复合佐剂以及包含它的疫苗制剂制造技术

本发明专利技术涉及一种复合佐剂以及包含它的疫苗制剂。所述复合佐剂包含CpG寡脱氧核苷酸、QS

【技术实现步骤摘要】
复合佐剂以及包含它的疫苗制剂


[0001]本专利技术涉及疫苗领域。具体而言，本专利技术涉及一种可有效增强疫苗制剂的抗体反应和免疫反应的复合佐剂，以及包含该复合佐剂的疫苗制剂。

技术介绍

[0002]带状疱疹是由水痘
‑
带状疱疹病毒(Varicella
‑
Zoster Virus, VZV)引起的急性感染性皮肤病。由于该病毒具有亲神经性，感染后可长期潜伏于脊髓神经后根神经节的神经元内。当抵抗力低下或劳累、感染、感冒时，该病毒可再次生长繁殖，并沿神经纤维移至皮肤，使受侵犯的神经和皮肤产生强烈的炎症。
[0003]带状疱疹的临床表现为身体一侧的疱疹，典型地局限于一个皮节，常伴有神经根疼痛。患者出现显著的疼痛和不适，可能持续数周、数月甚至数年，降低生活质量。发病率随年龄增大而呈显著上升。
[0004]目前确定的VZV病毒表面糖蛋白有9种，分别是gB、gC、gE、gH、gI、gK、gL、gM和gN。其中gE糖蛋白是VZV表达量最高的糖蛋白，在病毒的复制和组装过程中起到主要作用，也介导病毒在细胞间的传播。鉴于VZV gE具有很强的免疫原性，能诱导机体产生针对VZV的免疫反应，它已成为VZV亚单位疫苗和DNA疫苗的主要候选抗原之一。
[0005]目前已知的是，单独的gE蛋白在动物模型中并不能够诱导强烈的细胞免疫反应，必须通过佐剂才能增强gE的免疫反应。
[0006]新冠病毒（亦称新型冠状病毒，或SARS
‑
CoV
‑
2）属于β属B亚群，是一种有包膜的单股正链RNA病毒。该病毒属还包含严重急性呼吸道综合征冠状病毒（SARS
‑
CoV）和中东呼吸综合征冠状病毒（MERS
‑
CoV），它们都是通过病毒颗粒表面的刺突（Spike 或 S）蛋白与宿主细胞表面受体结合而感染宿主。具体来说, SARS
‑
CoV
‑
2表面的S蛋白能通过其受体结合区(Receptor
‑ꢀ
binding domain，RBD)识别宿主细胞上的血管紧张素转化酶2 (Angiotensin
‑
converting enzyme
‑
2，ACE2)介导病毒入侵宿主细胞。SARS
‑
CoV
‑
2 S蛋白诱导的中和抗体能够显著阻断识别途径，降低病毒的侵染能力。这些研究充分说明了S蛋白中和抗体对于预防病毒入侵的重要作用，为基于B细胞体液免疫的疫苗设计提供了重要指导。与此同时，T细胞免疫则对清除被感染细胞和病毒至关重要。因为一旦少数病毒逃脱了中和抗体的围捕，被感染的宿主细胞将成为病毒复制乃至变异的温床，而此时抗原特异性的Tc细胞能够识别被侵染的宿主细胞，进一步清除病毒。研究发现，严重的COVID
‑
19病人体内出现了T细胞耗竭以及功能多样性降低的现象，这反映了T细胞免疫对于病情控制的重要性。
[0007]然而，目前常用的铝佐剂的免疫增强效果较弱，且主要产生体液免疫，无法满足包括带状疱疹疫苗、新冠疫苗在内的多种疫苗的开发需求。因此，人们期望获得可用于多种疫苗的新型复合佐剂，以增强其效果。

技术实现思路

[0008]鉴于以上情况，本专利技术的一个目的在于，提供一种可有效增强疫苗制剂的抗体反
应和免疫反应的复合佐剂。
[0009]在第一个方面，本专利技术涉及一种复合佐剂，所述复合佐剂包含CpG寡脱氧核苷酸、QS
‑
21和脂质体，其中CpG寡脱氧核苷酸是CpG7909。
[0010]在第二个方面，本专利技术涉及一种疫苗制剂，所述疫苗制剂包含上述的本专利技术的复合佐剂。
[0011]根据本专利技术，可提供可有效增强疫苗制剂的抗体反应和免疫反应的复合佐剂。特别地，本专利技术的复合佐剂可特异性地增强T细胞反应和中和抗体滴度。因而，本专利技术的复合佐剂可减少疫苗制剂所必需的抗原的量。
附图说明
[0012]图1显示本专利技术的一个实施方案的复合佐剂样品粒径检测结果(Z
‑
average： 113.5nm，PDI 0.196)。
[0013]图2显示本专利技术的另一个实施方案的复合佐剂样品粒径检测结果(Z
‑
average： 96.7nm，PDI 0.164)。
[0014]图3根据本专利技术的一个实施方案，由不同的重组新冠病毒疫苗制剂诱导小鼠产生的结合抗体反应。
[0015]图4根据本专利技术的一个实施方案，由不同的重组新冠病毒疫苗制剂诱导小鼠产生的假病毒中和抗体反应。
[0016]图5根据本专利技术的一个实施方案，由不同的重组新冠病毒疫苗制剂诱导小鼠产生的淋巴细胞中IFN
‑
γ、IL
‑
2、TNF
‑
α和IL
‑
4细胞因子分泌水平。
[0017]图6根据本专利技术的一个实施方案，由不同的重组新冠病毒疫苗制剂诱导BALB/c小鼠产生的CD4+ T和CD8+ T淋巴细胞亚群中IFN
‑
γ、IL
‑
2、TNF
‑
α和IL
‑
4阳性细胞百分比。
具体实施方式
[0018]除非另外定义，本文所用的所有技术和科学术语具有本领域技术人员通常理解的相同含义。在冲突的情况下，以包括定义在内的本文件为准。下面描述优选的方法和材料，但是与本文所述那些类似或等同的方法和材料可用于实施或测试本专利技术。本文公开的材料、方法和实例仅是说明性的，而非旨在限制。
[0019]对于本公开内容涉及的所有数值范围，应理解为公开了该范围内所有具体数值，以及该范围内任意两个数值限定的子范围。例如，对于1%
‑
10%，应理解为公开了1%、2%、3%、3.5%、4.5%、10%等具体数值，以及1%
‑
5%，2%
‑
6%，3.5%
‑
7.5%等子范围。
[0020]在一个方面，本专利技术提供一种复合佐剂，所述复合佐剂包含CpG寡脱氧核苷酸、QS
‑
21和脂质体。
[0021]CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)是人工合成的短单链DNA分子，包含了未甲基化的 胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸序列，可以模拟细菌DNA结合并激活哺乳动物包括人的Toll样受体9（TLR9），直接激活B细胞和单核细胞，间接激活NK细胞和T细胞等多种免疫效应细胞，增强其功能和细胞因子的分泌，诱导Th1型免疫应答。用于本专利技术中的CpG ODN是CpG7909，也称为CpG2006、ODN7909或ODN2006。CpG7909具有以下核苷酸序列：TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT (SEQ ID No.1)。
[0022]QS
‑
21是从南美皂树（Quillaja Saponaria）树皮中提取的一种活性成分，能够引起小鼠CD8+本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种复合佐剂，所述复合佐剂包含CpG寡脱氧核苷酸、QS
‑
21和脂质体，其中CpG寡脱氧核苷酸是CpG7909。2.根据权利要求1所述的复合佐剂，其中，相对于CpG寡脱氧核苷酸、QS
‑
21和脂质体的总重量，CpG寡脱氧核苷酸的含量是10
‑
30重量%。3.根据权利要求1所述的复合佐剂，其中，相对于CpG寡脱氧核苷酸、QS
‑
21和脂质体的总重量，QS
‑
21的含量是1
‑
5重量%。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的复合佐剂，其中，所述脂质体包含磷脂酰胆碱和胆固醇。5.根据权利要求4所述的复合佐剂，其中，相对于CpG寡...

【专利技术属性】
技术研发人员：鲁阳，张超，王紫琰，郭慧丽，李佳黛，张玲莉，惠满军，
申请(专利权)人：上海泽润生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：