一种贝莱斯芽孢杆菌及其在食品低盐发酵中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种贝莱斯芽孢杆菌及其在食品低盐发酵中的应用，属于食品生物技术领域，具体涉及一株可产抗菌物质的贝莱斯芽孢杆菌及其在食品低盐发酵中的应用。本发明专利技术提供一株贝莱斯芽孢杆菌DL

【技术实现步骤摘要】
一种贝莱斯芽孢杆菌及其在食品低盐发酵中的应用


[0001]本专利技术涉及一种贝莱斯芽孢杆菌及其在食品低盐发酵中的应用，具体涉及一种大酱中分离出的具有抗菌物质生产能力的贝莱斯芽孢杆菌及其应用，属于食品生物


技术介绍

[0002]豆瓣酱、大酱等发酵食品具有独特的“色、香、味、形”，深受消费者喜爱。豆瓣酱、大酱等发酵食品多为自然发酵，日晒夜露，为了保证食用安全性，这些发酵食品生产中的氯化钠添加量通常高达18
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20％。较高的氯化钠含量容易引发消费者高血压和心血管病等，不利于健康。随着减糖减盐和食品安全的宣传，人们对健康的日益关注，低盐发酵食品受到越来越多消费者的青睐。
[0003]芽孢菌对低盐发酵豆制品的安全、风味和营养品质具有重要影响。研究表明，芽孢菌能通过产脂肽、抗菌肽和细菌素来抑制低盐发酵豆制品中有害菌生长，保证低盐发酵豆制品的微生物安全性；芽孢菌可以代谢碳水化合物、蛋白质和脂肪，产生酸类、酯类、肽等风味物质，从而提高低盐发酵豆制品的感官和风味品质。近年来，可用于低盐发酵豆制品的芽孢菌的研究与应用逐渐受到关注。
[0004]中国专利CN111248409A公开了一种低盐豆瓣酱及其制作方法，其在豆瓣酱醅发酵阶段添加肉葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、融合魏斯氏乳杆菌和鲁氏结合酵母作为核心菌混合发酵剂，进行低盐豆瓣酱的制作；中国专利CN108967904A则使用米曲霉、嗜盐片球菌、雅致放射毛霉、欧芹、莳萝、牛至的豆瓣进行发酵；利用嗜盐片球菌、嗜盐四联球菌对辣椒进行发酵郁；将发酵好的豆瓣及酱醅与发酵好的辣椒酱混合后，巴斯德毕赤酵母菌、肠膜明串珠菌进行后发酵，从而进行低盐豆瓣酱的制作。目前的低盐发酵是一种多菌种协同、功能性物质混合发酵制备低盐豆瓣酱的复配菌剂的发酵策略，是通过多菌种大剂量接种优先达到种群优势，从而防止有害菌的过度繁殖。但并未完全消除有害菌污染威胁。

技术实现思路

[0005]针对上述问题，本专利技术提供一种可产抗菌物质的益生贝莱斯芽孢杆菌及其在食品低盐发酵中的应用。
[0006]本专利技术通过下述技术方案实现：
[0007]本专利技术提供一株分离自发酵食品的贝莱斯芽孢杆菌DL
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BJ01，保藏编号CGMCC No.23531。本专利技术涉及的贝莱斯芽孢杆菌DL
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BJ01采集自辽宁省农家大酱中，已于2021年10月08日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
[0008]在一种实施方式中，所述贝莱斯芽孢杆菌DL
‑
BJ01具有如下性质：
[0009](1)采集自辽宁省农家大酱中；
[0010](2)可同时产蛋白酶、氨肽酶和羧肽酶；
[0011](3)抗生素敏感型；
[0012](4)无溶血作用；
[0013](5)对胃肠道具有良好耐受性；
[0014](6)具备良好的抗氧化性能。
[0015]本专利技术提供一种发酵剂，是由贝莱斯芽孢杆菌DL
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BJ01经发酵培养制备得到。
[0016]在一种实施方式中，所述发酵剂包含贝莱斯芽孢杆菌DL
‑
BJ01或包含贝莱斯芽孢杆菌DL
‑
BJ01及其发酵上清液。
[0017]优选地，所述发酵剂中贝莱斯芽孢杆菌DL
‑
BJ01以活菌形式存在。
[0018]优选地，所述发酵剂还可含有冻干保护剂。
[0019]本专利技术提供所述发酵剂的制备方法，所述方法包括将贝莱斯芽孢杆菌DL
‑
BJ01经培养获得菌液的步骤：
[0020](1)挑取贝莱斯芽孢杆菌DL
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BJ01单菌落接种至10mL LB培养基，并于30
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37℃、200
‑
250rpm条件下好氧培养24h，得菌液A；
[0021](2)随后取500μL所述菌液A接种至50mL LB培养基中，30～37℃、200～250rpm条件下好氧培养24h，得菌液B；随后取10mL所述菌液B接种至1000mL LB培养基中，30～37℃、200～250rpm条件下好氧培养24h，得菌液C；
[0022](3)将所述菌液C置于8000rpm离心10min后收集菌体，将贝莱斯芽孢杆菌DL
‑
BJ01菌体用质量分数为0.9％氯化钠水溶液稀释，制备成10
10
～10
12
CFU/mL的菌悬液。
[0023]优选地，所述培养为在37℃条件下进行。
[0024]在一种实施方式中，培养使用的培养基包括但不限于LB培养和营养肉汤培养基等芽孢菌常用的培养基。
[0025]上述获得的菌液可直接或加入微生物制剂领域允许的辅料制备为液体菌剂或发酵剂，也可收集菌液中的菌体与冻干保护剂等微生物制剂领域允许的辅料混合后经真空冷冻干燥制备为干粉菌剂或发酵剂。
[0026]优选地，所述菌剂或发酵剂中，贝莱斯芽孢杆菌DL
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BJ01的活菌含量为10
12
CFU/g。
[0027]本专利技术提供贝莱斯芽孢杆菌DL
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BJ01或所述发酵剂在低盐发酵食品制备中的应用。
[0028]在一种实施方式中，所述发酵食品优选为发酵豆制品。
[0029]优选地，所述低盐发酵食品为低盐条件下发酵豆瓣酱、黄豆酱和酱油。
[0030]在一种实施方式中，所述低盐条件为发酵体系中盐终浓度为6％～8％。
[0031]在一种实施方式中，在豆瓣酱、黄豆酱和酱油的发酵前添加所述贝莱斯芽孢杆菌DL
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BJ01或所述发酵剂进行发酵。
[0032]在一种实施方式中，所述贝莱斯芽孢杆菌DL
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BJ01在初始发酵体系中的菌浓不低于106CFU/mL或106CFU/g。
[0033]本申请中所使用的贝莱斯芽孢杆菌已在国际上被广泛应用于食品、药品的制备中；例如，在日本、韩国的一种用于辅助治疗胃肠道疾病和提高免疫力的商用益生菌，近期经过全基因组测序和比较基因组分析，认定为是一种贝莱斯芽孢杆菌(Jeong H,Kim J,Choi SK,Pan JG.Genome Sequence of the Probiotic Strain Bacillus velezensis Variant polyfermenticus GF423.Microbiol Resour Announc.2018,7(10):e01000
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18.)。韩国分离自泡菜的一株贝莱斯芽孢杆菌也具有很好益生功能，并因显著的益生功能进行了全基因组测序(Heo,S.；Kim,J.
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H.；Kwak,M.
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S.；Sung,M.
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H.；Jeong,D.
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)，其特征在于，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.23531。2.一种发酵剂，其特征在于，所述发酵剂是由权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌经发酵培养制备得到。3.根据权利要求2所述的发酵剂，其特征在于，所述发酵剂为权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌和/或权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌发酵上清液制成的液体发酵剂；或者是由权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌和/或权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌发酵上清液制成的固体发酵剂。4.根据权利要求3所述的发酵剂，其特征在于，所述发酵剂中利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌以活菌形式存在。5.权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：张素芳，任晓蕾，文舒瑶，纪超凡，代艺伟，董亮，陈映羲，梁会朋，林心萍，李冬梅，
申请(专利权)人：大连工业大学，
类型：发明
国别省市：