用于惰性液相色谱系统和柱的系统适用性测试的技术技术方案

本公开涉及表征包含色谱柱的系统的方法。所述方法可包括将包含阳性对照和阴性对照的样品引入包含色谱柱的系统中，其中所述阳性对照是与所述系统相互作用的敏感探针，而所述阴性对照基本上不与所述系统相互作用；在使所述样品通过所述色谱柱后，检测所述阳性对照和所述阴性对照；并且通过将检测到的阳性对照与阴性对照的量进行比较来确定系统适用性。在一些实施方案中，确定系统适用性(例如，样品对所述系统的惰性)是通过确定检测到的阳性对照与阴性对照的比率来完成的。性对照的比率来完成的。性对照的比率来完成的。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于惰性液相色谱系统和柱的系统适用性测试的技术
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本专利申请要求2020年9月16日提交的并且名称为“用于惰性液相色谱系统和柱的系统适用性测试的技术(Techniques for System Suitability Testing of Inert LC Systems and Columns)”的美国临时申请63/079,091的优先权和权益。本专利申请还要求于2020年9月16日提交的并且名称为“系统队形的评估(Evaluation of System Inertness)”的美国临时申请63/079,160的优先权和权益。这两个申请的内容全文以引用方式并入本文。


[0003]本公开涉及用于系统适用性测试的技术。更具体地，本技术涉及用于评估系统(诸如惰性液相色谱系统)是否适当地运行的技术。

技术介绍

[0004]液相色谱(LC)是一种分析分离技术，其能够基于混合物的化合物与固定相之间的差异相互作用(定义为主要相互作用)来分离化学物质的混合物，该主要相互作用是混合物、设计的固定相与来自具体选择的流动相/环境条件的调节之间的预期相互作用。这些相互作用取决于许多受控变量，例如流动相组成、温度和流速。因为给定分离的分析品质因数取决于大量变量，这些变量直接影响主要化学相互作用的范围和程度，所以小心地通过仔细制备流动相、适当恒温控制设备和使用可重复制造的色谱柱，在一致的设定点操作。

技术实现思路

[0005]一般而言，本专利技术技术涉及表征系统(诸加压流系统(例如，液相色谱系统))的方法。在实施方案中，该技术的方法涉及确定该系统的适用性。即，在一些实施方案中，该方法涉及确认系统对特定应用的适用性，例如对金属敏感分析物的色谱分离。液相色谱技术的许多应用以测量已知与暴露的金属表面相互作用的化合物为目标。作为这种相互作用的结果，已知许多化合物表现出较差的色谱(保留、峰形)、回收率(峰面积)或相互作用如此强烈使得这些化合物不能被完全测量。此外，减弱这些相互作用的现有方法可随使用时间推移而具有不同的效果或变化的性能。本专利技术技术允许分析人员能够确认系统对此类应用的适用性，从而避免将资源(即，时间、费用)分配给注定产生较差质量结果的实验。
[0006]在一个方面，本专利技术技术涉及表征包含色谱柱的系统的方法。根据该方面的方法包括将包含阳性对照和阴性对照的样品引入到包含色谱柱的系统中，其中阳性对照是与系统相互作用的敏感探针，而阴性对照基本上不与系统相互作用。该方法还包括(在使样品通过色谱柱之后)检测阳性对照和阴性对照的量；以及通过将检测到的阳性对照的量与检测到的阴性对照的量进行比较来确定系统适用性。
[0007]该技术的上述方面的实施方案可包括以下特征中的一者或多者。在一些实施方案中，通过将检测到的阳性对照与阴性对照的量进行比较来确定系统适用性的步骤包括确定
检测到的阳性对照与阴性对照的比率。在一些实施方案中，系统的惰性通过检测到的阳性对照的量来确定。在一些实施方案中，通过将检测到的阳性对照与阴性对照的量进行比较来确定系统适用性的步骤指示沿系统的流动路径沉积的惰性涂层的完整性。在一些实施方案中，阳性对照和阴性对照在结构上类似。在某些实施方案中，阳性对照包含金属敏感或金属螯合分子。在一些实施方案中，通过将检测到的阳性对照与阴性对照的量进行比较来确定系统适用性的步骤包括利用液相色谱
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光学、液相色谱
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质谱、或液相色谱
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光学
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质谱的配置进行检测，其中光学是UV/Vis吸收或荧光检测器。在一些实施方案中，检测阳性对照和阴性对照包括分流样品流。在一些实施方案中，该方法还包括采用多于一种色谱方法以通过引入具有多种化合物的样品来评估该系统，其中该多种化合物包括阴性对照、阳性对照和经拆分的中性物质的混合物。采用多于一种色谱方法来评估该系统可同时完成。在一些实施方案中，阳性对照和阴性对照的峰面积和峰高度具有小于3.0％的标准偏差。在某些实施方案中，阴性对照和阳性对照的峰形具有小于3.0的10％的不对称性。在一些实施方案中，该方法的特征可在于在系统的先前确定的维护步骤(例如，在使用的柱或注射器的先前确定的更换步骤)处确定系统适用性。在一些实施方案中，在先前确定的使用次数或先前确定的时间量之后排定维护步骤。在一些实施方案中，该系统包括液相色谱柱、注射器和检测器。在某些实施方案中，检测阳性对照和阴性对照包括检测与阳性对照相关的值(即，第一值)和与阴性对照相关的值(即，第二值)。与阳性对照相关的值(第一值)可以是峰面积、峰高度、峰宽或峰对称性中的至少一者的值。在一些实施方案中，与阳性对照相关的值是峰面积值并且峰面积再现性的相对标准偏差小于3％。在某些实施方案中，与阳性对照相关的值是峰高值，并且峰高再现性的相对标准偏差小于2.5％。在一些实施方案中，与阳性对照相关的值包括峰形值，并且10％的峰形值对称性小于3.0。
[0008]在另一方面，本专利技术技术涉及表征包含色谱柱的系统的方法。该技术的这个方面的方法包括：将样品引入到流体系统中，该流体系统包括设置在该流体系统的内部的流动路径，该流动路径包括表面，其中该表面对于该样品中的至少一种分析物基本上是惰性的，其中该样品包含阴性对照和阳性对照；并且通过检测阳性对照与阴性对照的比率确定该系统的惰性。
[0009]该技术的上述方面的实施方案可包括以下特征中的一者或多者。在一些实施方案中，除了阳性对照和阴性对照之外，该样品还包含多种化合物。多种化合物中的至少一种是金属不敏感化合物，并且测量色谱柱的性能属性。在一些实施方案中，阳性对照和阴性对照在结构上类似。在某些实施方案中，流动路径包括在样本注射器和检测器之间成一直线的色谱柱。
[0010]本公开的上述方面和特征提供了优于现有技术的多种优点。例如，本公开通过评估惰性表面的适当运行来表征惰性LC系统，特别是当分析已知表现出高度金属相互作用的化合物时。该信息可以防止时间和费用的资源浪费，因为系统对于特定应用的适用性的知识将消除或大大减少注定要给出不良质量结果的实验。
附图说明
[0011]通过以下结合附图所作的详细描述，将更充分地理解本技术，在附图中：
[0012]图1是根据本公开的例示性实施方案的包括色谱柱和各种其他部件的色谱系统的
示意图。
[0013]图2是示出根据本公开的例示性实施方案的评估系统适用性的方法的流程图。
[0014]图3是根据本公开的一个例示性实施方案的代表性色谱示例，其展示出利用金属敏感化合物和惰性类似物对惰性表面的色谱测试。
[0015]图4A显示了利用ATP(阳性对照)和腺苷(阴性对照)的色谱测试，其使用具有被涂覆的流动路径的部件的系统。
[0016]图4B显示了利用ATP和腺苷的色谱测试，其使用具有未涂覆的流动路径的部件的系统。
具体实施方式
[0017]一般来讲，本公开涉及用于评估惰性表面的适当运行的惰性LC系统表征方本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种表征包含色谱柱的系统的方法，所述方法包括：将包含阳性对照和阴性对照的样品引入包含色谱柱的系统中，其中所述阳性对照是与所述系统相互作用的敏感探针，而所述阴性对照基本上不与所述系统相互作用；在使所述样品通过所述色谱柱后，检测所述阳性对照和所述阴性对照；以及通过将检测到的阳性对照与阴性对照的量进行比较来确定系统适用性。2.根据权利要求1所述的方法，其中通过将检测到的阳性对照与阴性对照的量进行比较来确定系统适用性包括确定检测到的阳性对照与阴性对照的比率。3.根据权利要求1所述的方法，其中通过将检测到的阳性对照与阴性对照的量进行比较来确定系统适用性包括确定所述系统对所述阳性对照的惰性。4.根据权利要求1所述的方法，其中通过将检测到的阳性对照与阴性对照的量进行比较来确定系统适用性指示沿所述系统的流动路径沉积的惰性涂层的完整性。5.根据权利要求1所述的方法，其中所述阳性对照和所述阴性对照在结构上是类似的。6.根据权利要求1所述的方法，其中所述阳性对照包括金属敏感或金属螯合分子。7.根据权利要求1所述的方法，其中检测所述阳性对照和所述阴性对照包括利用液相色谱
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光学、液相色谱
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质谱或液相色谱
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光学
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质谱的配置来进行检测，其中光学是UV/Vis吸光度或荧光检测器。8.根据权利要求7所述的方法，其中检测所述阳性对照和所述阴性对照包括分流所述样品流。9.根据权利要求1所述的方法，还包括采用多于一种色谱方法以通过引入具有多种化合物的样品来评估所述系统，其中所述多种化合物包括所述阴性对照、所述阳性对照、和经拆分的中性物质的混合物。10.根据权利要求9所述的方法，其中采用多于一种色谱方法来评估所述系统是同时完成的。11.根据权利要求1的方法，其中所述阳性对照和所述阴性对照的峰面积和峰高具有小于3.0％的相对标准偏差。12....

【专利技术属性】
技术研发人员：A，
申请(专利权)人：沃特世科技公司，
类型：发明
国别省市：