基于凝胶固定核酸的DNA固定方法及其应用技术

本发明专利技术涉及将ＤＮＡ固定于凝胶上的方法，特别是涉及一种基于凝胶固定核酸的ＤＮＡ固定方法及其应用；所述的ＤＮＡ样本的固定方法包括原料选择、混合和聚合反应三个步骤；各步骤的内容如下：原料选择：选用的原料和用量是：１０×ＴＢＥ（ｐＨ１３）：１０％；４０％甲基丙烯酰胺储存液：１０－７０％；稀释变性氨基末端修饰的核酸：１μＬ－５ｍｌ；Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ－四甲基乙二胺：１－１０％；１０％过硫酸铵：１－１０％；其余为水；混合：在配置好的凝胶原料中加入氨基末端修饰的核酸进行混合，混合物中含有的核酸量为：１０－１０００ｎｇ／３μＬ；聚合反应：取５μＬ混合物置于ＰＣＲ反应管中，３７℃放置３０分钟待聚合反应结束后，混合物成型成凝胶状，末端氨基修饰的核酸即通过共聚反应在凝胶中得以固定；本发明专利技术具有承载量高、末端修饰的核酸分子通过与固相载体之间形成稳定的共价键实现固定，能够经受ＰＣＲ反应的剧烈条件等优点。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种基于凝胶固定核酸的ＤＮＡ固定方法，其特征是包括原料选择、混合和聚合反应三个步骤；各步骤的内容如下：　原料选择：选用的原料和用量是：１０×ＴＢＥ（ｐＨ１３）：１０％；４０％甲基丙烯酰胺储存液：１０－７０％；稀释变性氨基未端修饰的核酸 ：１μＬ－５ｍｌ；Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ－四甲基乙二胺：１－１０％；１０％过硫酸铵：１－１０％；其余为水；　混合：在配置好的凝胶原料中加入氨基末端修饰的核酸进行混合，混合物中含有的核酸量为：１０－１０００ｎｇ／３μＬ；　聚合反应：取５μ Ｌ混合物置于ＰＣＲ反应管中，３７℃放置３０分钟待聚合反应结束后，混合物成型成凝胶状，末端氨基修饰的核酸即通过共聚反应在凝胶中得以固定。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：厉朝龙，贾丹梅，
申请(专利权)人：杭州恩氏基因技术发展有限公司，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]