本发明专利技术提供了一种猪禽替抗添加剂及其筛选方法，属于饲料添加剂技术领域。本发明专利技术采用体外消化实验对猪禽替抗添加剂进行筛选，无需进行饲养实验即可快速实现单一猪禽替抗添加剂的添加量、复配猪禽替抗添加剂的种类及其添加量的确定，猪禽替抗添加剂的筛选周期短、效率高且成本低。而且，采用本发明专利技术提供的筛选方法得到的猪禽替抗添加剂的胃肠液耐受性好，温度耐受性好，储存时间长，能够提高猪和家禽等动物的回肠干物质及有机物消化率，动物日增重比例高，饲料料重比低，能够提高饲料利用率，很好的代替饲料抗生素。好的代替饲料抗生素。
【技术实现步骤摘要】
一种猪禽替抗添加剂及其筛选方法
[0001]本专利技术涉及饲料添加剂
，具体涉及一种猪禽替抗添加剂及其筛选方法。
技术介绍
[0002]自1949年Stokad等发现饲喂金霉素对家禽生长具有促进作用以来，抗生素在养殖业中预防动物疾病、促进动物生长及提高养殖业产量起到了积极的作用。但是，近年来，抗生素的滥用导致的各种危害，如不良反应、过敏反应、变态反应、细菌耐药、菌群失调，“三致”作用等已成为一个世界性难题。1986年瑞典全面禁止抗生素促生长剂在动物饲料中应用，一些发达国家也对此相继颁布法规和措施。因此，发展多功能、多类别且无毒、无残留、无副作用的绿色替抗生素饲料替抗添加剂(简称替抗添加剂)成为现代健康养殖和社会发展的必然需求。
[0003]现有的替抗添加剂筛选方法主要为饲养实验。然而，添加剂种类众多，采用饲养实验法筛选添加剂的周期长，以肉鸡为例一般饲养21天以上。
技术实现思路
[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种猪禽替抗添加剂及其筛选方法，本专利技术提供的筛选方法获得合格猪禽替抗添加剂的周期短且成本低。
[0005]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0006]本专利技术提供了一种猪禽替抗添加剂的筛选方法，包括以下步骤：
[0007](1)将待选猪禽替抗添加剂、胃蛋白酶溶液和饲料混合，进行第一孵育，得到孵育样品液；
[0008](2)将胃蛋白酶溶液和饲料混合，进行第二孵育，得到孵育对照液；
[0009](3)分别将所述孵育样品液和所述孵育对照液与动物十二指肠肠液混合，进行第三孵育，分别得到消化反应样品肠液和消化反应对照肠液；
[0010](4)测试所述消化反应样品肠液和消化反应对照肠液的消化率，分别得到样品消化率和对照消化率，当所述样品消化率与对照消化率的显著性P<0.05时，所述待选猪禽替抗添加剂为目标猪禽替抗添加剂；所述消化率包括干物质消化率和/有机物消化率；
[0011]步骤(1)和步骤(2)没有时间先后顺序。
[0012]优选地，所述步骤(3)后还包括：
[0013](5)分别将所述消化反应样品肠液和消化反应对照肠液接种于含革兰氏杆菌的培养基中，进行培养，分别得到样品菌落数和对照菌落数，当所述样品菌落数与对照菌落数的显著性P<0.05时，所述待选猪禽替抗添加剂为目标猪禽替抗添加剂；所述革兰氏杆菌包括革兰氏阳性杆菌和/或革兰氏阴性杆菌；
[0014]步骤(4)和步骤(5)没有时间先后顺序。
[0015]优选地，所述步骤(3)后还包括：
[0016](6)分别测试所述消化反应样品肠液和消化反应对照肠液的自由基清除率，分别
得到样品自由基清除率和对照自由基清除率，当所述样品自由基清除率与对照自由基清除率的显著性P<0.05时，所述待选猪禽替抗添加剂为目标猪禽替抗添加剂；所述自由基包括1,1
‑
二苯基
‑2‑
苦基肼自由基、4
‑
苄酰氧基
‑
四甲基哌啶氧自由基、16
‑
DOXYL
‑
硬脂酸自由基和氮氧自由基哌啶醇中的一种或几种；
[0017]步骤(4)和步骤(6)没有时间先后顺序；
[0018]步骤(5)和步骤(6)没有时间先后顺序。
[0019]优选地，所述待选猪禽替抗添加剂的种类包括丁酸钠、胍基乙酸、甘露寡糖、果寡糖、葡萄糖氧化酶、甘露聚糖酶、植酸酶、木聚糖酶和枯草芽孢杆菌中的至少一种；以饲料为基准，所述丁酸钠的添加量为0.1～3g/kg；所述胍基乙酸的添加量为0.3～2g/kg；所述甘露寡糖的添加量为0.3～4.0g/kg；所述果寡糖添加量为1～16g/kg；所述葡萄糖氧化酶的添加量为200～2000U/kg；所述甘露聚糖酶的添加量为2000～25000U/kg；所述植酸酶的添加量为200～20000U/kg；所述木聚糖酶的添加量为500～3000U/kg；所述枯草芽孢杆菌添加量为5
×
106～5
×
10
14
cfu/kg。
[0020]优选地，所述动物十二指肠肠液在使用前依次进行生理盐水稀释和离心分离。
[0021]优选地，所述胃蛋白酶溶液的酶活力与饲料的质量之比为2.0
×
107～3.0
×
107U：1kg。
[0022]优选地，所述第一孵育、第二孵育和第三孵育的温度独立地为20～50℃，时间独立地为1～8h。
[0023]优选地，所述培养的温度为20～50℃，时间为1～8h。
[0024]本专利技术提供了上述技术方案所述筛选方法得到的猪禽替抗添加剂，包括丁酸钠、甘露寡糖、果寡糖、甘露聚糖酶、植酸酶和枯草芽孢杆菌中的至少两种；以饲料为基准，所述甘露寡糖添加量为1.0～3.0g/kg，所述果寡糖的添加量为5～12g/kg，所述甘露聚糖酶添加量为6000～18000U/kg，所述植酸酶添加量为800～15000U/kg，所述枯草芽孢杆菌添加量为5
×
109～5
×
10
11
cfu/kg。
[0025]优选地，包括甘露寡糖
‑
果寡糖
‑
枯草芽孢杆菌复配猪禽替抗添加剂、甘露寡糖
‑
甘露聚糖酶
‑
枯草芽孢杆菌复配猪禽替抗添加剂、甘露寡糖
‑
甘露聚糖酶
‑
丁酸钠复配猪禽替抗添加剂、甘露寡糖
‑
果寡糖
‑
甘露聚糖酶复配猪禽替抗添加剂、甘露寡糖
‑
果寡糖
‑
丁酸钠复配猪禽替抗添加剂或甘露寡糖
‑
枯草芽孢杆菌
‑
植酸酶复配猪禽替抗添加剂。
[0026]本专利技术提供了一种猪禽替抗添加剂的筛选方法，包括以下步骤：(1)将待选猪禽替抗添加剂、胃蛋白酶溶液和饲料混合，进行第一孵育，得到孵育样品液；(2)将胃蛋白酶溶液和饲料混合，进行第二孵育，得到孵育对照液；(3)分别将所述孵育样品液和所述孵育对照液与动物十二指肠肠液混合，进行第三孵育，分别得到消化反应样品肠液和消化反应对照肠液；(4)测试所述消化反应样品肠液和消化反应对照肠液的消化率，分别得到样品消化率和对照消化率，当所述样品消化率与对照消化率的显著性P<0.05时，所述待选猪禽替抗添加剂为目标猪禽替抗添加剂；所述消化率包括干物质消化率和/或有机物消化率；步骤(1)和步骤(2)没有时间先后顺序。传统的饲养实验法筛选猪禽替抗添加剂，需要将不同添加量的单一添加剂、不同种类及不同添加量的复配添加剂分别混到饲料中，以含有添加剂的饲料喂养动物，以鸡为例一般饲养21天或42天，然后测试其生长性能以确定添加剂对动物生长性能(如平均日增重、料重比、死淘率)的影响。而本专利技术采用体外消化实验对猪禽替抗添本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种猪禽替抗添加剂的筛选方法，包括以下步骤：(1)将待选猪禽替抗添加剂、胃蛋白酶溶液和饲料混合，进行第一孵育，得到孵育样品液；(2)将胃蛋白酶溶液和饲料混合，进行第二孵育，得到孵育对照液；(3)分别将所述孵育样品液和所述孵育对照液与动物十二指肠肠液混合，进行第三孵育，分别得到消化反应样品肠液和消化反应对照肠液；(4)测试所述消化反应样品肠液和消化反应对照肠液的消化率，分别得到样品消化率和对照消化率，当所述样品消化率与对照消化率的显著性P<0.05时，所述待选猪禽替抗添加剂为目标猪禽替抗添加剂；所述消化率包括干物质消化率和/或有机物消化率；步骤(1)和步骤(2)没有时间先后顺序。2.根据权利要求1所述的筛选方法，其特征在于，所述步骤(3)后还包括：(5)分别将所述消化反应样品肠液和消化反应对照肠液接种于含革兰氏杆菌的培养基中，进行培养，分别得到样品菌落数和对照菌落数，当所述样品菌落数与对照菌落数的显著性P<0.05时，所述待选猪禽替抗添加剂为目标猪禽替抗添加剂；所述革兰氏杆菌包括革兰氏阳性杆菌和/或革兰氏阴性杆菌；步骤(4)和步骤(5)没有时间先后顺序。3.根据权利要求2所述的筛选方法，其特征在于，所述步骤(3)后还包括：(6)分别测试所述消化反应样品肠液和消化反应对照肠液的自由基清除率，分别得到样品自由基清除率和对照自由基清除率，当所述样品自由基清除率与对照自由基清除率的显著性P<0.05时，所述待选猪禽替抗添加剂为目标猪禽替抗添加剂；所述自由基包括1,1
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二苯基
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苦基肼自由基、4
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苄酰氧基
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四甲基哌啶氧自由基、16
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DOXYL
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硬脂酸自由基和氮氧自由基哌啶醇中的一种或几种；步骤(4)和步骤(6)没有时间先后顺序；步骤(5)和步骤(6)没有时间先后顺序。4.根据权利要求1所述的筛选方法，其特征在于，所述待选猪禽替抗添加剂的种类包括丁酸钠、胍基乙酸、甘露寡糖、果寡糖、葡萄糖氧化酶、甘露聚糖酶、植酸酶、木聚糖酶和枯草芽孢杆菌中的至少一种；以饲料为基准，所述丁酸钠的添加量为0.1～3g/kg；所述胍基乙酸的添加量为0.3～2g/kg；所述甘露寡糖的添加量为0.3～4.0g/kg；所述果寡糖添加量为1～16g/k...
【专利技术属性】
技术研发人员：张贝贝，李尊严，郭艺璇，朱风华，林英庭，
申请(专利权)人：青岛农业大学，
类型：发明
国别省市：
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