一种光控法生产工业大麻雌化种子的方法技术

本发明专利技术涉及一种光控法生产工业大麻雌化种子的方法，属于经济作物栽培技术领域。为解决现有工业大麻雌化种子生产方法成本高、过程复杂且存在环境污染的问题，本发明专利技术提供了一种光控法生产工业大麻雌化种子的方法，步骤包括育苗、性别分子鉴定、营养生长、诱导花粉、授粉和种子成熟。本发明专利技术提供的光控法生产工业大麻雌化种子的方法利用光照时间的控制，诱导雌株产生部分雄花并以此雄花花粉给雌株授粉杂交，从而获得遗传性状一致的工业大麻雌化种子。本发明专利技术无需喷施化学药剂进行诱导，仅通过光调节即可实现在雌株上的雄花诱导，操作简单、绿色环保、结果可靠；也可利用北方冬季的短日照，在温室操作达到目的，易于推广。易于推广。易于推广。

【技术实现步骤摘要】
一种光控法生产工业大麻雌化种子的方法


[0001]本专利技术属于经济作物栽培
，尤其涉及一种光控法生产工业大麻雌化种子的方法。

技术介绍

[0002]四氢大麻酚THC含量低于0.3%的大麻称为工业大麻。目前工业大麻中医用价值最高的成分为大麻二酚CBD，CBD 不仅没有致幻效果，反而可以减轻或抵消THC的活性，在减轻炎症、疼痛、焦虑、精神疾病、癫痫等方面具有很大的应用价值，市场需求增长显著。
[0003]工业大麻为雌雄异株，大麻二酚等大麻素主要存在于雌株花叶部位的树脂腺体内，雄株基本不含大麻二酚。雄株不结籽，开花授粉完成后会自然死亡，在田间生产中所有的雄株必须及时清除，否则雄株花粉会导致大量雌株授粉结实，授粉的雌株积累的营养物质会转化为种子发育所用而停止合成大麻二酚，严重影响雌株中有效药物成分的积累。而且雌雄异株自然授粉结实的后代雌株由于随机分离而缺乏一致性，株高、株型、生育期、大麻素含量等均不相同，不适宜工业大麻的大规模生产种植。
[0004]工业大麻的雌化种子不但可以免去费工费时的去雄工作，还能保证后代雌株性状的一致性，能够满足工业大麻的大规模生产种植。现有工业大麻雌化种子的生产主要是应用银离子诱导，成本高、过程复杂且存在环境污染的问题。

技术实现思路

[0005]为解决现有工业大麻雌化种子生产方法成本高、过程复杂且存在环境污染的问题，本专利技术提供了一种光控法生产工业大麻雌化种子的方法。
[0006]本专利技术的技术方案：一种光控法生产工业大麻雌化种子的方法，步骤如下：步骤一、育苗：工业大麻种子在水中浸泡后播种，培养至出苗；步骤二、性别分子鉴定：工业大麻出苗20天后，采集幼嫩真叶提取DNA进行雌雄鉴定；步骤三、营养生长：鉴定为雌株的幼苗移栽到盆中进行营养生长；步骤四、诱导花粉：苗高30厘米时，将光照周期调整为8小时光照，16小时黑暗，光照强度PPED为1300~1500，持续15天后雌株开花，随着时间的推移部分雌株出现雄花；步骤五、授粉：当产生的雄花开始散粉后，人工辅助吹散花粉使周边雌株均匀授粉；步骤六、种子成熟：授粉过程结束后，将光照周期调整为12小时光照，12小时黑暗，光照强度PPED为1300~1500，包叶开口，种子变黑色后即可收获。
[0007]进一步的，步骤一育苗中所述浸泡为工业大麻种子在30℃温水中浸泡12小时，所述培养至出苗的培养温度为22~28℃，相对湿度为65~85%，光照强度PPED为600~900，光照周期为18小时光照。
[0008]进一步的，步骤二性别分子鉴定的方法为：取0.2g工业大麻幼嫩真叶，利用DNA提取试剂盒提取工业大麻DNA，以所提取的工业大麻DNA为模板利用MR
‑
1/MR
‑
2特异引物进行PCR扩增，根据扩增产物的长度鉴定雌雄，雌株的扩增产物长度为450bp，雄株的扩增产物长度为350bp。
[0009]进一步的，所述MR
‑
1/MR
‑
2特异引物的序列为：F: 5'
‑
CTCCTACGGGAGGCAGCAGCCT
‑
3'，R: 5'
‑
ATTACCGCGCTGCTGGCTCGT
‑
3'。
[0010]进一步的，步骤三营养生长盆中栽培基质为质量比为2:3:5的珍珠岩、草炭土和农田土，施用的液态肥浓度为250ppm，其中氮磷钾的质量比为3:1:2，每2天施肥一次，每次施肥量为5~10g/盆。
[0011]进一步的，步骤三营养生长的培养温度为24~30℃，相对湿度为65~85%，光照强度PPED为900，光照周期为18小时光照，保持良好的通风。
[0012]进一步的，步骤四诱导花粉阶段培养温度为24~30℃，保持良好的通风，施用的液态肥浓度为200ppm，其中氮磷钾的质量比为1:3:5，每2天施肥一次，每次施肥量为5~10g/盆。
[0013]进一步的，步骤五授粉阶段将室内湿度控制在45%，每天在上午10~12点用手持吹风机辅助吹散花粉，边吹边敲打散粉的花序，每天转换方向，使周边雌株均匀授粉。
[0014]进一步的，步骤六种子成熟阶段的培养温度为24~30℃，相对湿度为45~65%，保持良好的通风。
[0015]进一步的，步骤六种子成熟阶段每周喷施磷酸二氢钾一次，每次施肥量为800~1000倍液，均匀喷施。
[0016]本专利技术的有益效果：本专利技术提供的光控法生产工业大麻雌化种子的方法利用光照时间的控制，诱导雌株产生部分雄花并以此雄花花粉给雌株授粉杂交，从而获得遗传性状一致的工业大麻雌化种子。每株雌株可产600粒种子，雌化率达到97%，雌化种子的发芽率达到85%以上。本专利技术无需喷施化学药剂进行诱导，仅通过光调节即可实现在雌株上的雄花诱导，操作简单、绿色环保、结果可靠；也可利用北方冬季的短日照，在温室操作达到目的，易于推广。
附图说明
[0017]图1为实施例1得到的工业大麻雌化种子的照片。
具体实施方式
[0018]下面结合实施例对本专利技术的技术方案做进一步的说明，但并不局限于此，凡是对本专利技术技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本专利技术技术方案的精神和范围，均应涵盖在本专利技术的保护范围中。下列实施例中未具体注明的工艺设备或装置均采用本领域内的常规设备或装置，若未特别指明，本专利技术实施例中所用的原料等均可市售获得；若未具体指明，本专利技术实施例中所用的技术手段均为本领域技术人员所熟知的常规手段。
[0019]实施例1本实施例以工业大麻品种：新麻1号为试验材料，提供了一种光控法生产工业大麻雌化种子的方法，步骤如下：
步骤一、育苗：将新麻1号种子在30℃温水中浸泡12小时，然后播种于32孔椰糠基质育秧盘中，覆土1厘米，温度控制在26℃，相对湿度为70%，光照强度PPED为800，光照周期为18小时光照，适度控水，防止徒长。
[0020]步骤二、性别分子鉴定：工业大麻出苗后23天，采集幼嫩真叶用无菌水洗净擦干，取0.2g放入1.5mL离心管中。利用DNA提取试剂盒提取工业大麻DNA，提取后于
‑
20℃中保存备用。分别利用1%琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计对DNA纯度、含量、浓度进行检测。
[0021]以所提取的工业大麻DNA为模板利用MR
‑
1/MR
‑
2特异引物进行PCR扩增，MR
‑
1/MR
‑
2特异引物的序列为：F: 5'
‑
CTCCTACGGGAGGCAGCAGCCT
‑
3'，R: 5'
‑
ATTACCGCGCTGCTGGCTCGT
‑
3'。
[0022]PCR反应体系为：反应总体积为10μL，其中DNA模板2μL、上下游引物各1μL、PCR
‑
mix 5μL、余量为ddH2O。
[0023]PCR扩增程序为：9本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种光控法生产工业大麻雌化种子的方法，其特征在于，步骤如下：步骤一、育苗：工业大麻种子在水中浸泡后播种，培养至出苗；步骤二、性别分子鉴定：工业大麻出苗20天后，采集幼嫩真叶提取DNA进行雌雄鉴定；步骤三、营养生长：鉴定为雌株的幼苗移栽到盆中进行营养生长；步骤四、诱导花粉：苗高30厘米时，将光照周期调整为8小时光照，16小时黑暗，光照强度PPED为1300~1500，持续15天后雌株开花，随着时间的推移部分雌株出现雄花；步骤五、授粉：当产生的雄花开始散粉后，人工辅助吹散花粉使周边雌株均匀授粉；步骤六、种子成熟：授粉过程结束后，将光照周期调整为12小时光照，12小时黑暗，光照强度PPED为1300~1500，包叶开口，种子变黑色后即可收获。2.根据权利要求1所述一种光控法生产工业大麻雌化种子的方法，其特征在于，步骤一育苗中所述浸泡为工业大麻种子在30℃温水中浸泡12小时，所述培养至出苗的培养温度为22~28℃，相对湿度为65~85%，光照强度PPED为600~900，光照周期为18小时光照。3.根据权利要求1或2所述一种光控法生产工业大麻雌化种子的方法，其特征在于，步骤二性别分子鉴定的方法为：取0.2g工业大麻幼嫩真叶，利用DNA提取试剂盒提取工业大麻DNA，以所提取的工业大麻DNA为模板利用MR
‑
1/MR
‑
2特异引物进行PCR扩增，根据扩增产物的长度鉴定雌雄，雌株的扩增产物长度为446bp，雄株的扩增产物长度为355bp。4.根据权利要求3所述一种光控法生产工业大麻雌化种子的方法，其特征在于，所述MR
‑
1/MR
‑
2特异引物的序列为：F...

【专利技术属性】
技术研发人员：王宇红，吴广文，唐立郦，
申请(专利权)人：黑龙江一科麻生物科技有限公司黑龙江省农业科学院经济作物研究所，
类型：发明
国别省市：