水痘－带状疱疹人免疫球蛋白及其原料生产方法技术

本发明专利技术涉及一种生物制品药物及原料制备方法，特别是涉及一种水痘－带状疱疹人免疫球蛋白及其原料的生产方法。本方法获得的免疫球蛋白含量大于总蛋白含量的９８％，Ｉｇ？Ｇ单体和二聚体含量大于９９％，水痘抗体效价大于等于１００ＩＵ／ｍｌ，蛋白质含量小于１２０ｇ／Ｌ，大大提高了产品纯度和稳定性、安全性，有效减少患者的副反应和潜在的不良反应。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种生物制品药物及原料制备方法，特别是涉及一种水痘-带状疱疹人免疫球蛋白及其原料的生产方法。
技术介绍
目前，全球特异性免疫球蛋白的应用越来越显示其临床重要性，无论是品种、应用 领域，还是适应症都在拓展，尤其是特异性高效价免疫球蛋白的应用增长显著。国际市场 特异性免疫球蛋白有乙型肝炎免疫球蛋白、抗D-免疫球蛋白、破伤风免疫球蛋白、狂犬病 免疫球蛋白、巨细胞病毒免疫球蛋白等，生产厂家多集中于美国、欧洲，如荷兰CLB和德国 Biotest等。而我国只有乙肝、破伤风、狂犬病三种特异性免疫球蛋白，水痘_带状疱疹免疫 球蛋白尚没有开发生产，随着人们对于可控疾病预防的认识，水痘_带状疱疹免疫球蛋白 的应用越来越引起人们重视，国际上临床需求正以每年20%递增，已远远不能满足市场需 求。 水痘-带状疱疹病毒在分娩期妇女、新生儿、器官移植手术、恶性血液病、恶性肿 瘤、肾病综合症等需要接受免疫抑制剂、细胞毒性药物或放射治疗的特殊人群中可发生致 死性感染，特别是孕妇患水痘，在国外的一项临床研究中，27名婴儿中有两名婴儿患有先天 畸形，被认为是与其母亲在妊娠前三个月患水痘从而导致子宫内水痘_带状疱疹病毒感染 有关。故对于高危易感人群，在暴露后的特定时间内，及时注射水痘_带状疱疹免疫球蛋白 可有效的预防水痘_带状疱疹的发病和其并发症的治疗，在国外水痘_带状疱疹免疫球蛋 白已成为预防水痘-带状疱疹及其并发症的重要急需用药。另外，由于抗生素的广泛应用 及滥用，使细菌耐药发生率逐年提高，严重影响感染性疾病的治疗效果，威胁着人们的身体 健康。 本专利产品是通过补充外源性天然活性水痘_带状疱疹免疫球蛋白来预防水痘 的发病和其并发症的治疗，并提高机体的免疫机制来达到预防或控制水痘一带状疱疹病毒 的感染。目前国内还没有自己的产品上市，完全依靠进口，价格昂贵且属国家限制的进口产 品，很多危重病人得不到及时治疗， 故其开发具有重要实际意义。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术所存在的不足，而提供了 一种水痘_带状疱疹人免疫球蛋白 及其原料——含高效价水痘抗体血浆的生产方法。 本专利技术提供的一种水痘_带状疱疹人免疫球蛋白，含有高效价的水痘抗体，纯度 超过98%，即免疫球蛋白含量大于总蛋白含量的98% ;Ig G单体和二聚体含量大于99X， 水痘抗体效价大于等于100IU/ml，蛋白质含量小于120g/L。 所述免疫球蛋白的使用量为每公斤体重用量20IU/kg。 水痘-带状疱疹人免疫球蛋白的生产方法，包括以下步骤3 (1)制备用于生产水痘-带状疱疹人免疫球蛋白的抗体效价大于8IU/ml的原料血 浆； (2)低温乙醇分级分离 (A)将冷冻血浆在不高于35t:的水槽中融化，破袋混匀，制备条件控制 pH5. 95±0. 05、乙醇浓度18-20 %、离子强度0. 09_0. 14、温度_5±0. 5°C，加入助滤剂，压滤，得组分i+n+ni。 (B)沉淀组分II :将组分I+II+III溶解，溶解温度0 5t:，溶解时间^ 2小时， 条件控制乙醇浓度12 16%，离子强度0.014-0. 016， pH5. 20±0. 05，沉淀过程中温度控 制在_4± 1°C 。压滤条件控制进液压力《0. 24Mpa，出液温度_4± 1°C ，得上清；上清调pH 至6. 8-7. 4，控制乙醇浓度20-26 % ，温度-8 ± 1°C ，压滤得组分11 。 (C)组分II沉淀溶解纯化溶解用水须符合注射用水标准，溶解温度1 8°C，溶 解时间^2小时。然后过滤、澄清，溶液须澄清透亮。超滤结束制品温度《15t:，残余乙醇 量《0. 025% 。超滤液采用0. 2 ii m微孔滤芯过滤。 (3)离子交换层析法纯化 将低温乙醇分离后的过滤除菌液上强阴离子交换树脂柱，选Q-S印haroseFF凝 胶，用以吸附大部分的白蛋白、大多数的IgA及I gM;流穿液再上弱阴离子交换树脂柱 DEAE-S印haroseFF，用来吸附微量IgM和其它杂蛋白等。得到IgG纯化液。 所述离子交换层析纯化的操作条件如下 (A)强阴离子交换树脂柱操作条件选Q-S印harose FF凝胶，先用p朋.2-7. 7的 0. 04-0. 08mol/L的醋酸盐缓冲平衡液平衡柱子至少5倍柱体积，至pH、紫外吸收值稳定。将 过滤除菌液上强阴离子交换树脂柱(选Q-S印haroseFF凝胶)，用以吸附大部分的白蛋白、 大多数的IgA及IgM ; (B)弱阴离子交换树脂柱操作条件选DEAE-S印harose FF凝胶，先用p朋.2_7. 7， 电导O. 8-1. 8mS/cm的醋酸盐缓冲平衡液平衡柱子至少5倍柱体积，至pH、紫外吸收值稳定。 流穿液调整至P朋.2-7. 7，用醋酸盐缓冲液调整电导至0. 8-1. 8mS/cm，再上已经平衡完毕 的弱阴离子交换树脂柱DEAE-S印haroseFF，用来吸附微量IgM和其它杂蛋白等。得到IgG 纯化液。 (4) IgG纯化液经低pH孵放灭活病毒处理。 每批制品必须经pH4. 1±0. 3，温度24士rC 25"孵育放置21天以灭活病毒。 (5)DVs。nm膜过滤除病毒，增加安全性。； (6)超滤、配液、除菌、分装，制得水痘_带状疱疹人免疫球蛋白。 上述步骤(1)中高效价原料血浆的制造方法为 (i)选择身体健康，符合国家《原料血浆采集规程》供浆标准的供血浆者； (ii)第0、7、14、28天，每次注射一剂人用纯化水痘减毒活疫苗，所使用的人水痘减毒活疫苗效价^4IU/支； (iii)检查供血者血浆的抗水痘抗体，当供浆者的血浆水痘抗体效价达到8IU/ml时，采集为合格血浆，封装保存，每次每人份采浆《600g ; (iv)当血浆抗体效价降至2IU/ml时，在注射1剂水痘减毒活疫苗。 本专利技术的有益效果可根据对上述方案的叙述得知，本专利技术所述水痘_带状疱疹人免疫球蛋白以高效价水痘抗体血浆为起始原料，采用低温乙醇分级分离和阴离子柱层析纯 化，大大提高了产品纯度和稳定性，有效减少患者的副反应和潜在的不良反应；用世界上公 认的效果可靠的低pH孵放法灭活经血液途径传播的病毒，再加纳米膜滤除病毒，确保产品 的安全性。水痘免疫球蛋白纯度超过98X、Ig G单体和二聚体含量大于99X，水痘抗体效 价> 100IU/ml，蛋白质含量〈120g/L。具体实施例方式下面结合具体实施例进一步说明本专利技术。 实施例1 (1)制备用于生产水痘-带状疱疹人免疫球蛋白的抗体效价大于8IU/ml的原料血 浆。(i)选择身体健康，符合国家《原料血浆采集规程》供浆标准的供血浆者； (ii)第0、7、14、28天，每次注射一剂人用纯化水痘减毒活疫苗，所使用的水痘减毒活疫苗效价^4IU/支； (iii)检查供血者血浆的抗水痘抗体，当供浆者的血浆水痘抗体效价达到8IU/ml时，采集为合格血浆，封装保存，每次每人份采浆《600g ; (iv)当血浆抗体效价降至2IU/ml时，在注射1剂水痘减毒活疫苗。 (2)低温乙醇分级分离。 (A)制备组分I+II+III :将冷冻血桨在不高于33t:的水槽中融化，破袋混匀，调 pH5. 95、乙醇浓度19%、离子强度0. 11、温度-5"，搅拌反应3本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种水痘－带状疱疹人免疫球蛋白，其特征是：免疫球蛋白含量大于总蛋白含量的９８％，水痘抗体效价大于等于１００ＩＵ／ｍｌ，蛋白质含量小于１２０ｇ／Ｌ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：庞广礼，马山，曹强庚，仲立军，林锋，李庆英，李荣贞，冯卫国，
申请(专利权)人：山东泰邦生物制品有限公司，
类型：发明
国别省市：37[中国|山东]