一种超高效液相色谱-串联质谱法同时测定动物源性食品中21种全氟类化合物残留的方法技术

本发明专利技术属于高效液相色谱检测技术领域，尤其涉及一种超高效液相色谱

【技术实现步骤摘要】
一种超高效液相色谱
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串联质谱法同时测定动物源性食品中21种全氟类化合物残留的方法


[0001]本专利技术属于高效液相色谱检测
，尤其涉及一种超高效液相色谱
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串联质谱法同时测定动物源性食品中21种全氟类化合物残留的方法。

技术介绍

[0002]全氟/多氟类化合物(PFAS)是一种人工合成的有机氟化物，其分子中氟原子全部或部分取代与碳连接的氢原子，因其毒性以及在环境和生物体中的广泛存在而成为全球关注的热点。PFAS分子通式为(F(CF2)
x
)R，根据末端基团差异，可分为全氟烷基羧酸(PFSA
S
)和全氟烷基磺酸(PFCAs)，其中全氟辛烷羧酸(PFOA)和全氟辛烷磺酸(PFOS)是目前检出率最高的两类含有8个碳原子的全氟化合物。由于PFCS中C
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F键极高化学键能，使得该类化合物具有强化学稳定性、高表面活性，被广泛应用于食品接触材料、纺织品、不沾锅涂层、阻燃剂等工业和消费品领域中；同时也由于其不易降解，且容易通过食物链造成生物体的富集作用，使其成为目前新型的持久性环境污染物。
[0003]目前已有在水体、水产品、畜禽类产品、果蔬等中检测出不同类别的全氟类化合物。人体通过饮食摄入PFAS暴露的食品，可在一定程度上影响生长发育，毒理学研究表明，可能会引起血糖代谢障碍问题、脂肪性肝病、生殖毒性等。欧洲食品安全局(EFSA)对四种PFAS建立了每周允许摄入量(TWI)为8ng/kg bw(全氟辛酸、全氟任酸、全氟己烷磺酸和全氟辛烷磺酸的总和)并更新了食品中PFOA和PFOS的TWI为13ng/kg bw(PFOS)和6ng/kg bw(PFOA)。所以检测食物链中全氟类化合物残留量多少是非常重要。
[0004]目前我国人群膳食暴露频繁且PFCs富集普遍的动物源性食品(家禽副产品)的肝脏、肌肉、鲜蛋中PFCAs和PFSAs多种类PFCs同时检测的方法报道较少。同时，国内外颁布的检测方法标准也只关注了食品中最典型的PFOA和PFOS，而对同样具有危害性的其它PFCs没有涉及。传统液相色谱检测方法存在前处理复杂、干扰因素多、特异性差、分析时间长、灵敏度不高、定性定量准确性差且重现性较差等问题，另外目前多种全氟类化合物残留共同检测的方法，多用蛋白沉淀和固相萃取两步法来做，操作略复杂，且前处理时间长。
[0005]由于PFSAs和PFCAs没有合适的发色基团且不容易挥发，液相色谱
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串联质谱是现在检测全氟化合物其最常用的分析方法。液相色谱
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串联质谱的检测方法灵敏度和准确性较高，可以实现几十种到几百种目标化合物的同时检测分析，在痕量检测中具有很好优势，目前全氟类化合物在动物源性食品特别是肝脏、肾脏、肌肉等蛋白质含量较高的器官组织中富集，但含量通常较低，一般在μg/kg级别，因此需要灵敏度高的检测仪器定量检测。但是该方法依然存在容易受基质效应影响的缺点，如何从复杂基质中提取目标物和清除基质且准确高效是分析中的难题。
[0006]又因为要扩大检测化合物的种类，使得检测目标物能够覆盖目前出现的大部分传统直链全氟化合物，目前存在一些国家标准要么就是检测基质单一，要么就是检测的目标化合物少的缺点。也需要找到一种适合6种动物源性食品基质同时处理的前处理方法，能减
少前处理时间，但目前一部分研究者利用固相萃取小柱对提取目标物进行净化，耗时较长，不利于大批量样品的检测。

技术实现思路

[0007]为了解决以上技术问题，本专利技术提供一种超高效液相色谱
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串联质谱法同时测定动物源性食品中21种全氟类化合物残留的方法，可同时检测鸡肉、鸭肉、鸡肝、鸭肝、鸡蛋或鸭蛋6种基质中21种全氟类化合物多残留高通量检测方法，根据研究对象具有高脂肪、高蛋白的属性，采用改进的QuEChERS方法对样品进行提取和净化，检测时间短，能够实现大批量样品高效、准确测定；受基质效应影响小。
[0008]解决以上技术问题的本专利技术中的一种超高效液相色谱
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串联质谱法同时测定动物源性食品中21种全氟类化合物残留的方法，其特征在于：包括以下步骤：
[0009](1)样品准备和混合内标工作溶液配置：
[0010](2)样品提取和盐析：采用改进的QuEChERS方法对样品进行提取和净化；具体步骤为称取样品置于聚丙烯离心管中，加入混合内标工作溶液，再加入水，振荡涡旋，分别用提取剂振荡提取；然后加入无机盐后迅速振摇，离心；
[0011](3)净化处理：将离心后的上清液全部转移至有净化剂的净化管中，振荡涡旋、离心，取上清液氮吹至近干，用甲醇定容和过滤，待测；
[0012](4)配置目标化合物标准溶液：用阴性基质样液(净化后的样品溶液)配制目标化合物标准溶液，具体为净化后的液体中加入标准工作溶液，即加入适量21种全氟化合物混合标准工作溶液及9种混合内标工作溶液，配制成浓度为0.2，0.4，1.0，2.0，4.0，10ng/mL的基质加标溶液；
[0013](5)用液相色谱仪和串联质谱仪进行测定；绘制标准曲线后确定基质效应，按条件用液相色谱仪和串联质谱仪进行测定，以目标物的浓度(X，ng/mL)与相应的峰面积(Y)绘制标准曲线；基质标准曲线为采用了权重1/x来算，建立线性回归方程而成。
[0014](6)采用基质匹配
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内标法定量分析判断：按照ME＝[(基质匹配标准曲线的斜率
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溶剂标准曲线的斜率)/溶剂标准曲线的斜率]×
100％来评价6种基质的基质效应大小；结果为(
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)表示基质抑制效应，结果为(+)表示基质增强效应；当ME为
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20％～20％时为弱基质效应，ME为
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50％～20％或20％～50％时为中等基质效应，当ME<
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50％或>50％时为强基质效应，从而确定实际样品中是否筛查检测出待测化合物。
[0015]基质增强效应时，物质在基质中的响应高于在纯溶剂中的响应，这时如果用纯溶剂曲线去校正样品，测检测值偏大。基质抑制效应时，物质在基质中的响应低于在纯溶剂中的响应，这时如果用纯溶剂曲线去校正样品，测检测值偏小。
[0016]本专利技术中样品前处理结合QuEChERS方法，去除样品中的油脂、色素等非目标化合物，免去了传统固相萃取柱复杂的净化步骤。
[0017]所述样品为鸡肉、鸡肝、鸡蛋、鸭肉、鸭肝和鸭蛋，具有高脂肪和高蛋白的属性，特别又为磷脂类化合物，若这些物质与目标化合物共流出，不仅会使定性定量结果不准确，还会导致质谱的维护需求增加，缩短仪器和色谱柱寿命。
[0018]所述21种全氟类化合物为全氟丁酸(PFBA)、全氟丁酸磺酸钾(PFBS)、全氟戊酸(PFPeA)、全氟戊烷磺酸钠(PFPeS)、全氟己酸(PFHxA)、全氟己烷磺酸钠(PFHxS)、全氟庚酸
(PFHPA)、全氟庚本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种超高效液相色谱
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串联质谱法同时测定动物源性食品中21种全氟类化合物残留的方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)样品准备和混合内标工作溶液配置：(2)样品提取和盐析：采用改进的QuEChERS方法对样品进行提取和净化；具体步骤为称取样品置于聚丙烯离心管中，加入混合内标工作溶液，再加入水，振荡涡旋，分别用提取剂振荡提取；然后加入无机盐后迅速振摇，离心；(3)净化处理：将离心后的上清液全部转移至有净化剂的净化管中，振荡涡旋、离心，取上清液氮吹至近干，用甲醇定容和过滤，待测；(4)配置目标化合物标准溶液：用阴性基质样液配制目标化合物标准溶液；(5)用液相色谱仪和串联质谱仪进行测定；绘制标准曲线后确定基质效应，按条件用液相色谱仪和串联质谱仪进行测定，以目标物的浓度(X，ng/mL)与相应的峰面积(Y)绘制标准曲线；(6)采用基质匹配
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内标法定量分析判断：按照ME＝[(基质匹配标准曲线的斜率
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溶剂标准曲线的斜率)/溶剂标准曲线的斜率]
×
100％来评价6种基质的基质效应大小；结果为(
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)表示基质抑制效应，结果为(+)表示基质增强效应；当ME为
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20％～20％时为弱基质效应，ME为
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50％～20％或20％～50％时为中等基质效应，当ME<
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50％或>50％时为强基质效应，从而确定实际样品中是否筛查检测出待测化合物。2.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱
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串联质谱法同时测定动物源性食品中21种全氟类化合物残留的方法，其特征在于：所述样品为鸡肉、鸡肝、鸡蛋、鸭肉、鸭肝和鸭蛋。3.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱
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串联质谱法同时测定动物源性食品中21种全氟类化合物残留的方法，其特征在于：所述21种全氟类化合物为全氟丁酸(PFBA)、全氟丁酸磺酸钾(PFBS)、全氟戊酸(PFPeA)、全氟戊烷磺酸钠(PFPeS)、全氟己酸(PFHxA)、全氟己烷磺酸钠(PFHxS)、全氟庚酸(PFHPA)、全氟庚烷磺酸钠(PFHps)、全氟辛酸(PFOA)、全氟辛烷磺酸钠(PFOS)、全氟壬酸(PFNA)、全氟壬烷磺酸钠(PFNS)、全氟癸酸(PFDA)、全氟癸烷磺酸钠(PFDS)、全氟十一烷酸(PFUdA)、全氟十二烷酸(PFDoA)、全氟十二磺酸钠(PFDoS)、全氟十三烷酸(PFTrDA)、全氟十四烷酸(PFTeDA)、全氟十六烷酸(PFHxDA)和全氟十八烷酸(PFODA)。4.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱
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串联质谱法同时测定动物源性食品中21种全氟类化合物残留的方法，其特征在于：配制所述混合内标工作溶液时所用9种混合同位素内标储备液为
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C4‑
全氟丁酸(MPFBA)、
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【专利技术属性】
技术研发人员：唐韵熙，刘露露，余洁，白亚敏，黄思瑜，
申请(专利权)人：重庆市食品药品检验检测研究院，
类型：发明
国别省市：