一种用于防治香蕉枯萎病的芽孢菌及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种用于防治香蕉枯萎病的芽孢菌，该芽孢菌使用LB液体培养基培育成OD

【技术实现步骤摘要】
一种用于防治香蕉枯萎病的芽孢菌及其应用


[0001]本专利技术涉及防治香蕉枯萎病领域，特别涉及一种用于防治香蕉枯萎病的芽孢菌。

技术介绍

[0002]香(大)蕉是单子叶植物纲、姜目、芭蕉科、芭蕉属的植物，在世界范围内广为分布，主要分布于南北纬20
°
之间的热带亚热带地区，共有130多个国家和地区种植香蕉。香蕉既是重要的经济作物也是重要的粮食作物，是全球仅次于柑橘的第二大水果；也是位于水稻、小麦、玉米之后的第四大粮食作物。由尖孢镰刀菌古巴专化型真菌引起的枯萎病在全球的大面积爆发和流行，已严重威胁香蕉产业并成为制约其可持续发展的主要因素。目前该病在南太平洋、亚洲、非洲、澳洲、美洲热带、亚热带地区的香蕉种植园中普遍发生。在中国广东、广西、福建、云南、台湾和海南等省(区)等香蕉主产区发生日趋严重。香蕉枯萎病在蕉园的发病率为10％
‑
40％，严重的可达90％以上，以致蕉园丢荒。
[0003]为了解决香蕉枯萎病的问题，本专利技术提出一种应用生防菌进行防治香蕉枯萎病的菌液及其应用方法。

技术实现思路

[0004]鉴以此，本专利技术提出一种用于防治香蕉枯萎病的芽孢菌及其应用方法，解决上述问题本专利技术的技术方案是这样实现的：
[0005]一种芽孢菌，所述芽孢菌为HNU24芽孢菌(Bacillus sp)保存于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为GDMCC61231。
[0006]进一步的，所述HNU24芽孢菌的菌液制备方法包括以下步骤：
[0007](1)用接种环取一环HNU24芽孢菌接种至的LB液体培养基中，于振荡摇床中培育，获得HNU24芽孢菌种子液；
[0008](2)将HNU24芽孢菌种子液接种至发酵培养基中培养，制得HUN24芽孢菌菌液。
[0009]进一步的，所述菌液制备方法包括以下步骤：
[0010](2)用接种环取一环HNU24芽孢菌接种至90
‑
100ml的LB液体培养基中，于振荡摇床中培育，获得HNU24芽孢菌种子液；
[0011](3)将HNU24芽孢菌种子液接种至发酵培养基中培养，制得HNU24芽孢菌菌液。
[0012]进一步的，步骤(1)中，所述振荡摇床温度为28
‑
32℃，转速为150
‑
170rmp，所述HUN24芽孢菌种子液OD600值为0.7
‑
0.9。
[0013]进一步的，步骤(2)中，所述发酵培养基按重量份计包括葡萄糖3
‑
7份、L
‑
谷氨酸钠5
‑
7份、硫酸镁1
‑
2份、玉米浆9
‑
10份、麸皮13
‑
15份和水30
‑
40份。
[0014]进一步的，步骤(2)中，所述HUN24芽孢菌种子液接种量为5
‑
8％，所述发酵培养基培养温度为30
‑
35℃，培养时间为8
‑
12h。
[0015]进一步的，所述芽孢菌或HUN24芽孢菌菌液应用于防治香蕉枯萎病。
[0016]进一步的，所述菌液中还包括法尼醇。
[0017]进一步的，所述HUN24芽孢菌菌液和法尼醇质量比为4
‑
6。
[0018]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
[0019]本专利技术HUN24芽孢菌对镰刀菌具有高效拮抗作用，进一步可以应用到防治香蕉枯萎病中。本专利技术中通过控制HUN24芽孢菌种子液OD
600
值为0.7
‑
0.9，能够促进菌种的生长，提高菌种活力，调控菌种代谢途径，提高次级代谢产物的含量，进一步提高HUN24芽孢菌对镰刀菌的抑制效果。本专利技术以葡萄糖3
‑
7份、L
‑
谷氨酸钠5
‑
7份、硫酸镁1
‑
2份、玉米浆9
‑
10份、麸皮13
‑
15份和水30
‑
40份制备发酵培养基，不仅能够保证发酵培养基中碳源等营养成分的供给，而且提高代谢产物的抑菌活性，进一步提高HUN24芽孢菌对镰刀菌的抑制效果。
附图说明
[0020]图1实施例1平板效果图
具体实施方式
[0021]为了更好理解本专利技术
技术实现思路
，下面提供具体实施例，对本专利技术做进一步的说明。
[0022]本专利技术实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
[0023]本专利技术实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0024]本专利技术提供的孢杆菌(Bacillus sp)HNU24，保存于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为GDMCC61231，保藏日期为2020年10月15日，保藏单位地址广东省广州市先烈中路100号。
[0025]实施例1
[0026](1)用接种环取一环HUN24芽孢菌接种至100ml的LB液体培养基中，于振荡摇床中培育，所述振荡摇床温度为30℃，转速为160rmp，获得HUN24芽孢菌种子液，所述HUN24芽孢菌种子液OD
600
值为0.8；
[0027](2)将HUN24芽孢菌种子液接种至发酵培养基中培养，接种量为6％，所述发酵培养基培养温度为33℃，培养时间为10h，所述发酵培养基按重量份计包括葡萄糖5份、L
‑
谷氨酸钠6份、硫酸镁1.5份、玉米浆9.5份、麸皮14份和水35份，制得HUN24芽孢菌菌液。
[0028]实施例2
[0029](1)用接种环取一环HUN24芽孢菌接种至100ml的LB液体培养基中，于振荡摇床中培育，所述振荡摇床温度为32℃，转速为170rmp，获得HUN24芽孢菌种子液，所述HUN24芽孢菌种子液OD
600
值为0.9；
[0030](2)将HUN24芽孢菌种子液接种至发酵培养基中培养，接种量为8％，所述发酵培养基培养温度为35℃，培养时间为12h，所述发酵培养基按重量份计包括葡萄糖7份、L
‑
谷氨酸钠7份、硫酸镁2份、玉米浆10份、麸皮15份和水40份，制得HUN24芽孢菌菌液。
[0031]实施例3
[0032](1)用接种环取一环HUN24芽孢菌接种至100ml的LB液体培养基中，于振荡摇床中培育，所述振荡摇床温度为28℃，转速为150rmp，获得HUN24芽孢菌种子液，所述HUN24芽孢菌种子液OD
600
值为0.7；
[0033](2)将HUN24芽孢菌种子液接种至发酵培养基中培养，接种量为5
‑
8％，所述发酵培养基培养温度为30℃，培养时间为8h，所述发酵培养基按重量份计包括葡萄糖3份、L
‑
谷氨
酸钠5份、硫酸镁1份、玉米浆9份、麸皮13份和水30份，制得HUN24芽孢菌菌液。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种芽孢菌，其特征在于，所述芽孢菌为HNU24芽孢菌(Bacillus sp)保存于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为GDMCC61231。2.一种含有权利要求1所述的HNU24芽孢菌的菌液。3.如权利要求2所述的菌液，其特征在于，所述菌液制备方法包括以下步骤：(1)用接种环取一环HNU24芽孢菌接种至的LB液体培养基中，于振荡摇床中培育，获得HNU24芽孢菌种子液；(2)将HNU24芽孢菌种子液接种至发酵培养基中培养，制得HUN24芽孢菌菌液。4.如权利要求3所述的菌液，其特征在于，所述菌液制备方法包括以下步骤：(2)用接种环取一环HNU24芽孢菌接种至90
‑
100ml的LB液体培养基中，于振荡摇床中培育，获得HNU24芽孢菌种子液；(3)将HNU24芽孢菌种子液接种至发酵培养基中培养，制得HNU24芽孢菌菌液。5.如权利要求4所述的菌液，其特征在于，步骤(1)中，所述振荡摇床温度为28
‑
32℃，转速为150
‑
170rmp，所述HUN24芽孢菌种子液OD
600
...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑丽，李鹏，杨迎青，陈代朋，谢昌平，赵阳，
申请(专利权)人：海南大学，
类型：发明
国别省市：