用于制备肿瘤早期诊断的ONOO-和/或Na2S2荧光探针试剂的应用制造技术

本申请提供一种用于制备肿瘤早期诊断的ONOO

【技术实现步骤摘要】
用于制备肿瘤早期诊断的ONOO
‑
和/或Na2S2荧光探针试剂的应用


[0001]本申请涉及分析化学领域，尤其涉及一种用于肿瘤早期诊断的多信号荧光探针及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]活性氧(ROS)和活性硫(RNS)在多种生理过程中有着重要的作用。它们还涉及各种病理生理过程，包括癌症、衰老、信号转导、细胞氧化还原稳态和防御病原体入侵。过氧亚硝酸盐(ONOO
‑
)是一种重要的活性氮，在许多生理和病理过程中发挥重要作用。有证据表明，过量的ONOO
‑
与各种人类疾病有关，如高血压、胃癌、神经退行性疾病和炎症性疾病；此外，二硫化钠(Na2S2)在调节细胞内氧化还原状态和基本信号传导过程中发挥重要作用。因此，开发高效的检测方法/技术用于同时区分检测ONOO
‑
和Na2S2这两种生物分子对疾病的早期诊断具有非常重要的意义。
[0003]基于小分子荧光探针的荧光成像技术由于其实时、灵敏、无创等特点，已成为一种有效的可视化生物标本中生物分子时空分布的方法。目前已经开发了许多小分子荧光探针用于检测活性氧亚硝酸盐(ONOO
‑
)，但也发展了一些了单/双荧光通道荧光探针用于检测ONOO
‑
/Na2S2。但已报道的荧光探针还无法实现同时区分检测ONOO
‑
和Na2S2这两种生物分子，特别是细胞内源性的ONOO
‑
和Na2S2双通道比率荧光成像分析检测。

技术实现思路
/>[0004]本申请的目的在于提供一种用于肿瘤早期诊断的多信号荧光探针及其制备方法和应用，以解决上述问题。
[0005]为实现以上目的，本申请采用以下技术方案：
[0006]一种用于制备肿瘤早期诊断的ONOO
‑
和/或Na2S2信号荧光探针试剂的应用，其特征在于，其包括荧光探针4
‑
氯
‑
11
‑
乙基吡喃并[2,3
‑
b]吩噻嗪
‑
2(11H)
‑
酮的结构通式为：
[0007]所述荧光探针在制备ONOO
‑
和/或Na2S2生物分子检测试剂的应用。
[0008]优选的，在制备通过将2
‑
甲氧基吩噻嗪与碘乙烷加入二氯甲烷和乙腈混合溶液中，进行第一反应，然后进行第一后处理得到10
‑
乙基
‑2‑
甲氧基
‑
10H
‑
吩噻嗪；
[0009]在惰性气体保护条件下，向10
‑
乙基
‑2‑
甲氧基
‑
10H
‑
吩噻嗪中加入三溴化硼，冰浴条件下进行第二反应，然后进行第二后处理得到10
‑
乙基
‑
10H
‑
吩噻嗪
‑2‑
醇；
[0010]在将10
‑
乙基
‑
10H
‑
吩噻嗪
‑2‑
醇、丙二酸、氯化锌、三氯氧磷混合，进行第三反应，然后进行第三后处理得到所述用于肿瘤早期诊断的ONOO
‑
和/或Na2S2信号荧光探针的应用。
[0011]优选的，在第一反应的温度为65
‑
75℃下，在时间为8
‑
12h下识别环境或生物生物样品中ONOO
‑
和/或Na2S2生物分子。
[0012]优选的，在第一后处理包括：将反应体系通过柱层析分离得到所述10
‑
乙基
‑2‑
甲氧基
‑
10H
‑
吩噻嗪下识别环境或生物生物样品中ONOO
‑
和/或Na2S2生物分子。
[0013]优选的，在第二反应在避光和搅拌条件下进行4
‑
6h下识别环境或生物生物样品中ONOO
‑
和/或Na2S2生物分子。
[0014]优选的，在第二后处理包括：
[0015]将反应得到的红色溶液滴入冰水中，并调节体系pH至6
‑
7；然后用二氯甲烷进行萃取，有机层去除溶剂，得到所述10
‑
乙基
‑
10H
‑
吩噻嗪
‑2‑
醇下识别环境或生物生物样品中ONOO
‑
和/或Na2S2生物分子。
[0016]优选的，在第三反应在80
‑
90℃条件下回流搅拌反应24
‑
36h下识别环境或生物生物样品中ONOO
‑
和/或Na2S2生物分子。
[0017]优选的，在第三后处理包括：
[0018]将反应得到的褐色粘稠溶液滴入冰水中，并调节体系pH至6
‑
7；然后用二氯甲烷进行萃取，有机层去除溶剂，然后柱层析得到所述用于肿瘤早期诊断的ONOO
‑
和/或Na2S2信号荧光探针的应用。
[0019]优选的，在使用20％的氢氧化钠水溶液调节pH下识别环境或生物生物样品中ONOO
‑
和/或Na2S2生物分子。
[0020]与现有技术相比，本申请的有益效果包括：
[0021]本申请提供的用于肿瘤早期诊断的多信号荧光探针，探针本身在410nm激发波长发射610nm的红光，与ONOO
‑
反应后在380nm激发波长下发射492nm的绿光，与Na2S2反应后在410nm激发波长下发射548nm的黄光。本身发射红色荧光，能在同一检测条件下与ONOO
‑
和Na2S2发生不同的化学反应，生成不同的荧光物质，从而在特定激发波长下发射绿、黄两种颜色的荧光，达到同时比率区分检测ONOO
‑
和Na2S2的目的；在实际使用时，可以同时检测ONOO
‑
和Na2S2，也能单独检测ONOO
‑
或Na2S2，进而可以广泛用于分析检测、医学早期诊断等领域。
附图说明
[0022]为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本申请的某些实施例，因此不应被看作是对本申请范围的限定。
[0023]图1为本申请实施例1得到的荧光探针的核磁共振氢谱图。
[0024]图2为本申请实施例1得到的荧光探针检测过氧亚硝酸盐和二硫化钠的荧光光谱图。
具体实施方式
[0025]如本文所用之术语：
[0026]“由
……
制备”与“包含”同义。本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于制备肿瘤早期诊断的ONOO
‑
和/或Na2S2信号荧光探针试剂的应用，其特征在于，其包括荧光探针4
‑
氯
‑
11
‑
乙基吡喃并[2,3
‑
b]吩噻嗪
‑
2(11H)
‑
酮的结构通式为：所述荧光探针在制备ONOO
‑
和/或Na2S2生物分子检测试剂的应用。2.根据权利要求1所述的一种用于制备肿瘤早期诊断的ONOO
‑
和/或Na2S2信号荧光探针试剂的应用，其特征在于，在制备通过将2
‑
甲氧基吩噻嗪与碘乙烷加入二氯甲烷和乙腈混合溶液中，进行第一反应，然后进行第一后处理得到10
‑
乙基
‑2‑
甲氧基
‑
10H
‑
吩噻嗪；在惰性气体保护条件下，向10
‑
乙基
‑2‑
甲氧基
‑
10H
‑
吩噻嗪中加入三溴化硼，冰浴条件下进行第二反应，然后进行第二后处理得到10
‑
乙基
‑
10H
‑
吩噻嗪
‑2‑
醇；在将10
‑
乙基
‑
10H
‑
吩噻嗪
‑2‑
醇、丙二酸、氯化锌、三氯氧磷混合，进行第三反应，然后进行第三后处理得到所述用于肿瘤早期诊断的ONOO
‑
和/或Na2S2信号荧光探针的应用。3.根据权利要求2所述的一种用于制备肿瘤早期诊断的ONOO
‑
和/或Na2S2信号荧光探针试剂的应用，其特征在于，在第一反应的温度为65
‑
75℃下，在时间为8
‑
12h下识别环境或生物生物样品中ONOO
‑
和/或Na2S2生物分子。4.根据权利要求2所述的一种用于制备肿瘤早期诊断的ONOO
‑
和/或Na2S2信号荧光探针试剂的应用，其特征在于，在第一后处理包括：将反应体系通过柱层析分离得到所...

【专利技术属性】
技术研发人员：周慧俊，张夏鸣，陈攀，刘振洋，尹鹏，李婷，
申请(专利权)人：湖南师范大学，
类型：发明
国别省市：