琥珀酰二胺的制备方法及其抗菌活性的用途技术

本发明专利技术公开了一种ＳＣＤ的制备方法及其抗菌活性的用途，内容包括：（１）制备：以一株不动杆菌属的细菌菌株进行发酵生产。（２）分离提取：发酵液离心、减压浓缩、有机溶剂萃取、过硅胶层析柱、最后用丙酮重结晶，得到ＳＣＤ纯品。（３）结构解析：经紫外光谱、红外光谱、核磁共振谱及质谱确定结构为ＳＣＤ，结构如式２。（４）抑菌实验：对大肠杆菌等几种细菌具有抑制作用。（５）经对人脐带静脉内皮细胞增殖作用的影响实验表明，ＳＣＤ对人体细胞没有明显的毒性作用。本发明专利技术中ＳＣＤ具有新的结构、是个小分子化合物，容易透过组织和细胞，既可进行抗菌机制研究，又有开发成新型抗菌药物的潜力。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
琥珀酰二胺（Ｓｕｃｃｉｎａｍｉｄｅ　ｃｏｎｊｕｇａｔｅ　ｄｉａｃｉｄ，ＳＣＤ，化学结构如式１所示），其特征在于其制备方法如下：　＊＊＊　式１：琥珀酰二胺化学结构式　１－１、以ＰＤＡ为基础培养基，发酵制备琥珀酰二胺：　ａ） 菌种活化：从－２０℃保藏的菌种中取少量菌种接种到牛肉膏蛋白胨液体培养基中，于１５℃进行震荡培养（２００ｒｐｍ）４８ｈ进行活化，将菌悬液浓度调整为１０↑［６］～１０↑［７］ｃｅｌｌ／ｍＬ。　ｂ）发酵条件：发酵培养基为ＰＤＡ液体培养基，１ ％（ｖ／ｖ）接种量，１５～２０℃，ｐＨ　６．５～７．５，通空气量０．５～１．０ｖｖｍ，发酵３～５天。　１－２、琥珀酰二胺分离纯化：将发酵液于４℃进行离心（１５ｍｉｎ，８０００ｒｐｍ），收集上清液，并将上清进行减压浓缩；将浓缩后的上清液 用ＥｔＯＡｃ（乙酸乙酯）和ｎ－ＢｕＯＨ（正丁醇）进行萃取；将萃取产物回收，过硅胶层析柱，洗脱液为丙酮在石油醚中的浓度梯度（０～５０％），５０ｍＬ为一流分；将流分蒸发致干，点到硅胶板上，用石油醚：乙酸乙酯（３∶１）进行展开，把相同的Ｒｆ值（极性越小，Ｒｆ值越大）的样品合并在一起，最后用丙酮重结晶，得到式１所示的琥珀酰二胺纯品。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：辛明秀，常海涛，吴登峰，
申请(专利权)人：辛明秀，常海涛，吴登峰，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]