一种双胞山药的增殖诱导快繁方法技术

本发明专利技术公开了一种双胞山药的增殖诱导快繁方法，其方法是先取双胞山药的薯块或零余子萌发的幼嫩茎段作为外植体，将双胞山药外植体进行消毒、增殖培养、生根诱导培养和幼苗移栽，移栽的幼苗经5个月生长后，部分幼苗可结双胞薯块。本发明专利技术通过调节两种常用激素的使用量进行全程诱导，方法简单，操作简便，生产成本低。快繁体系可诱导试管苗繁殖双胞试管薯，诱导率可达80%，繁殖系数高，移栽的幼苗经5个月生长后，部分幼苗可结双胞薯块。部分幼苗可结双胞薯块。部分幼苗可结双胞薯块。

【技术实现步骤摘要】
一种双胞山药的增殖诱导快繁方法


[0001]本专利技术属植物组织培养领域，具体涉及一种双胞山药的增殖诱导快繁方法。

技术介绍

[0002]山药(Dioscoreaopposita)是薯蓣科薯蓣属一年生或多年生藤本植物的块茎，因其富含多种营养元素和保健成分，深受消费者喜爱。双胞山药具有高产、易栽培、品质好、适于加工等优点，随着市场需求量的逐年攀升，双胞山药种植经济效益逐渐凸显，近年已逐步成为贵州省多地农田增量、农民增收的亮点产业。然而山药传统的芦头繁殖法存在着用种量大、病害易积累、种薯发芽不齐等缺点，制约着双胞山药的生产与推广。山药快繁技术不仅能够加快优良种薯的繁育速度，也是脱毒种薯生产不可或缺的一环。研究双胞山药快繁体系条件不但能推动贵州山药产业的壮大，也能为其脱毒种薯的生产提供理论借鉴。国内外对山药的研究主要集中于食品加工、病虫害防控、次生代谢产物提取与活性分析等方面，而目前山药快繁体系优化研究主要集中于少数主栽品种上，对新兴特色品种双胞山药的快繁技术研究较少。而双胞山药的尿囊素和多糖含量均显著高于市售山药品种，双孢山药其可溶性糖、铁、铜含量相对丰富。双胞山药干片和脆片产品含油率、色泽及剪切力适中，口感酥脆，风味特别，感官评分较高，适用于脆片加工。
[0003]目前未有双胞山药的快繁技术方面的研究，只对紫山药、花籽山药、铁棍山药、惠楼山药、淮山药等快繁技术进行了研究与优化。因不同的山药的生长环境不同，山药本身的有效物质也不同，导致不同山药的快繁技术不同，张丽霞等研究表明在液体MS培养基中添加KT(2.0mg
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‑1)+NAA(0.02mg
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‑1)+PP333(0.1mg
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‑1)适合花籽山药茎段的繁殖。平阿敏等研究铁棍山药茎尖茎段诱导成苗，结果表明添加6
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BA(0.5mg
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‑1)+NAA(0.5mg
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‑1)最适合茎尖成苗，添加6
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BA(0.5mg
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‑1)+NAA(0.1mg
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‑1)最适合茎段侧芽成苗。王葡萄等研究表明，南城淮山茎蔓腋芽在添加6
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BA(1.0mg
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‑1)+NAA(0.1mg
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‑1)的MS培养基中成苗率可达80％，添加6
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BA(2.0mg
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‑1)+NAA(0.2mg
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‑1)+活性炭(1.5g
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‑1)为最适增殖配方，蘸取100mg
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‑1NAA溶液生根率可达96.7％。李瑞雪
[7]等以铁棍山药为材料，得出添加TDZ(1.0mg
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‑1)适合原球茎的诱导，增殖阶段宜添加6
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BA(9.0mg
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‑1)，KT(2.0mg
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‑1)+NAA(0.02mg
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‑1)适合原球茎的分化，1/4MS中添加NAA(0.05mg
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‑1)+PP333(1.0mg
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‑1)为最适生根培养基。前期对不同山药快繁体系的研究结果表明，不同的山药种间快繁体系存在一定的差异。现有专利中也未对双胞山药的快繁技术进行报道，如专利(CN105145373A)一种利川山药组培快繁方法，报道的是利川山药，其组培快繁技术也与本申请的双胞山药的快繁技术有所不同。
[0004]本研究以特色品种双胞山药为试验材料，以外植体、激素配比、基质配比等为试验因素，探索双胞山药最适的消毒、增殖、生根诱导以及幼苗移栽等条件，优化双胞山药的快繁体系，为双胞山药的脱毒苗规模化生产提供理论参考依据。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于，提供一种双胞山药的增殖诱导快繁方法。本专利技术通过本专利技术通过调节两种常用激素的使用量进行全程诱导，方法简单，操作简便，生产成本低，双胞山药的增殖诱导率达到80％。
[0006]本专利技术的技术方案：
[0007]一种双胞山药的增殖诱导快繁方法，所述方法是先取双胞山药的薯块或零余子萌发的幼嫩茎段作为外植体，将双胞山药外植体进行消毒、增殖培养、生根诱导培养和幼苗移栽。
[0008]前述的双胞山药的增殖诱导快繁方法，所述方法包括以下步骤：
[0009](1)清洗消毒：取双胞山药的外植体清洗掉表面杂质后，加洗洁精流水冲洗，于超净工作台中使用75％乙醇消毒，无菌水清洗后，使用0.1％HgCl2溶液消毒,再用无菌水清洗，无菌吸水纸吸干外植体表面水分，切除接近创口的组织后，切成小段，得到A品；
[0010](2)增殖培养：取A品于增殖培养基中培养，增殖培养基为：01
‑
1.0mg
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L
‑1NAA+0.5
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2.5mg
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L
‑16
‑
BA+30g
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L
‑1蔗糖+8g
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L
‑1琼脂，培养40天后，得到B品；
[0011](3)生根诱导培养：取B品于生根诱导培养基中培养，生根诱导培养基为：2mg
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‑1NAA+0.5
‑
1.5mg
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‑16
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BA+30g
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L
‑1蔗糖+8g
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‑1琼脂，培养30天后生根，得到C品；
[0012](4)移栽基质：取C品于室外炼苗1
‑
3天后，小心洗净幼苗根系附着的培养基，经0.05mg
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L
‑1NAA溶液蘸根后，进行移栽，移栽到添加蛭石的营养土中，喷施适量的清水，覆盖薄膜，2
‑
6天后揭膜并正常管理，30天后统计幼苗成活率，经五个月生长后，植株可结双胞薯块。
[0013]前述步骤(1)中，清洗消毒：取双胞山药的外植体清洗掉表面杂质后，加洗洁精流水冲洗30
‑
45min，于超净工作台中使用75％乙醇消毒15
‑
25s，无菌水清洗2
‑
4次后，使用0.1％HgCl2溶液消毒8
‑
14min,再用无菌水清洗3
‑
5次，无菌吸水纸吸干外植体表面水分，切除接近创口的组织后，切成2
‑
4mm的小段，得到A品。
[0014]具体的说，前述步骤(1)中，清洗消毒：取双胞山药的外植体清洗掉表面杂质后，加洗洁精流水冲洗30
‑
40min，于超净工作台中使用75％乙醇消毒20s，无菌水清洗3次后本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种双胞山药的增殖诱导快繁方法，其特征在于：所述方法是先取双胞山药的薯块或零余子萌发的幼嫩茎段作为外植体，将双胞山药外植体进行消毒、增殖培养、生根诱导培养和幼苗移栽。2.根据权利要求1所述的双胞山药的增殖诱导快繁方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：（1）清洗消毒：取双胞山药的外植体清洗掉表面杂质后，加洗洁精流水冲洗，于超净工作台中使用75%乙醇消毒，无菌水清洗后，使用0.1%HgCl2溶液消毒,再用无菌水清洗，无菌吸水纸吸干外植体表面水分，切除接近创口的组织后，切成小段，得到A品；（2）增殖培养：取A品于增殖培养基中培养，增殖培养基为：01
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1.0 mg
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1 NAA + 0.5
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2.5mg
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1 6
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BA+30g
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‑1蔗糖+8g
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‑1琼脂，培养40天后，得到B品；（3）生根诱导培养：取B品于生根诱导培养基中培养，生根诱导培养基为：2mg
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1 NAA+0.5
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1.5 mg
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‑16
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BA+30g
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‑1蔗糖+8g
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‑1琼脂，培养30天后生根，得到C品；（4）移栽基质：取C品于室外炼苗1
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3天后，小心洗净幼苗根系附着的培养基，经0.05 mg
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L
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1 NAA溶液蘸根后，进行移栽，移栽到添加蛭石的营养土中，喷施适量的清水，覆盖薄膜，2
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6天后揭膜并正常管理，30天后统计幼苗成活率，经五个月生长后，植株可结双胞薯块。3.根据权利要求2所述双胞山药的增殖诱导快繁方法，其特征在于：所述步骤（1）中，清洗消毒：取双胞山药的外植体清洗掉表面杂质后，加洗洁精流水冲洗30
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45min，于超净工作台中使用75%乙醇消毒15
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25s，无菌水清洗2
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4次后，使用0.1%HgCl2溶液消毒8
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14min, 再用无菌水清洗3
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5次，无菌吸水纸吸干外植体表面水分，切除接近创口的组织后，切成2
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4mm的小段，得到A品。4.根据权利要求3所述双胞山药的增殖诱导快繁方法，其特征在于：所述步骤（1）中，清洗消毒：取双胞山药的外植体清洗掉表面杂质后，加洗洁...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓禄军，阳腾，刘怒安，夏锦慧，
申请(专利权)人：贵州省生物技术研究所贵州省生物技术重点实验室，贵州省马铃薯研究所，贵州省食品加工研究所，
类型：发明
国别省市：