人工活体冷冻提取组织超微结构及其蛋白分布标本的方法技术

一种人工活体冷冻提取组织超微结构及其蛋白分布标本的方法，本发明专利技术提供了一种操作简单、可靠、易于推广的人工提取活体组织标本的方法。本发明专利技术的要点为：在待取标本活体状态下，人工迅速将异戊烷－丙烷混合冷冻剂，直接倾倒在提取标本的活体器官表面上；然后将液态氮浸泡在标本表面，并在液态氮中手工修剪组织结构标本；将提取后的组织结构标本置入多聚甲醛和制备原料纯度为９９．５－９９．７％丙酮，经过提纯的冷冻置换液中；同时，用棉絮状固态二氧化碳结合丙酮进行保温，在－８０℃环境下进行缓慢冷冻置换４８－７２小时，并维持冷冻置换温度恒定；然后阶梯升温，冷冻置换过程缓慢持续地进行；冷冻置换过程数次重复进行，直至标本组织细胞的水分子全部置换完为止。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
人工活体冷冻提取组织超微结构及其蛋白分布标本的方法，其特征在于采用如下步骤：（１）、在待取标本活体状态下，人工迅速将异戊烷－丙烷混合冷冻剂，直接倾倒在提取标本的活体器官表面上；（２）、然后将液态氮浸泡在标本表面，并在液态氮中手工修剪组织结构标本；（３）、将提取后的组织结构标本置入多聚甲醛和制备原料纯度为９９．５－９９．７％丙酮，经过提纯的冷冻置换液中；同时，用棉絮状固态二氧化碳结合丙酮进行保温，在－８０℃环境下进行缓慢冷冻置换４８－７２小时，并维持冷冻置换温度恒定；然后阶梯升温，冷冻置换过程缓慢持续地进行；（４）、冷冻置换过程数次重复进行，直至标本组织细胞的水分子全部置换完为止。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李子龙，
申请(专利权)人：李子龙，
类型：发明
国别省市：89[中国|沈阳]