一种调控TPD52基因表达的试剂在制备影响反刍动物卵巢颗粒细胞增殖的产品中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种调控TPD52基因表达的试剂在制备影响反刍动物卵巢颗粒细胞增殖的产品中的应用，涉及功能miRNA技术领域。本发明专利技术针对TPD52基因对山羊卵巢颗粒细胞的作用，同时筛选到其调控元件miR

【技术实现步骤摘要】
一种调控TPD52基因表达的试剂在制备影响反刍动物卵巢颗粒细胞增殖的产品中的应用


[0001]本专利技术属于功能miRNA
，具体涉及一种调控TPD52基因表达的试剂在制备影响反刍动物卵巢颗粒细胞增殖的产品中的应用。

技术介绍

[0002]miRNA作为小非编码RNA，在RNA沉默和基因表达的转录后调控中发挥重要作用。研究发现几乎所有类型的细胞都能够分泌miRNA，一些细胞外miRNA也可能与细胞间通讯有关。对于卵巢颗粒细胞的研究发现，miRNA能够直接或间接调节卵泡功能的调节和颗粒细胞激素的分泌。绵羊卵巢的研究已发现miRNA不仅可以作为调控元件调节颗粒细胞增殖，而且能够控制TGF
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β中的雌二醇分泌所影响的窦前颗粒细胞生长发育。许多miRNA已在绵羊中已经被验证，但在山羊卵巢颗粒细胞中的调控miRNA报道较少，且许多未报道过的未被命名的miRNA也能够对山羊卵巢颗粒细胞发挥调控作用。
[0003]肿瘤蛋白D52(TPD52 Gene ID:102178838)是一种原癌基因，属于D52蛋白家族的保守序列。最初，人们发现它在乳腺癌中由于基因扩增而过度表达。随后，该基因在结肠癌、前列腺癌、前列腺癌和卵巢癌中高表达。TPD52及其家族成员形成同源和异构体的相互作用，进而可能在钙介导的信号转导、细胞内脂质储存和细胞生存中发挥潜在作用。TPD52在蛋白质的两端含有D52基序、螺旋卷曲结构域和PEST序列。在以往研究中，人们对TPD52的结构和功能特性进行了较少试验验证，而目前对于反刍动物，特别是山羊卵巢中的研究并未报道过。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种调控TPD52基因表达的试剂在制备影响反刍动物卵巢颗粒细胞增殖的产品中的应用，TPD52基因表达量与反刍动物卵巢颗粒细胞增殖情况呈正相关，可应用于山羊新品种的培育。
[0005]本专利技术提供了一种调控TPD52基因表达的试剂在制备影响反刍动物卵巢颗粒细胞增殖的产品中的应用。
[0006]优选的，所述试剂包括miR
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novel
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216、miR
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novel
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216的模拟物、miR
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novel
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216的抑制剂和/或miR
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novel
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216的激动剂中的一种或多种；
[0007]所述miR
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novel
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216的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0008]优选的，所述miR
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novel
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216的模拟物包括针对miR
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novel
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216成熟结构设计，化学合成的双链小RNA，在细胞内DICER酶作用下成为单链的miRNA；
[0009]所述miR
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novel
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216的抑制剂包括是针对miR
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novel
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216的互补单链，通过特异性抑制miRNA分子来减少基因沉默的效应。
[0010]本专利技术还提供了miR
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novel
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216、miR
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novel
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216的模拟物或miR
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novel
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216的激动剂在制备降低TPD52基因表达并抑制反刍动物卵巢颗粒细胞增殖的制剂中的应用，所述
miR
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novel
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216的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0011]本专利技术还提供了miR
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novel
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216的抑制剂在制备增强TPD52基因表达并促进反刍动物卵巢颗粒细胞增殖的制剂中的应用，所述miR
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novel
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216的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0012]本专利技术还提供了miR
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novel
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216的抑制剂在培育高产反刍动物中的应用，所述miR
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novel
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216的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0013]优选的，所述反刍动物包括山羊。
[0014]有益效果：本专利技术提供了一种调控TPD52基因表达的试剂在制备影响反刍动物卵巢颗粒细胞增殖的产品中的应用，并在实施例中验证了miR
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novel
‑
216(简称miR
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216)、miR
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novel
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216的模拟物(mimics)以及miR
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novel
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216的抑制剂(inhibitor)与TPD52的表达量以及卵巢颗粒细胞增殖之间的关系，即miR
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216靶向TPD52基因3
′‑
UTR并抑制其表达水平，具体表现在miR
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216在高产云上黑山羊中表达量极显著低于低产云上黑山羊(P<0.01)；TPD52基因在高产云上黑山羊中的表达量极显著高于低产云上黑山羊(P<0.01)；转染miR
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216mimics与对照组相比，显著降低TPD52基因mRNA表达水平(P<0.05)，转染miR
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216inhibitor与对照组相比，显著增加TPD52基因mRNA表达水平(P<0.05)；转染miR
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216mimics与对照组相比显著抑制了颗粒细胞的增殖(P<0.05)；转染miR
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216inhibitor与对照组相比，显著促进了颗粒细胞的增殖(P<0.05)。
附图说明
[0015]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0016]图1为miR
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216和TPD52在高低产卵巢中的表达量对比图；
[0017]图2为miR
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216和TPD52基因的双荧光活性检测结果图；
[0018]图3为miR
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216调控TPD52对颗粒细胞增殖的影响结果图；其中A：转染miR
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216mimics和miR
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216mimics NC后TPD52表达量结果图；B：转染miR
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216inhibitor和miR
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216inhibitor NC后TPD52本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种调控TPD52基因表达的试剂在制备影响反刍动物卵巢颗粒细胞增殖的产品中的应用。2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述试剂包括miR
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novel
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216、miR
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novel
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216的模拟物、miR
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216的抑制剂和/或miR
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216的激动剂中的一种或多种；所述miR
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novel
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216的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。3.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述miR
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novel
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216的模拟物包括针对miR
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216成熟结构设计得到并化学合成的双链小RNA，在细胞内DICER酶作用下成为单链的miRNA；所述miR
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novel
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216的抑制剂包括针对miR
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216的互补单链，通过特异性抑制m...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘玉芳，王鹏，储明星，刘子嶷，
申请(专利权)人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：