汉黄芩苷在制备治疗和/或预防缺血再灌注损伤药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了汉黄芩苷在制备治疗和/或预防缺血再灌注损伤药物中的应用。本发明专利技术通过PC12细胞氧糖剥夺再灌注建立脑缺血再灌注体外模型，观察汉黄芩苷对细胞形态的影响，检测汉黄芩苷对细胞活力、凋亡率、乳酸脱氢酶释放、细胞内ROS水平的影响，检测细胞内谷胱甘肽、超氧化物歧化酶及丙二醛的含量变化，结果证明汉黄芩苷具有显著的抗OGD/R损伤作用，且效果优于尼莫地平，适用于制备治疗和/或预防缺血再灌注损伤药物。灌注损伤药物。灌注损伤药物。

【技术实现步骤摘要】
汉黄芩苷在制备治疗和/或预防缺血再灌注损伤药物中的应用


[0001]本专利技术属于医药
，涉及一种汉黄芩苷在制备治疗和/或预防缺血再灌注损伤药物中的应用。

技术介绍

[0002]缺血性脑卒中，是因脑血管闭塞、糖氧供应障碍导致的脑组织缺血缺氧坏死，进而出现相应的神经功能障碍，具有高患病率、高复发率、高致残率、高死亡率等特点，造成的躯体障碍后遗症及并发症严重影响患者的生存质量。目前，阿替普酶(Rt
‑
PA)是唯一经FDA批准的用于缺血性脑卒中治疗的药物，但其治疗时间窗狭窄，且在随后的复氧过程中，血流供应的恢复会进一步加重神经元的损伤，即脑缺血再灌注损伤，所以临床应用受到限制。因此，开发更有效的缺血性脑卒中治疗药物具有重要意义。
[0003]目前临床上大量使用的尼莫地平，见光易降解，且原料药难溶于水，而易溶于乙醇、丙酮等有机溶剂。临床上常使用其注射剂剂型，注射液中的乙醇对血管产生刺激性，引起静脉炎的发生；而用葡萄糖或者生理盐水稀释时，因其水不溶性，导致原料药析出，影响用药安全。
[0004]黄芩是一种重要的传统中药，其主要功效为清热燥湿、泻火解毒，已被广泛用于预防和治疗多种神经退行性疾病，如阿尔兹海默症、帕金森等。黄芩的主要活性成分之一——汉黄芩苷，是一种黄酮苷类化合物，已被证明具有抗氧化、抗炎、抑菌、抗凋亡等多种药理作用([1].Huang S,Fu Y,Xu B,et al.Wogonoside alleviates colitis by improving intestinal epithelial barrier function via the MLCK/pMLC2 pathway.Phytomedicine.2020；68:153179.[2].Jiang G,Chen D,Li W,et al.Effects of wogonoside on the inflammatory response and oxidative stress in mice with nonalcoholic fatty liver disease.Pharm Biol.2020；58(1):1177
‑
83.)，并参与多条代谢途径，临床上可用于治疗肺炎、肝炎、感染和肿瘤等疾病。

技术实现思路

[0005]本专利技术提供一种汉黄芩苷在制备治疗和/或预防缺血再灌注损伤药物中的应用。
[0006]本专利技术所述的缺血再灌注损伤为本领域通常知晓的缺血再灌注损伤，其引发因素包括但不限于创伤性休克、外科手术、器官移植、烧伤、冻伤和血栓等血液循环障碍时出现的缺血再灌注损伤。
[0007]具体地，本专利技术所述的缺血再灌注损伤包括但不限于肝缺血再灌注损伤、肾缺血再灌注损伤、脑缺血再灌注损伤和心肌缺血再灌注损伤等。
[0008]本专利技术所述的药物的剂型可以是口服剂的形式，例如片剂、胶囊、丸剂、粉剂、颗粒剂、悬浮剂、糖浆剂等；也可以是注射给药的剂型，例如注射液、粉针剂等，通过静脉内、腹膜内、皮下或肌肉内的途径。所有使用的剂型形式都是药学领域普通技术人员所熟知的。
[0009]本专利技术所述的药物可施用于会发生或已经发生缺血再灌注损伤的任何动物。这些动物包括人类和非人类的动物，例如宠物或牲畜等。
[0010]本专利技术所述的药物可以本领域已知的途径施用于受试者，包括但不限于口服、胃肠外、皮下、肌内、静脉内、腹腔内、肝内、心肌内、肾内、阴道、直肠、颊、舌下、鼻内、透皮方式等。
[0011]本专利技术所述的药物施用的剂量取决于接受者的年龄、健康和体重，治疗频率，给药途径等。
[0012]在本专利技术具体实施方式中，药物施用的剂量为12.5μM
‑
50μM。
[0013]本专利技术的所述的药物采用的药用载体，可以是本领域中常规使用的注射液载体，如等渗的NaCl溶液，等渗的葡萄糖溶液，或等渗的含有缓冲体系的溶液，如PBS溶液等。
[0014]本专利技术通过PC12细胞氧糖剥夺再灌注(Oxygen
‑
Glucose Deprivation and Reperfusion,OGD/R)建立脑缺血再灌注体外模型，观察汉黄芩苷对细胞形态的影响，检测汉黄芩苷对细胞活力、凋亡率、乳酸脱氢酶(LDH)释放、细胞内ROS水平的影响，检测细胞内谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的含量变化评价其药效。以尼莫地平为阳性药，结果证明汉黄芩苷具有显著的抗脑缺血再灌注损伤的作用，且相较于尼莫地平，其药效显著，原料来源广泛，安全性高，适用于制备治疗和/或预防缺血再灌注损伤药物。
附图说明
[0015]图1为汉黄芩苷结构式。
[0016]图2为汉黄芩苷和尼莫地平对PC12细胞活力的影响图。
[0017]图3为汉黄芩苷和尼莫地平对OGD/R处理的PC12细胞活力的影响图。
[0018]图4为汉黄芩苷和尼莫地平对OGD/R导致损伤的PC12细胞形态的影响图(放大倍数：400
×
)。
[0019]图5为流式细胞仪检测各组细胞凋亡结果图。
[0020]图6为荧光显微镜及酶标仪检测各组细胞的ROS水平结果图(放大倍数：200
×
)。
[0021]图7为汉黄芩苷和尼莫地平对LDH释放、MDA含量和GSH、SOD活性的影响图。
具体实施方式
[0022]下面通过实施例和附图对本专利技术作进一步详述。
[0023]实施例1
[0024]1.PC12细胞氧糖剥夺再灌注(Oxygen
‑
Glucose Deprivation and Reperfusion,OGD/R)模型的建立
[0025]氧糖剥夺再灌注(Oxygen
‑
Glucose Deprivation and Reperfusion,OGD/R)是一种模拟体内缺血再灌注损伤的体外模型。肾上腺嗜铬细胞瘤细胞PC12细胞株在RPMI
‑
1640培养基(10％胎牛血清，1％双抗)中培养，在OGD/R实验前36小时将传代不到6代的细胞以1
×
105‑
106个/mL的密度接种于细胞培养皿。当细胞几乎长满培养皿时，用PBS冲洗细胞3次，加入无葡萄糖和无FBS的RPMI
‑
1640培养基。然后，将细胞立即放入HF100三气培养箱，用5％CO2/95％N2混合气体预冲洗，形成缺氧室。用氧检测器监测O2浓度，并将其维持在0.1％。缺氧4小时后，将细胞放入常氧培养箱，换成正常培养液或者含有一定浓度药物的正常培养
基，继续孵育24小时。
[0026]2.分组与给药
[0027]将细胞分为4组：空白组(Control)，OGD/R组(Model)，汉黄芩苷给药组，尼莫地平给药组，每组3个样品。缺氧后，汉黄芩苷给药组和尼莫地平给药组换成含有相应浓度药物的正常培养基，空白组和OGD/R组换本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.汉黄芩苷在制备治疗和/或预防缺血再灌注损伤药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的缺血再灌注损伤为创伤性休克、外科手术、器官移植、烧伤、冻伤或血栓引起的血液循环障碍时出现的缺血再灌注损伤。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的缺血再灌注损伤为肝缺血再灌注损伤、肾缺血再灌注损伤、脑缺血再灌注损伤或心肌缺血再灌注损伤。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的药物的剂型为片剂、胶囊、丸剂、粉剂、颗粒剂、悬浮剂、糖浆剂、注射液或粉针剂。5.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪俊松，张琳，
申请(专利权)人：南京理工大学，
类型：发明
国别省市：