晾干。(2) 抗三聚氰胺-BSA抗体-染料复合物的吸附与干燥将抗三聚氰胺-BSA 抗体-染料复合物按照0.5~2mg/l的浓度，按照lmL每平方厘米的用量使之吸附 在玻璃纤维上，抽干密封保存。(3) 抗驴(或者马、羊)-IgG抗体的包被与干燥将抗驴(或者马、羊) -IgG抗体按照0.8~2mg/l的浓度喷涂到硝酸纤维素膜上，然后通风晾干。(4) 辅材(吸水纸)的处理用5~20g/l浓度的奶粉溶液浸泡上下端的吸 水纸，通风晾干。2、 反应体系的组装与切割(1) 将所述硝酸纤维素膜粘贴到用于支撑整个反应体系的PVC板条上， 同时将所述玻璃纤维与所述硝酸纤维素膜相连形成一个桥式结构。(2) 在靠近抗驴(或者马、羊)-IgG抗体端的PVC板条上粘贴吸水纸， 在PVC板条的另一端也粘贴吸水纸，形成联通的吸水桥式结构，保证毛细管虹 吸作用的形成。所述吸水纸是外购的，主要成分是纤维素，纤维素是天然大分 子有机物，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种三聚氰胺快速检测试剂盒，其特征是：在检测试剂盒的检测单元中包含用于支撑整个检测系统的塑料外壳，用于支撑反应体系的ＰＶＣ板条，用于提供层析系统的吸水纸，用于吸附反应物的硝酸纤维素膜和玻璃纤维，以及反应物；　所述反应物包括：抗三聚氰胺 －ＢＳＡ抗体，抗驴ＩｇＧ抗体、抗马ＩｇＧ抗体或抗羊ＩｇＧ抗体，抗三聚氰胺－ＢＳＡ抗体－染料复合物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周军，
申请(专利权)人：周军，
类型：发明
国别省市：32