TRIM21作为鼻咽癌放疗疗效预测标志物的应用制造技术

本发明专利技术公开了TRIM21作为鼻咽癌放疗疗效预测标志物的应用。在本发明专利技术中，首次发现了TRIM21作为鼻咽癌放疗疗效预测标志物的有效性，并通过试验验证了其能够有效用于指示鼻咽癌患者的鼻咽癌放疗疗效，从而及早的筛选出不适用于放疗治疗的鼻咽癌患者，避免施加错误的治疗手段而延误治疗时机。治疗手段而延误治疗时机。治疗手段而延误治疗时机。

【技术实现步骤摘要】
TRIM21作为鼻咽癌放疗疗效预测标志物的应用


[0001]本专利技术涉及分子生物学
，特别涉及TRIM21作为鼻咽癌放疗疗效预测标志物的应用。

技术介绍

[0002]鼻咽癌是发生于人体鼻咽部的恶性肿瘤，其流行分布极不平衡，高发于东亚。放疗是鼻咽癌的基本治疗方式，所有新诊断的为非转移鼻咽癌的患者都需要接受根治性的放疗。尽管鼻咽癌细胞对放疗射线较为敏感，但是仍有约20％的人发生放疗抵抗，即在治疗后早期发生肿瘤复发。
[0003]放疗是使用辐射射线局部照射肿瘤，传统观点中认为，其通过破坏肿瘤细胞的基因组DNA，使肿瘤细胞死亡，从而达到肿瘤治疗目的。但近年研究表明，除通过DNA损伤外杀死肿瘤细胞外，放疗疗效依赖于机体抗肿瘤免疫反应的激活。机制上，放疗通过活化人体免疫系统，动员免疫细胞攻击肿瘤细胞，进而间接杀灭肿瘤。然而，目前发现，放射治疗对于免疫系统激活作用有限，其原因在于肿瘤细胞利用促癌因子限制了放疗的免疫激活作用，最终导致了放疗抵抗。明确这些促癌因子，有助于预测肿瘤放疗疗效，同时，有利于开发靶向药物，进一步提高肿瘤放疗效果。
[0004]泛素化修饰是最常见的蛋白质修饰之一。E3泛素连接酶是泛素化的执行者，其在多种肿瘤中异常表达导致蛋白质分子异常的泛素化，已被证实与多种肿瘤的发生发展有关。三基序蛋白21(tripartite
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motif protein 21,TRIM21)是一种存在于细胞胞质内的泛素连接酶，此前研究发现，TRIM21参与调控肿瘤细胞的糖代谢、氨基酸代谢，促进抑癌蛋白的降解等，促进肿瘤细胞增殖。然而，TRIM21在鼻咽癌的放疗免疫激活及治疗抵抗方面是否发挥重要作用，其表达能否预测放疗疗效及指导治疗，尚无研究报道。
[0005]相关技术中，尚未有手段能够用于预测患者对于鼻咽癌放疗治疗的抵抗性，且鼻咽癌如何抵抗放疗的机制尚不明确，因此，开发一种有效的鼻咽癌放疗疗效预测标志物，并进一步阐明鼻咽癌放疗抵抗的机制，对于指导鼻咽癌治疗具有重要价值。

技术实现思路

[0006]本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的上述技术问题之一。为此，本专利技术的目的在于提供TRIM21作为鼻咽癌放疗疗效预测标志物的应用。在本专利技术中，首次发现了TRIM21作为鼻咽癌放疗疗效预测标志物的有效性，并通过试验验证了其能够有效用于指示鼻咽癌患者的鼻咽癌放疗疗效，从而及早的筛选出不适用于放疗治疗的鼻咽癌患者，避免施加错误的治疗手段而延误治疗时机。
[0007]本专利技术的第一个方面，提供检测TRIM21的试剂在制备鼻咽癌放疗疗效预测产品中的应用。
[0008]在本专利技术的一些实施方式中，所述检测TRIM21的试剂包括基因水平和蛋白水平检测TRIM21的试剂。
[0009]在本专利技术的一些实施方式中，基因水平的检测技术包括但不限于测序法、核酸探针法、PCR扩增。
[0010]在本专利技术的一些实施方式中，蛋白水平的检测技术包括但不限于Western Blot、ELISA、免疫荧光法、免疫组化。
[0011]在本专利技术的一些实施方式中，所述检测TRIM21的试剂为定量检测试剂。当然，本领域技术人员也可以通过非量化的比较方法来实现本专利技术中的技术方案，其技术核心仅在于能够实现对照品和样品的TRIM21表达情况的对比，对于是否需要实现量化属于更优的可选项。
[0012]在本专利技术的一些实施方式中，采用定量TRIM21的试剂来制备鼻咽癌放疗疗效预测试剂，其采用的技术为免疫组化试剂或显微镜下评估系统的结合。
[0013]在本专利技术的一些实施方式中，所述鼻咽癌放疗疗效预测产品的使用方法为：
[0014]取受试者样品，使用鼻咽癌放疗疗效预测产品对样品中的TRIM21进行定量检测，若表达量显著高于对照品，则该受试者对于鼻咽癌放疗不敏感，鼻咽癌放疗对其治疗无治疗疗效或疗效不显著；若表达量不显著高于对照品，则该受试者对于鼻咽癌放疗敏感，鼻咽癌放疗对其治疗有效果。
[0015]在本专利技术的一些实施方式中，选择的检测方法为免疫组化联合显微镜观察，通过免疫组化获得TRIM21表达水平，显微镜下确定染色强度，将染色强度乘以阳性细胞比例，获得IRS评分，IRS＝0
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6时，为对鼻咽癌放疗不敏感，鼻咽癌放疗对其治疗无治疗疗效或疗效不显著；IRS＝7
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12时，对鼻咽癌放疗敏感，鼻咽癌放疗对其治疗有效果。
[0016]在本专利技术中，专利技术人通过对鼻咽癌大体肿瘤测序数据以及单细胞测序数据的分析，发现E3泛素连接酶分子与鼻咽癌内抗肿瘤免疫反应低下相关，同时，TRIM21高表达提示鼻咽癌放疗不敏感，放疗免疫激活不足，与患者不良预后相关。通过体外“肿瘤细胞
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免疫细胞”共同培养实验、以及小鼠肿瘤放疗模型，专利技术人发现：敲除TRIM21可显著增强放疗引发的肿瘤细胞抗原呈递，增加免疫细胞识别肿瘤的机会，且敲除TRIM21有助于树突状细胞、CD8+T细胞等免疫效应细胞激活，发挥杀伤肿瘤作用，促进肿瘤放疗敏感性，增强放疗疗效。以上结果提示：TRIM21可能是预测鼻咽癌放疗疗效的标志物。
[0017]此外，专利技术人还选取了355例初诊鼻咽癌患者的活检鼻咽癌组织石蜡标本，采用免疫组化的方法评估TRIM21表达水平，随后显微镜下确定染色强度，将染色强度乘以阳性细胞比例，获得IRS(immunoreactive score)评分。根据患者的IRS评分中位数，将355例鼻咽癌患者根据IRS的中位数被分为TRIM21低表达组(IRS＝0
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6)和高表达组(IRS＝7
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12)。结合预后数据，发现放疗后出现复发的鼻咽癌患者，其肿瘤的TRIM21显著高表达。Kaplan
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Meier生存显示TRIM21高表达与鼻咽癌患者复发、远处转移及死亡相关。多因素分析显示：TRIM21是鼻咽癌患者无疾病进展生存、无远处转移生存和总生存的不良预后因素。
[0018]在本专利技术的一些实施方式中，所述对照品为健康人或无鼻咽癌复发、远处转移及死亡的鼻咽癌患者样品。
[0019]在本专利技术的一些实施方式中，所述受试者均为鼻咽癌患者。本专利技术中的适用人群限定为鼻咽癌患者，即其核心是从鼻咽癌患者中筛选或者区分出不适用于放疗的鼻咽癌患者。
[0020]在本专利技术的一些实施方式中，所述样品包括体液或组织样品。
[0021]在本专利技术的一些实施方式中，所述组织样品为肿瘤组织样品。
[0022]本专利技术的第二个方面，提供一种鼻咽癌放疗疗效预测系统，所述鼻咽癌放疗疗效预测系统包括取样模块、TRIM21检测模块和分析模块。
[0023]在本专利技术的一些实施方式中，所述取样模块用于对样品进行取样，取样类型包括体液或组织样品，取样方式可以为本领域中的常规取样方式。
[0024]在本专利技术的一些实施方式中，所述TRIM21检测模块用于检测样品中的TRIM21含量。
[0025]在本专利技术的一些实施方式中，所述TRIM21检本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测TRIM21的试剂在制备鼻咽癌放疗疗效预测产品中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测TRIM21的试剂包括基因水平和蛋白水平检测TRIM21的试剂。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测TRIM21的试剂为定量检测试剂。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述鼻咽癌放疗疗效预测产品的使用方法为：取受试者样品，使用鼻咽癌放疗疗效预测产品对样品中的TRIM21进行定量检测，若表达量显著高于对照品，则该受试者对于鼻咽癌放疗不敏感，鼻咽癌放疗对其治疗无治疗疗效或疗效不显著；若表达量不显著高于对照品，则该受试者对于鼻咽癌放疗敏感，鼻咽癌放疗对其治疗有效果。5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述鼻咽癌放疗疗效预测产品基于免疫组化联合显微镜观察，通过得到的染色强度和阳性细胞比例得到IRS评分，IRS评分为0
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【专利技术属性】
技术研发人员：柳娜，马骏，李君炎，赵银，龚莎，
申请(专利权)人：中山大学肿瘤防治中心中山大学附属肿瘤医院，中山大学肿瘤研究所，
类型：发明
国别省市：