特异性针对过度磷酸化τ蛋白的抗体及其使用方法技术

本发明专利技术涉及一类单克隆抗体，其特异性地以改善的亲和力结合病理性过度磷酸化(PHF)τ蛋白上的磷酸化丝氨酸396残基(pS396)，并且涉及在阿尔茨海默病和其他τ蛋白病变的治疗中使用这些分子以及它们的τ蛋白结合片段的方法。用这些分子以及它们的τ蛋白结合片段的方法。用这些分子以及它们的τ蛋白结合片段的方法。

【技术实现步骤摘要】
特异性针对过度磷酸化
τ
蛋白的抗体及其使用方法
本申请是申请日为2017年7月7日、申请号为201780036665X、专利技术名称为“特异性针对过度磷酸化τ蛋白的抗体及其使用方法”的分案申请。


[0001]本专利技术涉及一种新颖种类的单克隆抗体，其特异性地结合病理性过度磷酸化(PHF)τ蛋白上的磷酸化丝氨酸396残基(pS396)，并且涉及在阿尔茨海默病和τ蛋白病变的治疗中使用这些分子以及它们的τ蛋白结合片段的方法。序列表的引用
[0002]本申请包括根据37C.F.R.1.821等的一个或多个序列表，所述序列表以计算机可读介质披露(文件名称：1049
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WO
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PCT_FINAL_ST25_1.txt，创建于2017年6月13日，并且具有65kB的大小)，将该文件通过引用以其全文结合在此。

技术介绍

[0003]年龄相关性神经退行性疾病，如阿尔茨海默病(AD)和痴呆，是现今的最大社会性挑战之一。世界卫生组织估计，护理老年人的成本将持续增加并且诊断为痴呆的病例的数目到2050年增至三倍(World Health Organization and Alzheimer's Disease International
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Status Report(2012)DEMENTIA:A public health priority[世界卫生组织和阿尔茨海默病国际状态报告(2012)痴呆：公共卫生优先事项]，WHO)。对于AD的首要治疗是神经递质调节剂，例如乙酰胆碱酯酶抑制剂和NMDA调节剂。这些疗法在世纪之交变得可用，并且仍然形成用于痴呆和AD相关的记忆缺陷的症状减轻的基础。然而，这些药物不靶向AD的潜在病因，即淀粉样蛋白β(Aβ)肽和τ蛋白聚集体的积累以及神经元突触和最终神经元的相关损失。
[0004]对老年人的纵向的社区范围的研究(Weiner,M.W.等人(2014)ADNI在线：http://www.adni
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info.org/；Breteler,M.M.等人(1992)Neuroepidemiology[神经流行病学]11增刊1，23
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28；Launer,L.J.(1992)Neuroepidemiology[神经流行病学]11增刊1，2
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13)以及大的基因组范围相关研究(Lambert,J.C.等人(2013)Nat.Genet.[自然基因组学]45，1452
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1458)已经显示，AD是痴呆的多相混合物，其中高达10％的晚期AD患者缺乏淀粉样蛋白病变(Crary,J.F.等人(2014)Acta Neuropathol.[神经病理学学报]128，755
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766)。此外，由Braak和Braak进行的开创性病理学研究(Braak,H.和Braak,E.(1996)Acta Neurol.Scand.[斯堪的纳维亚神经学学报]增刊165，3
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12)证明神经原纤维缠结病变程度与尸体解剖前的认知状态之间的明显相关。这些观察已经通过一些研究者(Nelson,P.T.等人(2012)J.Neuropathol.Exp.Neurol.[神经病理学与实验神经学杂志]71，362
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381)以及在最近的纵向生物标记研究中得以验证，所述研究指示，贯穿该疾病的早期和后期，τ蛋白和过度磷酸化τ蛋白的脑脊液(CSF)水平增加(Jack,C.R.,Jr.等人(2013)Lancet Neurol.[柳叶刀神经学]12，207
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216)。
[0005]如以上指出的，微管相关蛋白、τ蛋白、及其过度磷酸化形式形成作为AD的一类主
要标志的细胞内神经原纤维缠结的主要成分。此外，τ蛋白的具体基因变体与额颞痴呆(FTD)的家族形式相关联。在AD中τ蛋白病变的表现以不同的空间模式出现，起始于内嗅皮质中，随后为海马区以及皮质区(Braak,H.和Braak,E.(1996)Acta Neurol.Scand.[斯堪的纳维亚神经学学报]增刊165，3
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12)。τ蛋白病变的具体阶段还良好地与认知能力相关(Nelson,P.T.等人(2012)J.Neuropathol.Exp.Neurol.[神经病理学与实验神经学杂志]71，362
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381；Braak,E.等人(1999)Eur.Arch.Psychiatry Clin.Neurosci.[欧洲精神病学与临床神经科学档案]249增刊3，14
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22)。综上，此证据形成对于AD的基于τ蛋白的假设的基础。需要的是τ蛋白的细胞内积累导致微管变性和脊髓坍塌。结果是神经元之间的通信故障和细胞死亡随之发生。最近，还已经显示τ蛋白本身可以形成内
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病原性种类，这些种类可以将神经变性从一个细胞传递到下一个细胞(Clavaguera,F.等人(2009)Nat.Cell Biol.[自然细胞生物学]11，909
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913)。I.作为内
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病原体的τ蛋白
[0006]Clavaguera和同事们已经证明τ蛋白本身可以充当内
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病原体(Clavaguera,F.等人(2009)Nat.Cell Biol.[自然细胞生物学]11，909
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913)。低自旋脑提取物分离自P301Sτ蛋白转基因小鼠(Allen,B.等人(2002)J.Neurosci.[神经科学杂志]22，9340
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9351)，稀释并且注入幼小ALZ17小鼠的海马体和皮质区中。该ALZ17小鼠是τ蛋白转基因小鼠品系，该品系仅发展晚期病变(Probst,A.等人(2000)Acta Neuropathol.[神经病理学学报]99，469
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481)。经注射的ALZ17小鼠快速发展实体丝状病变，并且给予来自P301S小鼠的经τ蛋白免疫耗减的脑提取物或来自野生型小鼠的提取物并不诱导τ蛋白病变。将脑提取物在可溶(S1)和十二烷基肌氨酸钠
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不溶的τ蛋白(P3)(Sahara,N.等人(2013)J.Alzheimer
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s.Dis.[阿尔茨海默病杂志]33，249
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263)方面分级并且将这些注入ALZ17小鼠证明了P3部分是诱导病变中最有力的。它包含多数的细胞内过度磷酸化丝状τ蛋白。大部分的病变还可以在将P301S提取物注入野生型小鼠的脑中时诱导，但无NFT形成。在后续的研究中，克拉维古等人已经显示，从其他τ蛋白病变(嗜银颗粒痴呆(AGD)、进行性核上性麻痹(PSP)、以及皮质基底节变性(CBD))的尸体解剖后的脑组织提取的人类τ蛋白也可以在ALZ17模型中诱导τ蛋白病变(Clavaguera,F.等人(2013)Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.[美国国家科学院院刊]110，9535...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种单克隆抗体或其表位结合片段，其包括(a)轻链CDR1，其包括选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:3，SEQ ID NO:31，SEQ ID NO:32，SEQ ID NO:33，SEQ ID NO:34，SEQ ID NO:35，SEQ ID NO:36，SEQ ID NO:37，SEQ ID NO:38，SEQ ID NO:40，和SEQ ID NO:46；(b)轻链CDR2，其包括SEQ ID NO:4，SEQ ID NO:41，和SEQ ID NO:47的氨基酸序列；(c)轻链CDR3，其包括SEQ ID NO:5，SEQ ID NO:42，和SEQ ID NO:48的氨基酸序列；(d)重链CDR1，其包括SEQ ID NO:6，SEQ ID NO:43，SEQ ID NO:49，SEQ ID NO:52，和SEQ ID NO:55的氨基酸序列；(e)重链CDR2，其包括选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:7，SEQ ID NO:28，SEQ ID NO:29，SEQ ID NO:30，SEQ ID NO:44，SEQ ID NO:50，SEQ ID NO:53，和SEQ ID NO:56；以及(f)重链CDR3，其包括选自下组的氨基酸序列，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:8，SEQ ID NO:39，SEQ ID NO:45，SEQ ID NO:51，SEQ ID NO:54，和SEQ ID NO:57。2.一种单克隆抗体或其表位结合片段，其包括(a)选自下组的轻链，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:12，SEQ ID NO:16，SEQ ID NO:17，SEQ ID NO:18，SEQ ID NO:19，SEQ ID NO:20，SEQ ID NO:21，SEQ ID NO:22和SEQ ID NO:23；以及(b)选自下组的重链，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:11，SEQ ID NO:13，SEQ ID NO:14，SEQ ID NO:15，SEQ ID NO:24，SEQ ID NO:25，SEQ ID NO:26，和SEQ ID NO:27。3.根据权利要求1或2所述的单克隆抗体或其表位结合片段，其中(a)该轻链是SEQ ID NO:12；并且(b)该重链选自下组，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26和SEQ ID NO:27。4.根据前述权利要求中任一项所述的单克隆抗体或其表位结合片段，其中(a)该轻链选自下组，该组由以下各项组成：SEQ ID NO:16，SEQ ID NO:17，SEQ ID NO:18，SEQ ID NO:19，SEQ ID NO:20，SEQ ID NO:21，SEQ ID NO:22和SEQ ID NO:23；并且(b)该重链是SEQ ID NO:11。5.根据前述权利要求中任一项所述的单克隆抗体或其表位结合片段，其包括(a)轻链CDR1，其具有SEQ ID NO:31的氨基酸序列；(b)轻链CDR2，其具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列；(c)轻链CDR3，其具有SEQ ID NO:5的氨基酸序列；(d)重链CDR1，其具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列；(e)重链CDR2，其具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列；以及(f)重链CDR3，其具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列。6.根据权利要求1或5所述的单克隆抗体或其表位结合片段，其包括(a)轻链，该轻链包括SEQ ID NO:16的氨基酸序列；和(b)重链，该重链包括SEQ ID NO:11的氨基酸序列。7.根据权利要求1至4所述的单克隆抗体或其表位结合片段，其包括(a)轻链CDR1，其具有SEQ ID NO:32的氨基酸序列；
(b)轻链CDR2，其具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列；(c)轻链CDR3，其具有SEQ ID NO:5的氨基酸序列；(d)重链CDR1，其具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列；(e)重链CDR2，其具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列；以及(f)重链CDR3，其具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列。8.根据权利要求7所述的单克隆抗体或其表位结合片段，其包括(a)轻链，该轻链包括SEQ ID NO:17的氨基酸序列；以及(b)重链，该重链包括SEQ ID NO:11的氨基酸序列。9.根据权利要求1至4所述的单克隆抗体或其表位结合片段，其包括(a)轻链CDR1，其具有SEQ ID NO:33的氨基酸序列；(b)轻链CDR2，其具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列；(c)轻链CDR3，其具有SEQ ID NO:5的氨基酸序列；(d)重链CDR1，其具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列；(e)重链CDR2，其具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列；以及(f)重链CDR3，其具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列。10.根据权利要求9所述的单克隆抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：J，
申请(专利权)人：H隆德贝克有限公司，
类型：发明
国别省市：