一种固相合成地洛瑞林的方法技术

本发明专利技术属于多肽药物化学合成领域，尤其涉及一种固相合成地洛瑞林的方法。该方法包括以下步骤：1）Fmoc

【技术实现步骤摘要】
一种固相合成地洛瑞林的方法


[0001]本专利技术属于多肽药物化学合成领域，尤其涉及一种固相合成地洛瑞林的方法。
[0002]背景资料地洛瑞林，英文名为Deslorein，其他名称（包括国外药典收载的名称）有醋酸地洛瑞林、醋酸德舍瑞林、乙酸地洛瑞林、Deslorelin Acetate，结构简式为pGlu
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His
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Trp
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Ser
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Tyr
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D
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Trp
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Leu
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Arg
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Pro
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NHEt，是人工合成九肽。
[0003]地洛瑞林是肽促性腺激素释放激素（GnRH）的激动剂，GnRH与促性腺激素细胞上的一类受体结合，GnRH与促性腺激素细胞上的一类受体结合。这些细胞长期暴露于GnRH会通过受体改变，导致对激素的反应性丧失，GnRH应答下调的结果是抑制循环中的促性腺激素和性激素水平，这会抑制生殖功能和其他受性激素水平影响的过程。应用于人类上，可治疗中枢性早熟症，可治疗前列腺癌和乳腺癌以及抑制睾酮或雌二醇水平有益的其他疾病和条件等；应用于动物上，其缓释制剂可预防生殖功能，从而达到宠物避孕作用。
[0004]目前地洛瑞林的合成方法有两种，片段缩合法和逐个偶联法。片段缩合法中，片段与片段之间空间位阻大，合成困难，反应时间长。各片段虽然可以同时进行合成，但需增加反应装置及配备相应人员，在片段转移和合成的过程中也会有所损耗，使最终收率降低。
[0005]目前地洛瑞林化学合成的主要路线有液相合成法、固相合成法、液固结合合成法。液相法合成过程中需要对中间体进行提纯，时间长，工作量大；液相法反应结束后，剩余原料、产物和副产物都在反应混合物中，还需要分离纯化，合成难以实现自动化。
[0006]固相合成有两种方法，使用Boc或者Fmoc合成方法。Boc方法合成过程中，需要反复使用TFA脱Boc，而且在最后一步从树脂上切割下来需要使用HF（发烟的腐蚀性液体，有剧烈刺激性气味），在切割过程中容易产生副反应，并且使用的危险系数大，因此使用受到实验条件限制大，所以使用也逐渐减少。Fmoc方法反应条件温和，在一般的实验条件下就可以进行合成。

技术实现思路

[0007]本专利技术目的为基于固相合成法的逐个偶联法的Fmoc合成法合成地洛瑞林，步骤清晰，操作简便，反应时间短，合成过程中可通过快速的抽滤洗涤来完成中间体的纯化，可避免中间体分离纯化时大量的损失，使终产物得到高产率和高纯度，后处理简便，便于生产管理和质量控制。
[0008]为了实现上述专利技术目的，本申请采用了以下的技术方案：一种固相合成地洛瑞林的方法，包括以下步骤：1）将CTC树脂与Fmoc
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Pro
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OH用缩合剂DIEA在DMF溶液中偶联，经DMF洗涤后加入甲醇封闭液封闭，抽干，DMF洗涤，减压干燥至恒重，制得Fmoc
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Pro
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CTC树脂；2）在步骤1）制得的Fmoc
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Pro
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CTC树脂中加入脱帽试剂20%哌啶/DMF溶液脱保护，采用缩合剂HOBT和脱水偶联液DIC，在DMF溶液中偶联Fmoc
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Arg(Pbf)
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OH，经茚三酮检测显阴性后，抽滤洗涤，干燥至恒重，得到Fmoc
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Arg(Pbf)
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Pro
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CTC树脂。按照该方法依次偶联
Fmoc
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Leu
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OH、Fmoc
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D
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Trp(Boc)
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OH、Fmoc
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Tyr(tBu)
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OH、Fmoc
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Ser(tBu)
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OH、Fmoc
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Trp(Boc)
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OH、Fmoc
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His(Trt)
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OH、L
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Pyr(pGlu)，制得pGlu
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His(Trt)
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Trp(Boc)
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Ser(tBu)
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Tyr(tBu)
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D
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Trp(Boc)
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Leu
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Arg(Pbf)
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Pro
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CTC树脂；3）配制切割试剂，按树脂10倍质量体积比加入步骤2）制得的树脂进行裂解，反应结束后过滤洗涤除去树脂，经乙醚沉淀洗涤干燥后得到pGlu
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His(Trt)
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Trp(Boc)
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Ser(tBu)
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Tyr(tBu)
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D
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Trp(Boc)
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Leu
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Arg(Pbf)
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Pro
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OH全保护肽链；4）以DMF为溶剂，加入步骤3）得到的肽链、偶化剂PyBoP、脱水偶联液DIC和乙胺盐酸盐，反应结束后，沉淀洗涤干燥，得到乙胺化后的pGlu
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His(Trt)
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Trp(Boc)
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Ser(tBu)
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Tyr(tBu)
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D
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Trp(Boc)
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Leu
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Arg(Pbf)
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Pro
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NHCH2CH3全保护肽链；5）将步骤4）所得的乙胺化后的全保护肽链加入脱保护液，进行催化氢化脱除保护基，反应结束后，沉淀洗涤干燥，得到地洛瑞林粗肽pGlu
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His
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Trp
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Ser
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Tyr
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D
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Trp
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Leu
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Arg
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Pro
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NHCH2CH3。
[0009]作为优选，所述步骤1）中CTC树脂与 Fmoc
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Pro
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OH的物料摩尔比M/M为1：（2.0
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3.0），优选为1：2.5。
[0010]作为优选，所述步骤1）中CTC树脂的取代度为1.5mmol/g。
[0011]作为优选，所述步骤1）的甲醇封闭液中各组分的体积比为DCM：甲醇：DIEA=80：15：5。
[0012]作为优选，所述步骤3）的切割试剂采用20%TFE/DCM的混合溶液。
[0013]作为优选，所述步骤3）的裂解反应条件为在室温下反应120min。
[0014]作为优选，所述步骤4）的偶化剂PyBoP、脱水偶联液D本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种固相合成地洛瑞林的方法，其特征在于，包括以下步骤：将CTC树脂与Fmoc
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Pro
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OH用缩合剂DIEA在DMF溶液中偶联，经DMF洗涤后加入甲醇封闭液封闭，抽干，DMF洗涤，减压干燥至恒重，制得Fmoc
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Pro
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CTC树脂；在步骤1）制得的Fmoc
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Pro
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CTC树脂中加入脱帽试剂20%哌啶/DMF溶液脱保护，采用缩合剂HOBT和脱水偶联液DIC，在DMF溶液中依次偶联以下氨基酸Fmoc
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Arg(Pbf)
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OH、Fmoc
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Leu
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OH、Fmoc
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D
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Trp(Boc)
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OH、Fmoc
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Tyr(tBu)
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OH、Fmoc
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Ser(tBu)
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OH、Fmoc
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Trp(Boc)
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OH、Fmoc
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His(Trt)
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OH、L
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Pyr(pGlu)，经茚三酮检测显阴性后，抽滤洗涤，干燥至恒重，制得pGlu
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His(Trt)
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Trp(Boc)
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Ser(tBu)
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Tyr(tBu)
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D
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Trp(Boc)
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Leu
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Arg(Pbf)
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Pro
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CTC树脂；配制切割试剂，按树脂10倍的质量体积比加入步骤2）制得的树脂进行裂解，反应结束后过滤洗涤除去树脂，经乙醚沉淀洗涤干燥后得到pGlu
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His(Trt)
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Trp(Boc)
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Ser(tBu)
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Tyr(tBu)
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D
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Trp(Boc)
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Leu
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Arg(Pbf)
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Pro
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OH全保护肽链...

【专利技术属性】
技术研发人员：许碧莲，费明明，孙燕妮，李伟，卢金熔，吴春山，岑桂英，钱星宇，
申请(专利权)人：宁波舒生生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：