一种细胞因子风暴综合征诊断试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种细胞因子风暴综合征诊断试剂盒及其应用，所述试剂盒包括4种炎症因子TNF

【技术实现步骤摘要】
一种细胞因子风暴综合征诊断试剂盒及其应用


[0001]本专利技术属于生物诊断
，具体而言，本专利技术涉及一种细胞因子风暴综合征诊断试剂盒及其应用。

技术介绍

[0002]在很多疾病中，包括流感、败血症或者免疫治疗的部分病例中，可能出现一类特殊的临床综合症，即伴随发热、低血压、缺氧和体液中多种细胞因子迅速大量产生，这一系列临床与实验症状称作细胞因子释放综合征，也被称之为细胞因子风暴(cytoki ne storm)。
[0003]细胞因子风暴相关的细胞因子是免疫细胞在被激活、与靶细胞相互作用的时候释放的。相关的细胞因子(白介素、干扰素等)主要来源于激活的免疫细胞，而且又重新作用于免疫细胞的激活(包括T
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细胞，单核细胞和巨噬细胞等),触发急性炎症反应诱导上皮及组织损伤，导致微血管渗漏、心衰甚至死亡。多种细胞因子迅速大量产生的现象，也是引起急性呼吸窘迫综合症和多器官衰竭的重要原因。在发生严重副作用之前检测患者血清样本中细胞因子风暴相关细胞因子，对临床诊断和治疗有重要指导意义。
[0004]根据研究文献，部分细胞因子水平等在血清中的增高与患者发生细胞因子风暴具有明确的相关性。例如，中国授权专利技术专利CN112034187B公开了一组用于预测2019冠状病毒病细胞因子释放综合征和血栓风暴的标志物及其应用、试剂盒和试剂盒的制备方法，所述标志物分别为VEGF D、TNF α、SCF、LI F、I L 2、I L 4、I L 6、I L 8、I L 10、I L 15、I L 17A、I L 18、I L 1β和I FN γ。利用该专利技术提供的VEGF D、TNFα、SCF、LI F、I L 2、I L4、I L 6、I L 8、I L 10、I L 15、I L 17A、I L 18、I L 1β、I FN γ一组标志物或者其制备得到的试剂盒进行2019冠状病毒病(COVI D 19)细胞因子释放综合征和血栓风暴的预测，具有检测快速、准确、费用低等优点，应用前景广阔。然而，上述专利技术专利涉及的是单个相关指标分别进行检测，只能反映细胞因子风暴的某个方面，缺乏全面性，并不能准确诊断细胞因子风暴，其最高预测准确率也只有83.6％。
[0005]针对上述问题，中国专利技术专利申请CN107870233A公开了一种细胞因子风暴相关细胞因子的检测，是一种用于进行免疫疗法或其他产生细胞因子风暴疾病的预后检测指标组合。该细胞因子组合覆盖了能够检测细胞因子风暴的9个指标(IFN
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γ、TNF
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α、IL
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2R、IL
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6、IL
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10、GM
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CSF、CRP、MIP
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1α、MIP
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1β)，可以通过固相芯片/液相芯片/ELISA试剂盒法实现血清微量样品高灵敏度检测，通过9项指标的联合检测，绘制ROC曲线，可使细胞因子风暴诊断的灵敏度达到90％，特异性达到100％。
[0006]然而，上述检测需要同时检测9个指标，存在操作难度大，检测成本高的缺陷。因此，本专利技术通过对检测细胞因子风暴的指标进行优化，既能够准确的诊断细胞因子风暴，又能够降低诊断成本，提高诊断效率。

技术实现思路

[0007]本专利技术主要提供了一种细胞因子风暴综合征诊断试剂盒及其应用。为了实现本发
明的目的，拟采用如下技术方案：
[0008]本专利技术一方面涉及一种细胞因子风暴综合征诊断试剂盒，所述试剂盒包括4种炎症因子TNF
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α、IL
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6、PGE2和PAF的生物素标记检测抗体。
[0009]在本专利技术的一个优选实施方式中，所述试剂盒为固相芯片、液相芯片或ELISA试剂盒。
[0010]在本专利技术的一个优选实施方式中，所述试剂盒可以定量检测血清中4种炎症因子TNF
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α、IL
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6、PGE2和PAF的含量。
[0011]在本专利技术的一个优选实施方式中，所述试剂盒不包括除了上述4种炎症因子之外的其它炎症因子的检测抗体。
[0012]本专利技术另一方面涉及一种细胞因子风暴综合征诊断标志物，所述标志物包括4种炎症因子TNF
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α、I L
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6、PGE2和PAF。
[0013]在本专利技术的一个优选实施方式中，所述诊断标志物不包括其它炎症因子。
[0014]本专利技术另一方面还涉及上述试剂盒或标志物的应用，所述标志物用于制备诊断细胞因子风暴综合征诊断试剂盒中的应用。
[0015]本专利技术另一方面还涉及上述试剂盒或标志物的应用，所述标志物用于制备预测细胞因子风暴综合征诊断试剂盒中的应用。
[0016]本专利技术的有益效果
[0017]本专利技术试剂盒可以通过对4种炎症因子的联合定量检测，用于细胞因子风暴综合征的诊断，本专利技术的试剂盒具有指标覆盖全面、灵敏度高、特异性好等优点，仅通过4种炎症因子的联合检测就可以提高细胞因子风暴综合征诊断的准确性，临床使用更方便快捷。
附图说明
[0018]图1为细胞因子风暴相关因子指标结果展示图(以健康志愿者的监测结果的平均值为100％作为计算基准)；
[0019]图2为联合指标ROC曲线分析图。
具体实施方式
[0020]为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本专利技术作进一步的详细说明。
[0021]实施例1
[0022]一、用于细胞因子风暴诊断的固相芯片
[0023]·
包括检测TNF
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α(肿瘤坏死因子
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α)、I L
‑
6(白细胞介素
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6)、PGE2(前列腺素E2)和PAF(血小板激活因子)指标的芯片，捕获指标的抗体点制在芯片上；
[0024]·
对应TNF
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α、I L
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6、PGE2和PAF的4种生物素标记检测抗体；
[0025]·
链霉亲和素
‑
荧光(SA
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Cy3)；
[0026]·
配套试剂：标准品混合物、样品稀释液、封闭液、洗脱液I、洗脱液I I；
[0027]·
其他设备耗材：离心管、4℃离心机、常温离心机、酶标仪、漩涡振荡器、摇床、芯片小型离心机、芯片扫描仪、软件GenePix Pro 6.0。
[0028]二、利用固相芯片对上述4个指标组合进行检测
[0029](一)芯片实验前准备
[0030]1、提前从
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80℃冰箱取出所有试剂，放置平衡至室温。
[0031]2、样品组成与准备
[0032]样品组成：健康人35例，接受免疫治疗患者70例，标准化收集血清。
[0033]样本准备：离心血清样本，10,000rpm，4℃离心15mi n，取上清。离本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种细胞因子风暴综合征诊断试剂盒，所述试剂盒包括4种炎症因子TNF
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α、IL
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6、PGE2和PAF的生物素标记检测抗体。2.根据权利要求1所述的试剂盒，所述试剂盒为固相芯片、液相芯片或ELISA试剂盒。3.根据权利要求1所述的试剂盒，所述试剂盒可以定量检测血清种4种炎症因子TNF
‑
α、IL
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6、PGE2和PAF的含量。4.根据权利要求1所述的试剂盒，所述试剂盒不包括除了上述4种炎症因子之外的其它炎症因子的检测抗体。5.一种细胞因子风暴综合征诊...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜家杰，胡晓明，张春杰，赵凤，焦楠，
申请(专利权)人：山东中鸿特检生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：