用于捕获CD138阳性细胞的捕获剂及制备方法、捕获方法技术

本发明专利技术提供一种用于捕获CD138阳性细胞的捕获剂及制备方法、捕获方法，捕获剂包括：颗粒状磁珠，所述颗粒状磁珠的表面连接有第一抗体，所述第一抗体可与CD138阳性细胞结合。在应用过程中，可以将捕获剂置于样品液中，使得捕获剂与样品液混合，样品液中的CD138阳性细胞可以与第一抗体特异性结合，通过捕获剂中颗粒状磁珠的表面连接的第一抗体可以捕获CD138阳性细胞，使得CD138阳性细胞可以富集，然后可以将富集有CD138阳性细胞的颗粒状磁珠进行分离，以便于后续的检测，该捕获剂对于CD138阳性细胞的捕获回收率及阳性率高，可以适用于不同样本中CD138阳性表达细胞的捕获，对检测技术灵敏度要求不高，利于肿瘤早期检测、预防与治疗。疗。疗。

【技术实现步骤摘要】
用于捕获CD138阳性细胞的捕获剂及制备方法、捕获方法


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种用于捕获CD138阳性细胞的捕获剂及制备方法、捕获方法。

技术介绍

[0002]CD138(syndecan
‑
1)是跨膜硫酸乙酸肝素蛋白聚糖家族的成员，介导细胞细胞和细胞
‑
基质之间的黏附作用。已有研究表明，CD138分子在大于95％的MM细胞表面高度表达，但在其他造血细胞中不表达，可作为MM诊断治疗的主要标志物。但CD138阳性细胞存在于血液中的数量比例较少，其他种类细胞干扰影响大，不容易捕获和检测，对检测技术灵敏度要求高，不利于肿瘤早期检测、预防与治疗。

技术实现思路

[0003]有鉴于此，本专利技术提供一种用于捕获CD138阳性细胞的捕获剂及制备方法、捕获方法，用以解决CD138阳性细胞不容易捕获和检测，对检测技术灵敏度要求高的问题。
[0004]为解决上述技术问题，本专利技术采用以下技术方案：
[0005]第一方面，根据本专利技术实施例的用于捕获CD138阳性细胞的捕获剂，包括：
[0006]颗粒状磁珠，所述颗粒状磁珠的表面连接有第一抗体，所述第一抗体可与CD138阳性细胞结合。
[0007]其中，所述颗粒状磁珠的粒径为0.5
‑
2um。
[0008]其中，所述颗粒状磁珠的表面具有第一基团，所述第一抗体中具有第二基团，所述第一基团与所述第二基团连接。
[0009]其中，所述第一基团包括：
[0010]甲苯磺酰基、链霉亲和素、氨基、巯基、羟基、环氧丙烷基、琥珀酰亚胺酯基、马来酸酰亚胺酯基、酰氯基中的至少一种。
[0011]其中，所述第二基团包括：
[0012]生物素、半胱氨酸、赖氨酸、巯基、氨基、羧基中的至少一种。
[0013]其中，所述第一基团包括链酶亲和素，所述第二基团包括生物素，所述第一抗体与所述颗粒状磁珠通过生物素与链酶亲和素连接结合；或者
[0014]所述第一基团包括甲苯磺酰基，所述第二基团包括氨基，所述第一抗体与所述颗粒状磁珠通过氨基与甲苯磺酰基的偶联反应连接；或者
[0015]所述第一基团包括环氧丙烷基，所述第二基团包括巯基，所述第一抗体与所述颗粒状磁珠通过巯基与环氧丙烷基连接。
[0016]其中，所述捕获剂为悬浮液，捕获剂还包括：
[0017]分散剂，所述颗粒状磁珠分散在所述分散剂中。
[0018]第二方面，根据本专利技术实施例的用于捕获CD138阳性细胞的捕获剂的制备方法，包括：
[0019]提供颗粒状磁珠；
[0020]在所述颗粒状磁珠的表面连接第一抗体，所述第一抗体可与CD138阳性细胞结合。
[0021]其中，提供颗粒状磁珠的步骤包括：
[0022]提供具有第一基团的颗粒状磁珠；
[0023]在所述颗粒状磁珠的表面连接第一抗体的步骤包括：
[0024]将颗粒状磁珠分散在分散液中形成颗粒状磁珠的悬浮液；
[0025]在所述悬浮液中加入具有第二基团的第一抗体并使所述第一基团与所述第二基团连接，得到处理液；
[0026]将颗粒状磁珠从所述处理液中分离得到表面连接有第一抗体的颗粒状磁珠作为捕获剂。
[0027]第三方面，根据本专利技术实施例的CD138阳性细胞的捕获方法，包括：
[0028]将上述实施例中所述的捕获剂置于样本液中混合，得到混合液；
[0029]将所述混合液在2
‑
8℃下振荡孵育10
‑
50分钟；
[0030]将颗粒状磁珠与样本液分离，得到捕获有CD138阳性细胞的颗粒状磁珠。
[0031]其中，在将所述混合液在2
‑
8℃下振荡孵育之前，还包括：
[0032]向所述混合液中加入缓冲液。
[0033]本专利技术实施例的用于捕获CD138阳性细胞的捕获剂，包括：颗粒状磁珠，所述颗粒状磁珠的表面连接有第一抗体，所述第一抗体可与CD138阳性细胞结合。在应用过程中，可以将捕获剂置于样品液中，使得捕获剂与样品液混合，样品液中的CD138阳性细胞可以与第一抗体特异性结合，通过捕获剂中颗粒状磁珠的表面连接的第一抗体可以捕获CD138阳性细胞，使得CD138阳性细胞可以富集，然后可以将富集有CD138阳性细胞的颗粒状磁珠进行分离，以便于后续的检测，该捕获剂对于CD138阳性细胞的捕获回收率及阳性率高，可以适用于不同样本中CD138阳性表达细胞的捕获，对检测技术灵敏度要求不高，利于肿瘤早期检测、预防与治疗。
附图说明
[0034]图1为通过具有抗体的颗粒状磁珠捕获细胞的过程示意图；
[0035]图2为磁珠连上带有荧光标记CD138抗体的荧光显微镜图；
[0036]图3a为样本液中细胞含量定量的一流式细胞仪测试图；
[0037]图3b为样本液中细胞含量定量的另一流式细胞仪测试图；
[0038]图3c为样本液中细胞含量定量的又一流式细胞仪测试图；
[0039]图3d为样本液中细胞含量定量的又一流式细胞仪测试图；
[0040]图4为细胞捕获后的细胞计数图；
[0041]图5为对捕获到细胞采用流式抗体染色后的荧光显微镜图。
具体实施方式
[0042]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本专利技术实施例的附图，对本专利技术实施例的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于所描述的本专利技术的实施例，本领域普通技术
人员所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0043]本专利技术实施例的用于捕获CD138阳性细胞的捕获剂，包括：颗粒状磁珠，颗粒状磁珠可以为粒径为微米级的磁珠，所述颗粒状磁珠的表面连接有第一抗体，所述第一抗体可与CD138阳性细胞结合。在应用过程中，可以将捕获剂置于样品液中，使得捕获剂与样品液混合，样品液中的CD138阳性细胞可以与第一抗体特异性结合，通过捕获剂中颗粒状磁珠的表面连接的第一抗体可以捕获CD138阳性细胞，使得CD138阳性细胞可以富集，然后可以将富集有CD138阳性细胞的颗粒状磁珠进行分离，可以通过磁力架将颗粒状磁珠分离，以便于后续的检测，该捕获剂对于CD138阳性细胞的捕获回收率及阳性率高，可以适用于不同样本中CD138阳性表达细胞的捕获，对检测技术灵敏度要求不高，利于肿瘤早期检测、预防与治疗。
[0044]在一些实施例中，所述颗粒状磁珠的粒径可以为0.5
‑
2um，比如颗粒状磁珠的粒径可以为1um，颗粒状磁珠的粒径较小，有利于连接第一抗体，可以有效捕获CD138阳性细胞。
[0045]在另一些实施例中，所述颗粒状磁珠的表面可以具有第一基团，所述第一抗体中可以具有第二基团，所述第一基团与所述第二基团连接，第一基团与所述第二基团连接可以通过化学键连接，通过第一基团与所本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于捕获CD138阳性细胞的捕获剂，其特征在于，包括：颗粒状磁珠，所述颗粒状磁珠的表面连接有第一抗体，所述第一抗体可与CD138阳性细胞结合。2.根据权利要求1所述的捕获剂，其特征在于，所述颗粒状磁珠的粒径为0.5
‑
2um。3.根据权利要求1所述的捕获剂，其特征在于，所述颗粒状磁珠的表面具有第一基团，所述第一抗体中具有第二基团，所述第一基团与所述第二基团连接。4.根据权利要求3所述的捕获剂，其特征在于，所述第一基团包括：甲苯磺酰基、链霉亲和素、氨基、巯基、羟基、环氧丙烷基、琥珀酰亚胺酯基、马来酸酰亚胺酯基、酰氯基中的至少一种。5.根据权利要求3所述的捕获剂，其特征在于，所述第二基团包括：生物素、半胱氨酸、赖氨酸、巯基、氨基、羧基中的至少一种。6.根据权利要求3所述的捕获剂，其特征在于，所述第一基团包括链酶亲和素，所述第二基团包括生物素，所述第一抗体与所述颗粒状磁珠通过生物素与链酶亲和素连接结合；或者所述第一基团包括甲苯磺酰基，所述第二基团包括氨基，所述第一抗体与所述颗粒状磁珠通过氨基与甲苯磺酰基的偶联反应连接；或者所述第一基团包括环氧丙烷基，所述第二基团包括巯基，所述第一抗体与所述颗粒状磁珠通过巯基与环氧丙烷基连接。7.根据权利要求1所述的捕获剂，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴志鸿，
申请(专利权)人：成都京东方光电科技有限公司，
类型：发明
国别省市：