抗重组人凝血因子VIIa-Fc融合蛋白的抗体及其应用制造技术

本申请提供了一种结合重组人凝血因子VIIa

【技术实现步骤摘要】
抗重组人凝血因子VIIa
‑
Fc融合蛋白的抗体及其应用


[0001]本申请涉及生物医药
，特别是涉及抗重组人凝血因子VIIa
‑
Fc融合蛋白的单克隆抗体及其应用。

技术介绍

[0002]准确测定生物基质(如全血、血清、血浆、尿)中的药物浓度，对于药物和制剂研发非常重要，这些数据可被用于支持药品的安全有效性，或根据毒动学、药动学和生物等有效性试验的结果做出关键性决定。因此，必须完整地验证和记录应用的生物分析方法，以获得可靠的结果。
[0003]免疫分析方法是以特异性抗原
‑
抗体的反应为基础的分析方法。免疫分析技术和放射性核素示踪技术、酶促反应或荧光分析等高灵敏度的分析技术相结合，具有高特异性和高灵敏度的特点，特别适合测定复杂体系中的微量组分，以及药物生产中发酵液或细胞培养液中有效成分的快速测定。免疫分析方法的关键是筛选高效、灵敏、特异性结合待测药物的抗体。
[0004]专利ZL201610692686.4公开了重组人凝血因子VIIa
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Fc融合蛋白，其采用柔性肽和CPT共同组成的接头分子连接FVIIa和延长半衰期部分人IgG Fc，能够最大程度地保留FVIIa的生物活性，并更显著地延长其体内活性半衰期。
[0005]目前尚未报道过针对重组人凝血因子VIIa
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Fc融合蛋白的用于临床前和临床研究的生物分析方法。

技术实现思路

[0006]本申请的目的在于提供一种能够用于检测重组人凝血因子VIIa
‑
Fc融合蛋白的单克隆抗体及其应用。
[0007]本申请为解决上述技术问题，提出了如下技术方案：
[0008]本申请第一方面提供了一种结合重组人凝血因子VIIa
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Fc融合蛋白的抗体或其抗原结合片段，其包含HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3；其中，
[0009]所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列；或者
[0010]所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有如SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有如SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列。
[0011]本申请第二方面提供了一种多核苷酸，其编码本申请第一方面所提供的抗体或其抗原结合片段；或，一种重组载体，其包含所述的多核苷酸；或，一种宿主细胞，其包含所述的多核苷酸或重组载体；或，一种杂交瘤细胞，其用于表达本申请第一方面所提供的抗体或其抗原结合片段。
[0012]本申请第三方面提供了本申请第一方面的抗体或其抗原结合片段用于检测样品中重组人凝血因子VIIa
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Fc融合蛋白存在或含量的用途。
[0013]本申请第四方面提供了一种使用本申请第一方面的抗体或其抗原结合片段检测样品中重组人凝血因子VIIa
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Fc融合蛋白存在或含量的方法，其中，所述方法为夹心ELISA法，所述抗体或其抗原结合片段作为捕获抗体和/或检测抗体。
[0014]本申请第五方面提供了一种用于检测重组人凝血因子VIIa
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Fc融合蛋白的抗体组合，其包括本申请第一方面所提供的抗体或其抗原结合片段的两种。
[0015]本申请第六方面提供了一种用于检测重组人凝血因子VIIa
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Fc融合蛋白的试剂盒，其包括本申请第一方面所提供的抗体或其抗原结合片段的至少一种。
[0016]有益效果：
[0017]本申请提供了一种抗重组人凝血因子VIIa
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Fc融合蛋白的抗体或其抗原结合片段，所述抗体通过特异性结合重组人凝血因子VIIa
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Fc融合蛋白，可用于检测样品中重组人凝血因子VIIa
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Fc融合蛋白存在或含量。进一步地，所述抗体或其抗原结合片段能够特异性结合凝血因子VIIa
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Fc融合蛋白的不同表位，从而可以用于作为凝血因子VIIa
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Fc融合蛋白检测的捕获抗体和/或检测抗体，采用本申请的抗体建立的凝血因子VIIa
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Fc融合蛋白检测方法具有高的稳定性、准确度、精密度、灵敏度以及特异性等。
具体实施方式
[0018]下面将对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。
[0019]缩略语表
[0020][0021][0022]定义
[0023]除非另有说明，本申请的实施将采用分子生物学(包括重组技术)、微生物学、细胞生物学、生物化学和免疫学的常规技术，这些都在本领域的技术范围内。
[0024]为了可以更容易地理解本申请，某些科技术语具体定义如下。除非本文其它部分另有明确定义，否则本文所用的科技术语都具有本申请所属领域普通技术人员通常理解的含义。关于本领域的定义及术语，专业人员具体可参考Current Protocolsin Molecular Biology(Ausubel)。氨基酸残基的缩写是本领域中所用的指代20个常用L
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氨基酸之一的标准3字母和/或1字母代码。本文(包括权利要求书)所用单数形式包括其相应的复数形式，除非文中另有明确规定。
[0025]术语“约”在与数字数值联合使用时意为涵盖具有比指定数字数值小5％的下限和比指定数字数值大5％的上限的范围内的数字数值，包括但不限于
±
5％、
±
2％、
±
1％和
±
0.1％。
[0026]术语“和/或”应理解为意指可选项中的任一项或可选项中的任意两项或更多项的组合。
[0027]术语“百分比(％)氨基酸序列同一性”或简称“同一性”定义为在将氨基酸序列进行比对(并在必要时导入空位)以获取最大百分比序列同一性，且不将任何保守取代视为序列同一性的一部分之后，候选氨基酸序列中的氨基酸残基与参比氨基酸序列中的相同氨基酸残基的百分比。可使用本领域各种方法进行序列比对以便测定百分比氨基酸序列同一性，例如，使用公众可得到的计算机软件如BLAST、BLAST
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2、ALIGN或MEGALIGN(DNASTAR)软件。本领域技术人员可以决定测量比对的适宜参数，包括对所比较的序列全长获得最大比对所需的任何算法。
[0028]术语“本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种结合重组人凝血因子VIIa
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Fc融合蛋白的抗体或其抗原结合片段，其包含HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3；其中，所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列；或者所述HCDR1、HCDR2和HCDR3分别具有如SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列，所述LCDR1、LCDR2和LCDR3分别具有如SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其包含：与SEQ ID NO:13所示的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变区，和与SEQ ID NO:14所示氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变区；或与SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变区，和与SEQ ID NO:16所示氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变区。3.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其包含：氨基酸序列如SEQ ID NO:13所示的重链可变区，和氨基酸序列如SEQ ID NO:14所示的轻链可变区；或氨基酸序列如SEQ ID NO:15所示的重链可变区，和氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示的轻链可变区。4.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其包含：与SEQ ID NO:17所示的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘成亮，曲晨宁，李梦瑶，刘云菲，康红智，郝维维，秦娜，莫炜川，王歆，胡成立，
申请(专利权)人：北京基科晟斯医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：