用于非小细胞肺癌诊断的circRNA-miRNA-mRNA调控网络及其应用制造技术

本发明专利技术公开了用于非小细胞肺癌诊断的circRNA

【技术实现步骤摘要】
用于非小细胞肺癌诊断的circRNA
‑
miRNA
‑
mRNA调控网络及其应用


[0001]本专利技术涉及肺癌辅助诊断
，尤其是涉及用于非小细胞肺癌诊断的circRNA
‑
miRNA
‑
mRNA调控网络及其应用。

技术介绍

[0002]2020年全球癌症数据显示，肺癌是死亡率最高的癌症类型。非小细胞肺癌(non
‑
small cell lung cancer，NSCLC)是肺癌的主要病理类型，约占肺癌病例的85%。据统计，NSCLC患者的五年生存率仅为20%
‑
30%。因为NSCLC在早期阶段往往无症状或症状不明显，患者在首次诊断时已处于晚期，失去手术机会，同时NSCLC治疗方案有限，导致患者预后差。因此，肺癌的早期筛查对提高生存率和降低肺癌死亡率至关重要。
[0003]目前，早期肺癌非侵入性筛查可以基于低剂量计算机断层扫描(computed tomography，CT)和液体活检生物标志物。其中液体活检因其微创、实时监测和易获得的优点在早期筛查、测量治疗反应和预测肺癌预后方面具有优势。临床上液体活检常见的肿瘤标志物除了癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)、神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase，NSE)、细胞角蛋白19片段(cytokeratin 19 fragment， CYFRA21
‑
1)外，还包括循环肿瘤细胞(circulating tumor cells，CTCs)、 微小RNA(microRNAs，miRNAs)、长链非编码RNA(long noncoding RNAs，lncRNAs)、环状RNA(circular RNAs，circRNAs)和外泌体(exosomes)。在过去的二十年，大量文献表明循环miRNAs、lncRNAs和circRNAs在非小细胞肺癌的早期发现，治疗阶段和预后检测中具有广阔的潜力。
[0004]大量的研究表明，非编码RNA(如miRNAs、lncRNAs和circRNAs)作为液体活检的非侵袭性生物标志物，在癌症发生发展中起重要作用，而竞争性内源RNA(competing endogenous RNA，ceRNA)作为一种全新的基因表达调控模式，较其他调控网络更为精细和复杂，涉及的RNA分子更丰富，在多种疾病尤其是癌症中起重要作用。最近的研究证实基于ceRNA机制的circRNA
‑
miRNA
‑
mRNA信号级联参与了肿瘤的发生和发展。因此circRNA
‑
miRNA
‑
mRNA调控网络被认为具有作为一种新的肿瘤生物标志物的潜力，其与单纯的circRNA或miRNA相比，具有更高的敏感性和特异性。近期研究表明，circRNAs通过 miRNA应答元件(microRNA response elements，MREs)与靶miRNA结合使miRNAs对其靶肿瘤相关基因的去抑制，在NSCLC的发生和发展中发挥重要作用。例如，据报道，在NSCLC组织中，circ
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CPA4通过海绵化吸附let
‑
7 miRNA上调程序性细胞死亡配体
‑
1(programmed cell death ligand
‑
1，PD
‑
L1)的表达。此调控网络在肿瘤微环境中使CD8
+ T细胞失活，影响肺癌细胞的生长，干细胞特性以及耐药性。由此可见，circ
‑
CPA4
‑
let
‑
7 miRNA
‑
PD
‑
L1调控网络在肺癌中起重要作用。
[0005]因此，考虑到circRNA
‑
miRNA
‑
mRNA信号级联对NSCLC的重要作用，我们认为circRNA
‑
miRNA
‑
mRNA调控轴反映了一个更全面的基因调控网络，可能对NSCLC早期诊断具有更高的敏感性和特异性。目前，国内外鲜有关于ceRNA网络分析与非小细胞肺癌相关的研
究报道。

技术实现思路

[0006]本专利技术所要解决的技术问题是提供一种特异性强、灵敏度高的用于非小细胞肺癌诊断的circRNA
‑
miRNA
‑
mRNA调控网络及其应用，其中hsa
‑
miR
‑
3180
‑
5p表达量与非小细胞肺癌患病呈负相关，hsa_circ_0061235和PPM1L表达量与非小细胞肺癌患病风险呈正相关。
[0007]本专利技术解决上述技术问题所采用的技术方案为：1、一种用于非小细胞肺癌诊断的circRNA
‑
miRNA
‑
mRNA调控网络，所述的circRNA
‑
miRNA
‑
mRNA调控网络中circRNA基因为hsa_circ_0061235， miRNA基因为hsa
‑
miR
‑
3180
‑
5p，mRNA基因为蛋白磷酸酶Mg
2+
/Mn
2+
依赖性1L(Protein phosphatase Mg
2+
/Mn
2+ dependent 1L，PPM1L)。
[0008]2、上述用于非小细胞肺癌诊断的circRNA
‑
miRNA
‑
mRNA调控网络在制备非小细胞肺癌早期诊断或检测药物方面的应用。
[0009]进一步，所述的药物在肺癌早期诊断或检测中促进hsa_circ_0061235和/或PPM1L的表达，同时抑制hsa
‑
miR
‑
3180
‑
5p基因的表达。
[0010]3、上述用于非小细胞肺癌诊断的circRNA
‑
miRNA
‑
mRNA调控网络在制备非小细胞肺癌早期诊断或检测试剂盒方面的应用。
[0011]进一步，所述的试剂盒包括hsa_circ_0061235荧光定量PCR特异性上游引物：5
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TGTTCACGCTAGCCAACCTA
ꢀ‑3’
；hsa_circ_0061235荧光定量PCR特异性下游引物：5
’‑ꢀ
TCATCATTCACAGCTTCCCG
ꢀ‑3’
；hsa
‑
miR
‑
3180
‑
5p特异性逆转录茎环引物：5
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CTCAACTGGTGTCGTGGAGTCGGCAATTCAGTTGAGCGACGTGG
ꢀ‑3’<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于非小细胞肺癌诊断的circRNA
‑
miRNA
‑
mRNA调控网络，其特征在于：所述的circRNA
‑
miRNA
‑
mRNA调控网络中circRNA基因为 hsa_circ_0061235，miRNA基因为hsa
‑
miR
‑
3180
‑
5p，mRNA基因为PPM1L。2.一种权利要求1所述的用于非小细胞肺癌诊断的circRNA
‑
miRNA
‑
mRNA调控网络在制备非小细胞肺癌早期诊断或检测药物方面的应用。3.根据权利要求2所述的用于非小细胞肺癌诊断的circRNA
‑
miRNA
‑
mRNA调控网络在制备非小细胞肺癌早期诊断或检测药物方面的应用，其特征在于：所述的药物在肺癌早期诊断或检测中促进了hsa_circ_0061235和/或PPM1L基因的表达，同时抑制了hsa
‑
miR
‑
3180
‑
5p基因的表达。4.一种权利要求1所述的用于非小细胞肺癌诊断的circRNA
‑
miRNA
‑
mRNA调控网络在制备非小细胞肺癌早期诊断或检测试剂盒方面的应用。5.根据权利要求4所述的用于非小细胞肺癌诊断的circRNA
‑
miRNA
‑
mRNA调控网络在制备非小细胞肺癌早期诊断或检测试剂盒方面的应用，其特征在于：所述的试剂盒包括hsa_circ_0061235荧光定量PCR特异性上游引物：5
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【专利技术属性】
技术研发人员：赵一锴，孟小丹，杨佳诺，马欣怡，陈振华，何翊瑜，李乐怡，
申请(专利权)人：宁波大学，
类型：发明
国别省市：