一株抑制核桃黄曲霉产毒的桑肠杆菌LC00916及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一株抑制核桃黄曲霉产毒的桑肠杆菌LC00916及其应用，涉及微生物技术领域。本发明专利技术所述桑肠杆菌为桑肠杆菌(Enterobacter mori)LC00916菌株，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.25001。本发明专利技术的桑肠杆菌(Enterobacter mori)LC00916菌株及其代谢产物对于核桃黄曲霉的生长具有明显的抑制作用，能够显著降低核桃黄曲霉侵染核桃的病情指数，并且可以抑制黄曲霉毒素(黄曲霉毒素B1和黄曲霉毒素B2)的合成。本发明专利技术的菌株在农产品和食品领域有重要的应用价值，本发明专利技术为防控黄曲霉毒素污染提供了新的资源和方法。曲霉毒素污染提供了新的资源和方法。曲霉毒素污染提供了新的资源和方法。

【技术实现步骤摘要】
一株抑制核桃黄曲霉产毒的桑肠杆菌LC00916及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，尤其是涉及一株抑制核桃黄曲霉产毒的桑肠杆菌LC00916及其应用。

技术介绍

[0002]黄曲霉毒素一般是由黄曲霉及寄生曲霉等几种霉菌产生，在食品和饲料的生产、贮存以及运输过程中会存在。黄曲霉毒素因其毒性强而受到很多关注。
[0003]在多种黄曲霉毒素中，常见且危害较大的有黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2四种，其中黄曲霉毒素B1毒性最强。食用黄曲霉毒素污染的食物和饲料，会严重危害人类和动物的健康。大量摄入黄曲霉素可造成黄曲霉素的急性中毒，出现包括对肝脏组织的破坏和损伤，严重时可导致肝癌甚至死亡；少量摄入黄曲霉素也可能出现慢性中毒症状。
[0004]在对黄曲霉菌的防治中，常常使用化学防治方法。这种方法存在成本高、可能使病原菌产生耐药性甚至抗药性等缺点。目前黄曲霉毒素的去除方法中，出现越来越多的生物学方法。例如微生物代谢产生的酶降解黄曲霉毒素，微生物菌体本身及其细胞壁提取物可吸附黄曲霉毒素，一些微生物菌种对黄曲霉的生长和毒素的形成有一定的抑制作用。专利文献CN201010109125.X公开了一株酿酒酵母及其在吸附黄曲霉毒素中的应用，该菌株菌体本身能够吸附黄曲霉毒素，该菌体可用于制备吸附黄曲霉毒素的生物制剂，用于黄曲霉毒素的生物脱毒。专利文献CN201710077742.8公开了一种用于降解黄曲霉毒素B1的枯草芽孢杆菌，该菌株发酵液对AFB1的降解率达61.36％；以10％接种量培养后，降解率可达80.26％；发酵上清液浓缩8倍后，降解率达85.65％。
[0005]分离和筛选更多有效抑制黄曲霉菌或黄曲霉毒素的微生物菌种对食品和饲料安全性的保障具有重要的应用价值和意义。鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一株抑制核桃黄曲霉产毒的桑肠杆菌及其应用。本专利技术的桑肠杆菌(Enterobacter mori)LC00916菌株及其代谢产物对于核桃黄曲霉的生长具有明显的抑制作用，能够显著降低核桃黄曲霉侵染核桃的病情指数，并且可以抑制黄曲霉毒素(黄曲霉毒素B1和黄曲霉毒素B2)的合成。
[0007]本专利技术提供的技术方案如下：
[0008]在一个方面，本专利技术提供了一种株抑制核桃黄曲霉产毒的桑肠杆菌，所述桑肠杆菌为桑肠杆菌(Enterobacter mori)LC00916菌株，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.25001。
[0009]在本专利技术中，桑肠杆菌菌株LC00916的菌落特征为在LB固态培养基上形成圆形或近圆形、乳白色、中央微凸起，表面光滑湿润有光泽、边缘较整齐的菌落。
[0010]在本专利技术中，所述桑肠杆菌(Enterobacter mori)LC00916菌株的16S rDNA序列如SEQ ID No.1所示。
[0011]在一个方面，本专利技术提供了一种微生物菌剂，其含前述的桑肠杆菌(Enterobacter mori)LC00916菌株。
[0012]在一个实施方案中，所述微生物菌剂包含前述的桑肠杆菌(Enterobacter mori)LC00916菌株的菌悬液或全培养物或胞外代谢物。
[0013]在一个实施方案中，所述微生物菌剂为液体、冷冻或干燥粉末形式。
[0014]在一个优选的实施方案中，所述微生物菌剂还包括固态载体；所述固态载体包括泥炭、滑石、蒙脱土、锯屑、珍珠岩、云母、硅石、石英粉、膨润土、蛭石、高岭土、轻质碳酸钙、硅藻土中的一种或多种。
[0015]在一个优选的实施方案中，所述微生物菌剂还包括助剂；所述助剂包括十二烷基苯磺酸钠、海藻糖、甘油、烟酸、醇、缓冲盐、氯化钠、氨基酸、维生素类、蛋白质、多肽、多糖或单糖、酵母膏中的一种或多种。
[0016]在一个实施方案中，在所述微生物菌剂中，所述桑肠杆菌(Enterobacter mori)LC00916菌株的活菌数量为106～10
12
CFU
·
mL
‑1。
[0017]本专利技术的所述桑肠杆菌或所述微生物菌剂可用于制备黄曲霉菌拮抗制剂。本专利技术所述黄曲霉菌拮抗制剂的剂型包括悬浮剂、乳油剂、溶液剂、泡腾剂和粉剂。
[0018]在另一个方面，本专利技术提供了所述桑肠杆菌或所述微生物菌剂在食品加工或饲料加工中的应用；优选地，所述食品为发酵食品，所述饲料为发酵饲料。
[0019]在一个实施方案中，所述应用为预防食品和/或饲料储藏物产生黄曲霉毒素。
[0020]在一个实施方案中，所述应用为在核桃贮存中的应用。
[0021]在一个具体的实施方案中，所述核桃为清香、温185核桃。
[0022]在一个实施方案中，所述应用包括将所述菌株的发酵液包覆或喷洒在核桃仁表面。
[0023]在一个实施方案中，所述桑肠杆菌(Enterobacter mori)LC00916菌株发酵得到所述发酵液。将菌株接种于LB液体培养基中，在30
‑
35℃培养温度下培养，得到发酵培养液。发酵条件为：培养温度30
‑
35℃，pH 7.0
‑
7.2，摇床转速180
‑
200rpm发酵后使发酵液的浓度达到OD
600
＝0.17。液体培养基配方为：胰蛋白胨(Tryptone)10g
·
L
‑1；酵母提取物(Yeast extract)5g
·
L
‑1；氯化钠(NaCl)10g
·
L
‑1；水1000mL，pH 7.0
‑
7.2，121℃灭菌20min。
[0024]在另一个方面，本专利技术提供了所述桑肠杆菌或所述组合物在抑制黄曲霉生长或抑制黄曲霉毒素中合成的应用；优选地，所述应用为抑制核桃黄曲霉生长或黄曲霉毒素合成。
[0025]在一个实施方案中，所述黄曲霉毒素为黄曲霉毒素B1和黄曲霉毒素B2中的至少一种。
[0026]本专利技术还提供了一种预防农作物、饲料和食品在储存和/或运输中产生黄曲霉毒素的方法，包括取所述桑肠杆菌的发酵液施用于农作物、饲料和食品。
[0027]生物样品保藏信息：桑肠杆菌(Enterobacter mori)LC00916，该菌株已于2022年6月2日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心，保藏号为：CGMCC No.25001；保藏地址：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101。经保藏中心于2022年6月2日检测为存活菌株。
[0028]有益效果：
[0029]本专利技术的桑肠杆菌(Enterobacter mori)LC00916菌株是一种新的对核桃黄曲霉
有抑菌作用的菌株，其可以抑制核桃黄曲霉的发病和产毒；本专利技术可以降低农作物、饲料和食品中黄曲霉毒素的含量、延长农产本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株抑制核桃黄曲霉产毒的桑肠杆菌，其特征在于，所述桑肠杆菌为桑肠杆菌(Enterobacter mori)LC00916菌株，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.25001。2.微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂含有权利要求1所述的桑肠杆菌(Enterobacter mori)LC00916菌株。3.根据权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂为液体、冷冻或干燥粉末形式。4.根据权利要求3所述的微生物菌剂，其特征在于，在所述微生物菌剂中，所述桑肠杆菌(Enterobacter mori)LC00916菌株的活菌数量为106～10
12
CFU
·
mL
‑1。5.权利要求1所述的桑肠杆菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴迪，代雅萍，赵文革，杜建，裴东，姚彦坡，牛犇，常昱，昝译博，
申请(专利权)人：阿克苏浙疆果业有限公司，
类型：发明
国别省市：