一种水产品中N-亚硝胺类化合物的提取方法及检测方法技术

本发明专利技术属于物质分析检测技术领域，提供一种水产品中N

【技术实现步骤摘要】
一种水产品中N
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亚硝胺类化合物的提取方法及检测方法


[0001]本专利技术涉及物质分析检测
，尤其涉及一种水产品中N
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亚硝胺类化合物的提取方法及检测方法。

技术介绍

[0002]N
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亚硝胺类化合物是一类含有N
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N＝O结构的化合物。研究发现：迄今已知的300余种N
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亚硝胺化合物中，有高达90％以上的N
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亚硝胺化合物具有毒性和致癌性，并能通过母婴传播引发子代肿瘤，同时还具有强致畸和致突变作用。食品中常见的N
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亚硝胺化合物包括N
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二甲基亚硝胺(NDMA)，N
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甲基乙基亚硝胺(NMEA)，N
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亚硝基吡咯烷(NPyr)，N
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亚硝基哌啶(NPIP)，N
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二丙基亚硝胺(NDPA)，N
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二乙基亚硝胺(NDEA)，N
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二丁基亚硝胺(NDBA)和N
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亚硝基吗啉(NMOR)等，其中毒性最强的是NDMA和NDEA。国际癌症研究机构将NDMA和NDEA评定为2A级致癌物，将NPyr、NMEA、NPIP和NDBA规定为B类一般致癌性物质。
[0003]在近年来的监督抽检中，NDMA含量超标的产品主要为水产制品，包括鱿鱼类、鳕鱼类、狮子鱼等鱼类加工食品，因此开展水产品中NDMA和NDEA的检测、监测非常重要。
[0004]亚硝胺类化合物具有相对分子量小、易挥发等特征，在食品中的含量一般在μg/kg级别，响应较低，检测难度大。且烤鱼片样品经过腌制、热加工，基质通常较为复杂，易有其他杂质干扰测定准确度，因此对前处理、仪器分析技术的要求比较高。我国GB5009.26
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2016《食品安全国家标准食品中N
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亚硝胺类化合物的测定》公开了使用水蒸汽蒸馏法来分离提取N
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亚硝胺类化合物，再采用大体积二氯甲烷进行分次液液萃取以萃取和净化N
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亚硝胺类化合物。然而，上述前处理方法仍存在不少缺点，如取样量较大，需200g试样；传统的液液萃取方法需大量有机试剂分多次进行萃取和旋转蒸发浓缩，有机试剂消耗大，前处理过程长，处理效率低，特别是空白控制困难；对环境污染大，对实验操作人员防护要求高等。
[0005]尤其是对于油脂含量丰富的水产品，简单的有机溶剂提取不能有效除去干扰物质及富集待测物，难以满足检测需求，往往需要称取大量样品；先进行蒸馏提取或碱液处理后再对提取液或上清液进行固相萃取、基质固相分散微萃取或固相微萃取等步骤除杂，最后通过旋转蒸发或氮吹以达到浓缩富集的目的。根据相关文献调研和预实验，当称样量较大时，由于水产品本身含有的油脂和加工过程加入的食用油，碱液处理后的样品依然含有一定量的油脂和其他干扰物质，需经多步除杂和浓缩，在耗费人力物力的同时容易导致待测物损失，导致检测结果不准确。

技术实现思路

[0006]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种水产品中N
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亚硝胺类化合物的提取方法及检测方法。本专利技术提供的提取方法操作简单，待测物损失少，进行检测时，检测结果准确。
[0007]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0008]本专利技术提供了一种水产品中N
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亚硝胺类化合物的提取方法，包括以下步骤：
[0009]将待测水产品、N
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亚硝胺类化合物混合内标物、氯化钠、氢氧化钡和水混合，得到
原料液；
[0010]将所述原料液进行水蒸气蒸馏，得到蒸馏液；
[0011]将所述蒸馏液过酸改性椰壳活性炭柱，并依次进行水淋洗、正己烷淋洗和二氯甲烷洗脱，得到二氯甲烷洗脱液；
[0012]将所述二氯甲烷洗脱液依次进行浓缩和复溶，得到上机样品；
[0013]所述N
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亚硝胺类化合物包括N
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二甲基亚硝胺和N
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二乙基亚硝胺。
[0014]优选地，所述N
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亚硝胺类化合物混合内标物包括N
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二甲基亚硝胺
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d6和N
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二乙基亚硝胺
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d4。
[0015]优选地，以待测水产品的质量为基准，所述N
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二甲基亚硝胺
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d6和N
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二乙基亚硝胺
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d4的添加量分别为2.0～10.0ng/g。
[0016]优选地，所述待测水产品、N
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亚硝胺类化合物混合内标物、氯化钠、氢氧化钡和水的用量比为5～20g：20～100ng：10～20g：0.5～2.0g：30～50mL。
[0017]优选地，所述水蒸气蒸馏的过程中，冷却水的温度≤15℃。
[0018]优选地，所述蒸馏液过酸改性椰壳活性炭柱前，还包括将所述酸改性椰壳活性炭柱进行活化，所述活化包括依次进行二氯甲烷活化、甲醇活化和水活化。
[0019]优选地，所述二氯甲烷洗脱后，还包括对所得洗脱液进行脱水；所述脱水的方式为干燥剂脱水，所述干燥剂脱水的干燥剂为无水硫酸钠。
[0020]优选地，所述浓缩的方式为氮吹浓缩；所述复溶的试剂包括甲醇。
[0021]优选地，所述氮吹浓缩的温度≤25℃。
[0022]本专利技术还提供了一种水产品中N
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亚硝胺类化合物的检测方法，包括以下步骤：
[0023]按照上述技术方案所述的提取方法对待测水产品中的N
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亚硝胺类化合物进行提取，得到上机样品；
[0024]将所述上机样品进行气相色谱
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质谱联用检测，得到待测水产品中N
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亚硝胺类化合物的色谱信息；
[0025]将所述待测水产品中N
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亚硝胺类化合物的色谱信息代入预置的标准曲线中，得到待测水产品中N
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亚硝胺类化合物的含量；
[0026]所述N
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亚硝胺类化合物包括N
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二甲基亚硝胺和N
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二乙基亚硝胺；
[0027]所述气相色谱
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质谱联用检测包括气相色谱检测和质谱检测；
[0028]所述气相色谱检测的参数包括：
[0029]色谱柱为强极性石英毛细管柱；
[0030]进样口温度为230℃；
[0031]载气为氦气，流速为1mL/min；
[0032]进样方式为不分流进样；
[0033]进样量为1μL；
[0034]升温程序为初始温度40℃，保持3min，以8℃/min升至170℃后，以20～30℃/min升温至230℃，保持3min；
[0035]所述质谱检测的参数包括：
[0036]色谱本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种水产品中N
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亚硝胺类化合物的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：将待测水产品、N
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亚硝胺类化合物混合内标物、氯化钠、氢氧化钡和水混合，得到原料液；将所述原料液进行水蒸气蒸馏，得到蒸馏液；将所述蒸馏液过酸改性椰壳活性炭柱，并依次进行水淋洗、正己烷淋洗和二氯甲烷洗脱，得到二氯甲烷洗脱液；将所述二氯甲烷洗脱液依次进行浓缩和复溶，得到上机样品；所述N
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亚硝胺类化合物包括N
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二甲基亚硝胺和N
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二乙基亚硝胺。2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述N
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亚硝胺类化合物混合内标物包括N
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二甲基亚硝胺
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d6和N
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二乙基亚硝胺
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d4。3.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，以待测水产品的质量为基准，所述N
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二甲基亚硝胺
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d6和N
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二乙基亚硝胺
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d4的添加量分别为2.0～10.0ng/g。4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述待测水产品、N
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亚硝胺类化合物混合内标物、氯化钠、氢氧化钡和水的用量比为5～20g：20～100ng：10～20g：0.5～2.0g：30～50mL。5.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述水蒸气蒸馏的过程中，冷却水的温度≤15℃。6.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述蒸馏液过酸改性椰壳活性炭柱前，还包括将所述酸改性椰壳活性炭柱进行活化，所述活化包括依次进行二氯甲烷活化、甲醇活化和水活化。7.根据权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴平谷，陈婧，王立媛，张晶，冯靓，王军淋，张念华，
申请(专利权)人：浙江省疾病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：