一种立他司特中有关物质的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种立他司特中有关物质的检测方法，筛选出恰当的色谱条件和溶解样品的溶剂，以0.01％～0.5％磷酸水溶液和乙腈作为混合流动相进行梯度洗脱，优化洗脱的时间和流动相的比例，实现杂质苯甲醇与各杂质之间的有效分离，检出的杂质多，灵敏度高、专属性好、耐用性高，主成分及各杂质在该检测方法中保留能力较强，响应较高，各成分间分离良好，可以快速准确的监控立他司特中的有关物质，对立他司特原料药和制剂的质量评估具有重要意义。料药和制剂的质量评估具有重要意义。料药和制剂的质量评估具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
一种立他司特中有关物质的检测方法


[0001]本专利技术属于药物分析
，具体涉及一种立他司特中有关物质的检测方法。

技术介绍

[0002]立他司特(lifitegrast)是新型的小分子整合素(integrin)抑制药，能拮抗淋巴细胞功能相关抗原
‑
1(LFA
‑
1)，阻断与其同源配体细胞间黏附分子
‑
1(ICAM
‑
1)的相互作用，干扰引起干眼病的角膜与结膜组织的ICAM
‑
1过度表达，是首个治疗干眼症症状和体征的药物。立他司特在合成及储存过程中引入多个杂质，需开发一种方法，对其中的杂质进行定量分析，严格控制立他司特的质量品质，保证产品质量符合要求。
[0003]立他司特，化学名为(S)
‑2‑
(2
‑
(苯并呋喃
‑6‑
羰基)
‑
5,7
‑
二氯
‑
1,2,3,4
‑
四氢异喹啉
‑
6甲酰胺基)
‑3‑
(3
‑
(甲基磺酰基)苯基)丙酸，结构式如下：
[0004][0005]目前，关于立他司特中有关物质的检测方法虽有报道，但是仍然存在较多缺陷。例如，专利CN111060629A公开了一种采用高效液相法测定立他司特中有关物质的方法，但只能测定杂质A～F这6个杂质，而立他司特在合成及储存过程中引入的杂质不止这6个，显然无法实现对立他司特的质量的精准控制。
[0006]专利CN114689733A虽然报道了14个杂质的检测方法，但是相邻的杂质JP
‑
Y
‑
8、SM1和JP
‑
Y
‑
9杂质分离度不高，重现性比较差。而且，杂质JP
‑
Y
‑
12与溶剂峰极为接近，在稳定性检测过程中溶剂峰极可能会干扰杂质JP
‑
Y
‑
12的准确定量。尤为重要的是，在该专利报道的杂质中未报到苯甲醇，目前也尚未有关于立他司特中杂质苯甲醇的检测方法的报道，但该杂质在多批次参比制剂中检出，能否有效的检出和定量杂质苯甲醇，对于立他司特原料药和制剂的质量对比研究至关重要。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的是在现有技术的基础上，提供一种立他司特中有关物质的检测方法，检测出的杂质多、灵敏度高、专属性好，各杂质峰之间、立他司特及其相邻杂质峰之间的分离度好，能快速、有效、准确的监控立他司特原料药和制剂中的有关物质。
[0008]本专利技术的技术方案如下：
[0009]一种立他司特中有关物质的检测方法，该检测方法采用高效液相色谱对立他司特中有关物质进行定量检测，其高效液相色谱条件包括：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱，以流动相A和流动相B为混合流动相进行梯度洗脱，流动相A为0.01％～0.5％磷酸水溶液，流动相B为乙腈；具体梯度洗脱过程如下：(1)在0
‑
5分钟，流动相A和流动相B的体积比保持
80～95:20～5不变；(2)在5
‑
15分钟内，流动相A和流动相B的体积比由80～95:20～5匀速渐变至70:30；(3)在15
‑
45分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持70:30不变；(4)在45
‑
50分钟内，流动相A和流动相B的体积比由70:30匀速渐变至55:45；(5)在50
‑
65分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持55:45不变；(6)在65
‑
80分钟内，流动相A和流动相B的体积比由55:45匀速渐变至30:70；(7)在80
‑
85分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持30:70不变；(8)在85
‑
86分钟内，流动相A和流动相B的体积比由30:70匀速渐变至80～95:20～5；(9)在86
‑
95分钟，流动相A和流动相B的体积比保持80～95:20～5不变。
[0010]在本专利技术中，立他司特中有关物质的检测中待测样品为立他司特原料药或立他司特滴眼液。
[0011]本专利技术提供的检测方法，以流动相A和流动相B为混合流动相进行梯度洗脱，在色谱分析时，选择色谱柱后，需要确定流动相梯度洗脱过程中，流动相A和流动相B的比例。对于本专利技术而言，本品杂质谱中杂质较多，特别是针对原料药和参比制剂中存在的杂质9(苯甲醇)，梯度洗脱过程的时间和流动相的比例并不是可以随机选择的，是需要进行大量的实验和分析确定的，否则，各杂质间、主峰与相邻杂质间无法有效分离，影响杂质的定量分析，对本品质量控制产生影响。
[0012]采用本专利技术的检测方法测定立他司特中有关物质时，在梯度洗脱的过程中，需要严格控制初始流动相中水相(流动相A)和有机相(流动相B)的比例，当初始流动相中有机相(流动相B)比例过高或者过低时，各杂质间、主峰与相邻杂质间无法有效分离，无法准确测定立他司特中各杂质的含量。对于本专利技术而言，控制初始流动相中水相(流动相A)和有机相(流动相B)的比例为80～95:20～5，可以但不仅限于80:20、85:15、90:10或95:5，优选地，初始流动相中水相(流动相A)和有机相(流动相B)的比例为90:10。
[0013]在一种优选方案中，梯度洗脱包括以下步骤：(1)在0
‑
5分钟，流动相A和流动相B的体积比保持90:10不变；(2)在5
‑
15分钟内，流动相A和流动相B的体积比由90:10匀速渐变至70:30；(3)在15
‑
45分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持70:30不变；(4)在45
‑
50分钟内，流动相A和流动相B的体积比由70:30匀速渐变至55:45；(5)在50
‑
65分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持55:45不变；(6)在65
‑
80分钟内，流动相A和流动相B的体积比由55:45匀速渐变至30:70；(7)在80
‑
85分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持30:70不变；(8)在85
‑
86分钟内，流动相A和流动相B的体积比由30:70匀速渐变至90:10；(9)在86
‑
95分钟，流动相A和流动相B的体积比保持90:10不变。
[0014]在本专利技术的梯度洗脱过程中，采用的流动相A为0.01％～0.5％磷酸水溶液，流动相B为乙腈，在其他条件配合下，各杂质峰之间、立他司特主峰及其相邻杂质峰之间的分离度高，即可快速、有效、准确监控立他司特中的有关物质。在本专利技术中，流动相A为0.01％～2％磷酸水溶液，其中，磷酸的体积含量可以但不仅限于0.01％、0.02％、0.04％、0.05％、0.06％、0.08％、0.1％、0.15％或0.5％，优选地，流动相A为0.本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种立他司特中有关物质的检测方法，其特征在于，所述检测方法采用高效液相色谱对立他司特中有关物质进行定量检测，其高效液相色谱条件包括：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱，以流动相A和流动相B为混合流动相进行梯度洗脱，所述流动相A为0.01％～0.5％磷酸水溶液，所述流动相B为乙腈；具体梯度洗脱过程如下：(1)在0
‑
5分钟，流动相A和流动相B的体积比保持80～95:20～5不变；(2)在5
‑
15分钟内，流动相A和流动相B的体积比由80～95:20～5匀速渐变至70:30；(3)在15
‑
45分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持70:30不变；(4)在45
‑
50分钟内，流动相A和流动相B的体积比由70:30匀速渐变至55:45；(5)在50
‑
65分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持55:45不变；(6)在65
‑
80分钟内，流动相A和流动相B的体积比由55:45匀速渐变至30:70；(7)在80
‑
85分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持30:70不变；(8)在85
‑
86分钟内，流动相A和流动相B的体积比由30:70匀速渐变至80～95:20～5；(9)在86
‑
95分钟，流动相A和流动相B的体积比保持80～95:20～5不变。2.根据权利要求2所述的立他司特中有关物质的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱包括以下步骤：(1)在0
‑
5分钟，流动相A和流动相B的体积比保持90:10不变；(2)在5
‑
15分钟内，流动相A和流动相B的体积比由90:10匀速渐变至70:30；(3)在15
‑
45分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持70:30不变；(4)在45
‑
50分钟内，流动相A和流动相B的体积比由70:30匀速渐变至55:45；(5)在50
‑
65分钟内，流动相A和流动相B的体...

【专利技术属性】
技术研发人员：张文秀，刘伟，季金玉，辛妮，
申请(专利权)人：南京海纳制药有限公司南京一诺医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：