一种外泌体的制备方法及其细胞培养箱技术

本发明专利技术提供一种外泌体的制备方法，属于外泌体生产领域，该外泌体的制备方法具体步骤为样品取样、细胞培养、分离预处理、超高速分离、外泌体原料处理、原料检测、外泌体提纯和外泌体分装。本发明专利技术提供合理的制备工艺，通过对细胞培养后的观察，保证制备样品的质量，配合原料检测步骤可以对外泌体原料进行检测，保证外泌体制取后的质量，再经过多次的提纯、分离和收集后，可以进一步提高外泌体的制取质量，将检测后记录的数据进行上传，配合计算机的追溯系统，便于查询每一批外泌体的制备过程。便于查询每一批外泌体的制备过程。便于查询每一批外泌体的制备过程。

【技术实现步骤摘要】
一种外泌体的制备方法及其细胞培养箱


[0001]本专利技术外泌体生产
，尤其涉及一种外泌体的制备方法。

技术介绍

[0002]外泌体是指包含了复杂RNA和蛋白质的小膜泡，现今，其特指直径在40
‑
100nm的盘状囊泡，主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，现有专利申请号为CN202110841864.6的一种用于皮肤修复的细胞外泌体的制备方法，包括以下步骤：S1.制备间充质干细胞外泌体；S2.将十肽
‑
12转导入间充质干细胞外泌体中，得到可修复皮肤的初品干细胞外泌体；S3.制备人脂肪干细胞来源外泌体；S4.制备宫内膜干细胞外泌体；S5.制备用于皮肤修复的成品细胞外泌体；S6.杀菌处理后保存，外泌体制备过程比较繁琐复杂，导致生产后的多外泌体质量参差不齐，并且无法追溯。

技术实现思路

[0003]为了解决上述技术问题，本专利技术提供一种外泌体的制备方法，通过多次对样品进行检测记录，你并且将样品数据录入追溯系统中，提高外泌体的生产质量。
[0004]一种可以检测不同地质的矿用锚杆使用方法具体包括以下步骤：
[0005]步骤一：样品取样：先对取样工具进行消毒，再利用取样工具对需要培养的细胞样品进行取样，将取样后的细胞放入培养皿中；
[0006]步骤二：细胞培养，具体包括以下操作步骤：
[0007]第一步：细胞检测：将每一个培养皿分别放置到显微镜下管观察，确认细胞的鲜活状态；
[0008]第二步：放入培养箱：将挑选好的细胞样品统一归类放置之后送入细胞培养箱中；
[0009]第三步：参数设定：将细胞培养箱的温度参数以及湿度参数按照标准设定好，并且设定和记录好培养时间；
[0010]步骤三：分离预处理，具体包括以下操作步骤：
[0011]第一步：取出培养皿：工作人员先对全身进行消毒，再将培养好的细胞样品从细胞培养箱中取出，放置到显微镜旁的实验台上；
[0012]第二步：样品观察：先将显微镜调节到四十倍放大，管擦混细胞生长情况，再将显微镜调到二百倍放大，再观察细胞状态；
[0013]第三步：数值记录：利用计算机对细胞的各项数值进行激励，并且利用照相工具对细胞的放大图片进行拍照记录；
[0014]步骤四：超高速分离：等细胞诱导到百分之八十以后将其收集起来放入细心管中，对离心管的开口处进行密封，再将吸力管放入超高速离心机中进行细心分离；
[0015]步骤五：外泌体原料处理：将分离出来的外泌体原料收集起来，然后将剩余的杂质送入专门的处理室进行处理；
[0016]步骤六：原料检测，具体包括以下操作步骤：
[0017]第一步：原料取样：利用消毒后端取样工具对每个培养皿中的外泌体原料进行一一取样，将原料样品放入观察皿中，并且做好标记；
[0018]第二步：质量检测：将取样的原料样品送入检测室，工作人员对外泌体原料进行活性因子、因子浓度、外泌体粒径大小、携带蛋白数等项目的检测；
[0019]第三步：数据对照：将检测后的外泌体原料做多个对照组，保持数据的可靠性；
[0020]步骤七：外泌体提纯：利用专用的提纯设备对外泌体初级原料进行提纯、分离和收集，反复提纯三次至五次；
[0021]步骤八：外泌体分装：将合格的外泌体通过注射剂，分别装入专用存储瓶中，并且在晴子外侧粘贴名称标签。
[0022]优选地，在步骤三，所述的第三步参数记录中，细胞放大图片需要上传到计算机，与各项数值一同录入到追溯系统中。
[0023]优选地，在步骤七，所述的外泌体提纯中，提纯、分离和收集步骤重复次数为四次。
[0024]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：由于本专利技术的一种外泌体的制备方法广泛应用于外泌体生产领域。本专利技术提供合理的制备工艺，通过对细胞培养后的观察，保证制备样品的质量，配合原料检测步骤可以对外泌体原料进行检测，保证外泌体制取后的质量，再经过多次的提纯、分离和收集后，可以进一步提高外泌体的制取质量，将检测后记录的数据进行上传，配合计算机的追溯系统，便于查询每一批外泌体的制备过程。
[0025]本专利技术提供一种外泌体的细胞培养箱，其密封盖上部安装有密封的通道，取样管可以从内侧穿过，保证密封的同时便于随时取样。
[0026]其技术方案是这样的：一种外泌体的细胞培养箱，包括培养保温箱1，培养保温箱1的内侧下部镶嵌有电加热管2，其特征在于，所述的培养保温箱1的内侧安装有支撑隔板3，支撑隔板3的内侧插接有培养皿4，支撑隔板3的内侧开设有通气口5，支撑隔板3的上部合页连接有透明密封盖6，透明密封盖6的上部安装有取样密封器组件7。
[0027]优选的，所述的取样密封器组件7包括连通管道71，所述的连通管道71的内侧上部胶接有尼龙密封垫72，连通管道71的内侧四角位置分别放置有橡胶转动片73，橡胶转动片73的下部胶接有金属弹片74。
[0028]优选的，所述的支撑隔板3位于电加热管2的上部，并且支撑隔板3的内侧盛放有加热水源。
附图说明
[0029]图1是外泌体的制备方法流程图。
[0030]图2是细胞培养流程图。
[0031]图3是分离预处理流程图。
[0032]图4是原料检测流程图。
[0033]图5是本专利技术的结构示意图。
[0034]图6是本专利技术的取样密封器组件的结构示意图。
[0035]图中：
[0036]1、培养保温箱；2、电加热管；3、支撑隔板；4、培养皿；5、通气口；6、透明密封盖；7、取样密封器组件；71、连通管道；72、尼龙密封垫；73、橡胶转动片；74、金属弹片。
具体实施方式
[0037]以下结合附图对本专利技术做进一步描述：
[0038]图中：
[0039]如附图1至图4所示
[0040]一种可以检测不同地质的矿用锚杆使用方法具体包括以下步骤：
[0041]S101：样品取样：先对取样工具进行消毒，再利用取样工具对需要培养的细胞样品进行取样，将取样后的细胞放入培养皿中；
[0042]S102：细胞培养，具体包括以下操作步骤：
[0043]S201：细胞检测：将每一个培养皿分别放置到显微镜下管观察，确认细胞的鲜活状态；
[0044]S202：放入培养箱：将挑选好的细胞样品统一归类放置之后送入细胞培养箱中；
[0045]S203：参数设定：将细胞培养箱的温度参数以及湿度参数按照标准设定好，并且设定和记录好培养时间；
[0046]S103：分离预处理，具体包括以下操作步骤：
[0047]S301：取出培养皿：工作人员先对全身进行消毒，再将培养好的细胞样品从细胞培养箱中取出，放置到显微镜旁的实验台上；
[0048]S302：样品观察：先将显微镜调节到四十倍放大，管擦混细胞生长情况，再将显微镜调到二百倍放大，再观察细胞状态；
[0049]S303：数值记录：利用计算机本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种外泌体的制备方法，其特征在于，该种外泌体的制备方法具体包括以下步骤：步骤一：样品取样：先对取样工具进行消毒，再利用取样工具对需要培养的细胞样品进行取样，将取样后的细胞放入培养皿中；步骤二：细胞培养；步骤三：分离预处理；步骤四：超高速分离：等细胞诱导到百分之八十以后将其收集起来放入细心管中，对离心管的开口处进行密封，再将吸力管放入超高速离心机中进行细心分离；步骤五：外泌体原料处理：将分离出来的外泌体原料收集起来，然后将剩余的杂质送入专门的处理室进行处理；步骤六：原料检测；步骤七：外泌体提纯：利用专用的提纯设备对外泌体初级原料进行提纯、分离和收集，反复提纯三次至五次；步骤八：外泌体分装：将合格的外泌体通过注射剂，分别装入专用存储瓶中，并且在晴子外侧粘贴名称标签。2.如权利要求1所述的一种外泌体的制备方法，其特征在于，在步骤二中，所述的细胞培养，具体包括以下操作步骤：第一步：细胞检测：将每一个培养皿分别放置到显微镜下管观察，确认细胞的鲜活状态；第二步：放入培养箱：将挑选好的细胞样品统一归类放置之后送入细胞培养箱中；第三步：参数设定：将细胞培养箱的温度参数以及湿度参数按照标准设定好，并且设定和记录好培养时间。3.如权利要求1所述的一种外泌体的制备方法，其特征在于，在步骤三中，所述的分离预处理，具体包括以下操作步骤：第一步：取出培养皿：工作人员先对全身进行消毒，再将培养好的细胞样品从细胞培养箱中取出，放置到显微镜旁的实验台上；第二步：样品观察：先将显微镜调节到四十倍放大，管擦混细胞生长情况，再将显微镜调到二百倍放大，再观察细胞状态；第三步：数值记录：利用计算机对细胞的各项数值进行激励，并且利用照相工具对细胞的放大图片进行拍照记录。4.如权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：程乐杰，马静，郭馨怡，艾妍君，高飞，温艳，
申请(专利权)人：乐杰海南生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：