一种蟾酥提取物无胆固醇脂质体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及中医药制剂技术领域，具体公开了一种蟾酥提取物无胆固醇脂质体及其制备方法和应用。脂质体不含胆固醇，包括以下组分：磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺

【技术实现步骤摘要】
一种蟾酥提取物无胆固醇脂质体及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及中医药制剂
，尤其涉及一种蟾酥提取物脂质体及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]目前蟾酥已被研制成多种剂型应用于临床，主要包括蟾酥注射液、麝香保心丸、蟾麝救心丸等制剂。但蟾酥有效成分本身存在较大的毒副作用，如易导致心跳加速、抽搐、恶心呕吐等不良反应，在滴注的过程中容易出现疼痛、过敏反应等，因此在使用过程中受到多种因素的限制。近年来，为了减少其在使用过程中出现的毒副作用和不良反应，使其更好的应用于临床，研制了纳米粒、脂质体、自微乳、凝胶剂等多种新型制剂。
[0003]其中，脂质体是由一层或多层脂质体双分子膜包封而成的超微型球状药物载体制剂，其结构类似于生物膜，可包封水溶性和脂溶性药物。脂质体进入人体后，能增加药物在靶区的聚集，并能延长其在血液中的半衰期。作为靶向给药系统中第4代给药体系，脂质体具有无可比拟的优越性：一方面可以靶向性延缓释放药物，提高药效，降低体内消除速度；另一方面可以降低药物体内毒性，减轻变态反应和免疫反应。脂质体一般是由磷脂和胆固醇构成，其中胆固醇可提高脂质体双分子膜的力学稳定性，调节脂质体的流动性和通透性，并保持较高的药物包封率。
[0004]申请号为200510030639.5的中国专利申请公开了一种蟾酥提取物脂质体及其制备方法，该专利公开了将磷脂、胆固醇等溶解于甲醇、氯仿、乙醇、乙醚或其中两者的混合物中，通过薄膜分散法得到膜，将乳化剂泊洛沙姆188或吐温80溶于缓冲液中，再将蟾酥提取物溶于该溶液中，然后将制得的溶液加入上述膜中，涡旋振荡，制备得到蟾酥提取物脂质体。
[0005]申请号为200810202734.2的中国专利申请公开了一种蟾酥纳米长循环脂质体及其制备方法，该专利公开了将磷脂、胆固醇、膜修饰材料和蟾酥提取物溶于甲醇、乙醇、乙醚、氯仿中的一种或多种，将表面活性剂泊洛沙姆188或吐温80溶于缓冲液中，将上述有机溶液逐滴注入通氮气搅拌的溶有表面活性剂的缓冲液中，充分搅拌，旋转蒸发除去有机溶媒，然后经高压乳匀，制备得到蟾酥纳米长循环脂质体。
[0006]申请号为201410544846.1的中国专利申请公开了一种蟾酥靶向脂质体及其制备方法，该专利公开了将二硬脂酰磷脂酰胆碱，胆固醇，二硬脂酸磷脂酰乙醇胺
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聚乙二醇2000，二硬脂酸磷脂酰乙醇胺
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聚乙二醇2000
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羧基交连物溶于氯仿中；蟾酥溶于甲醇中，两者按照体积比1:1混合，采用薄膜分散法除去氯仿、甲醇，再将该脂质膜在等渗盐缓冲液中水化。然后将所述混合物在80℃保持一定时间，并分别在开始的、中间的和末端的时间点将它用涡流搅拌，最后将得到的制剂使用挤出机经过直径为25 mm的Whatman 100 nm聚碳酸酯过滤器用数个循环挤出，直到粒径在20
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200 nm之内。再取1
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(3
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二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC
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HCl）和N
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羟基硫代琥珀酰亚胺（S
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NHS）加入上述制备的包裹蟾酥的脂质体PBS缓冲液中，室温搅拌后，加入碳酸酐酶CA9抗体，置于4℃条件下反应。然后用PBS
作为透析介质透析袋透析，重复上述操作2次，除去未包封的蟾酥、未反应的碳酸酐酶CA9抗体、EDC
·
HCl、S
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NHS及普通脂质体。
[0007]上述脂质体的制备均使用了胆固醇，而胆固醇为多环不饱和醇，具有易发生结构衍生化的官能团，如双键和羟基，易在加工储存过程中受氧、光、金属等外界条件的影响产生胆固醇氧化产物。胆固醇氧化产物种类多样，且具有一定的细胞毒性、致突变性和潜在致癌性、可明显促进动脉粥样硬化，进而影响脂质体制剂的稳定性、安全性，危害人体健康。而且脂质体具有较好的EPR效应，常用于抗肿瘤药物的递送，而在肿瘤部位过量摄入胆固醇会抑制T细胞的抗肿瘤活性，影响肿瘤免疫微环境。

技术实现思路

[0008]蟾酥提取物中蟾毒内酯是强心甾体类化合物，具有与胆固醇类似的结构，可替换普通脂质体处方中的胆固醇。能够减少患有高血脂、冠心病、高血压等心血管疾病的患者和肿瘤患者服用该脂质体时胆固醇的摄入量，有针对性的对癌细胞进行抑制，减少对人体正常细胞的伤害和患者治疗痛苦，提高治疗效果。采用无胆固醇脂质体制剂处方，空出了载药空间，该新型无胆固醇脂质体与普通脂质体相比载药量更高；同时，利用脂质体内部水相内核，实现对水溶性药效成分蟾蜍色胺类化合物的共载，该新型无胆固醇脂质体能同时包载蟾酥提取物中脂溶性蟾毒内酯和水溶性蟾蜍色胺类化合物，充分发挥蟾酥中有效成分蟾毒内酯抗肿瘤作用，蟾蜍色胺类的镇痛作用，从而实现蟾酥提取物中多组分的高效载药和靶向递送，解决蟾酥脂溶性有效组分水溶性差、生物利用度低及毒性大等问题，发挥中药多组分、多环节、多靶点的特点。
[0009]本专利技术的目的之一在于提供一种蟾酥提取物无胆固醇脂质体。
[0010]本专利技术的目的之二在于提供一种所述蟾酥提取物无胆固醇脂质体的制备方法。
[0011]本专利技术的目的之三在于提供一种所述蟾酥提取物无胆固醇脂质体在制备治疗癌症药物和/或镇痛药物中的应用。
[0012]为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：第一方面，本专利技术提供一种蟾酥提取物无胆固醇脂质体，所述蟾酥提取物无胆固醇脂质体不含胆固醇，包括以下组分：磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺
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聚乙二醇衍生物和蟾酥提取物；其中，所述蟾酥提取物中蟾毒内酯类成分嵌入脂质体的磷脂双分子层之间，所述蟾酥提取物中蟾蜍色胺类成分包裹在脂质体的水相内核中；所述蟾酥提取物无胆固醇脂质体中，总蟾毒内酯类成分含量为190.00～280.00μg/mL，具体为193.10～279.66μg/mL，优选为220～280μg/mL，总蟾蜍色胺类成分含量为49.00～73.00μg/mL，具体为49.92～72.30μg/mL，优选为58～73μg/mL，优选其中蟾毒灵、华蟾酥毒基和酯蟾毒配基的总含量为142.00～207.00μg/mL，具体为142.42～206.17μg/mL；所述蟾酥提取物无胆固醇脂质体中，磷脂酰胆碱与磷脂酰乙醇胺
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聚乙二醇衍生物的质量比为21～32:20～31，优选为1:0.8～1:1.2。
[0013]本专利技术的蟾酥提取物新型无胆固醇脂质体利用蟾毒内酯结构与胆固醇的相似性，采用蟾毒内酯替代胆固醇，药辅合一，其与普通脂质体（含胆固醇）的对比图如图1所示。
[0014]如图所示，在普通脂质体中，胆固醇嵌入磷脂双分子层之间，蟾毒内酯类（图中从
左至右、从上至下依次为蟾毒灵、蟾蜍他里定、去乙酰华蟾酥毒基、去乙酰华蟾毒它灵、日蟾毒它灵、沙蟾毒精、远华蟾毒精、蟾毒它灵、华蟾毒它灵、华蟾酥毒基、酯蟾毒配基）成分被包封于磷脂双分子层之间，蟾蜍色胺类成分包裹在脂质体水相内核中。本申本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蟾酥提取物无胆固醇脂质体，其特征在于，所述蟾酥提取物无胆固醇脂质体不含胆固醇，包括以下组分：磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺
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聚乙二醇衍生物和蟾酥提取物；其中，所述蟾酥提取物中蟾毒内酯类成分嵌入脂质体的磷脂双分子层之间，所述蟾酥提取物中蟾蜍色胺类成分包裹在脂质体的水相内核中；所述蟾酥提取物无胆固醇脂质体中，蟾毒内酯类成分包括去乙酰华蟾酥毒基、日蟾毒它灵、沙蟾毒精、蟾蜍他里定、去乙酰华蟾毒它灵、远华蟾毒精、蟾毒它灵、华蟾毒它灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基、酯蟾毒配基；蟾蜍色胺类成分包括蟾蜍特尼定、蟾蜍色胺；所述蟾酥提取物无胆固醇脂质体中，磷脂酰胆碱与磷脂酰乙醇胺
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聚乙二醇衍生物的质量比为21～32:20～31。2.根据权利要求1所述的蟾酥提取物无胆固醇脂质体，其特征在于，所述磷脂酰胆碱为选自大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱、单棕榈酰磷脂酰胆碱和甘油磷脂酰胆碱中的一种或多种。3.根据权利要求1所述的蟾酥提取物无胆固醇脂质体，其特征在于，所述磷脂酰乙醇胺
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聚乙二醇衍生物为选自二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺
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聚乙二醇2000、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺
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聚乙二醇3400、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺
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聚乙二醇5000、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺
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聚乙二醇2000、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺
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聚乙二醇5000和二油酰基磷脂酰乙醇胺
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聚乙二醇2000中的一种或多种。4.根据权利要求1所述的蟾酥提取物无胆固醇脂质体，其特征在于，所述磷脂酰胆碱为二硬脂酰磷脂酰胆碱；所述磷脂酰乙醇胺
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聚乙二醇衍生物为二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺
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聚乙二醇2000。5. 根据权利要求1
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4任...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁越，张彤，黎哲，张永，兰金帅，路璐，
申请(专利权)人：上海中医药大学，
类型：发明
国别省市：