铁皮石斛活性萃取成分及其药物组合物和用途制造技术

本发明专利技术提供铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）叶中新的萃取成分铁皮石斛二糖苷A（dendrodiglycoside A，PFG20）和铁皮石斛二糖苷B（dendrodiglycoside B，PFG13），以及已知的佛莱心苷（PFG22）、芹菜素6

【技术实现步骤摘要】
铁皮石斛活性萃取成分及其药物组合物和用途

：
[0001]本专利技术属于医药和化妆品
具体地，涉及一类黄酮碳苷类化合物PFG20、PFG13、PFG22、PFG25，及其制备方法和以其为活性成分的药物组合物及其在制备酪氨酸酶抑制剂中的应用。

技术介绍
：
[0002]中药铁皮石斛是兰科植物铁皮石斛Dendrobium officinale Kimura et Migo的干燥茎，具有益胃生津、滋阴清热的功能；用于治疗热病津伤、口干烦渴、胃阴不足、食少干呕、病后虚热不退、阴虚火旺、骨蒸劳热、目暗不明、筋骨痿软等病症[国家药典委员会编.中华人民共和国药典.北京:中国医药科技出版社,2020]。铁皮石斛叶，则被作为地方特色食品在利用，如浙江省卫生健康委员会于2020年6月11日发布了浙江省食品安全地方标准《干制铁皮石斛叶》(DB33/3012
‑
2020)(https://bz.zjamr.zj.gov.cn/public/std/companyStdview/9ca20004492842f9a38e5530d23e0b0e.html)；贵州省卫生健康委员会于2020年7月17日发布了《铁皮石斛叶(干叶)》食品安全地方标准》(http://wjw.guizhou.gov.cn/xwzx_500663/zwyw/202007/t20200724_61712723.html)；云南省卫生健康委员会于2021年4月23日发布了《云南省食品安全地方标准干制铁皮石斛叶》(DBS 53/031
‑
2021)(http://www.pbh.yn.gov.cn/wjwWebsite/web/doc/UU162037334872859894)。
[0003]对酪氨酸酶具有抑制作用的化合物，如曲酸(kojic acid)和苯乙基间苯二酚(phenylethyl resorcinol)等，对皮肤具有美白的功效，可以用于化妆品。据报道，铁皮石斛叶中含有黄酮碳苷等化学成分[Wang Y
‑
H.Traditional uses,chemical constituents,pharmacological activities,and toxicological effects of Dendrobium leaves:Areview.Journal of Ethnopharmacology,2021,270:113851]，
[0004]迄今，现有技术中未见有黄酮碳苷类化合物PFG20、PFG13、PFG22、PFG25，及其制备方法和以其为活性成分的药物组合物及其在制备酪氨酸酶抑制剂中和化妆品中的应用的报道。

技术实现思路
：
[0005]针对现有技术中存在的上述不足之处，本专利技术的目的在于提供黄酮碳苷类化合物PFG20、PFG13、PFG22、PFG25，及其制备方法和以其为活性成分的药物组合物及其在制备酪氨酸酶抑制剂中的应用。本专利技术化合物具备对酪氨酸酶抑制的活性。
[0006]为了实现本专利技术的上述目的，本专利技术提供了如下的技术方案：
[0007]如下结构式所示的化合物铁皮石斛二糖苷A即PFG20和铁皮石斛二糖苷B即PFG13，
[0008][0009]药物组合物，包括治疗有效量的化合物PFG20和PFG13中的一种或两种，和至少一种可药用载体。
[0010]所述的化合物PFG20和PFG13在制备酪氨酸酶抑制剂中的应用。
[0011]所述的化合物PFG20和PFG13在制备化妆品中的应用。
[0012]所述的化合物PFG20和PFG13的制备方法，该方法包括下述步骤：
[0013]铁皮石斛叶，粉碎后经90～95％乙醇超声提取，再经过滤浓缩得到浸膏，浸膏加入1L水，制成混悬液，加入3L石油醚萃取，重复8次；萃取后的水相用6M盐酸调节pH至2～3，用3L乙酸乙酯萃取，重复5次；萃取后的水相用50％氢氧化钠水溶液调节pH为9～10后，用2L二氯甲烷萃取，重复5次；萃取后的水相用6M盐酸调节pH值至7左右，用2L正丁醇萃取，重复5次，回收溶剂后得到正丁醇萃取部分；对正丁醇萃取部分进行正相硅胶80～100目柱层析，用二氯甲烷
‑
甲醇体系20:1，10:1，5:1，3:1，2:1，1:1，v/v和甲醇洗脱，得到Fr.A、Fr.B、Fr.C、Fr.D、Fr.E和Fr.F六个组分；
[0014]二氯甲烷
‑
甲醇(3:1)洗脱部分Fr.D经过反相RP C
18
硅胶柱，甲醇
‑
水，5％，10％，20％，30％，50％，70％，100％得到Fr.D1、Fr.D2、Fr.D3、Fr.D4、Fr.D5、Fr.D6和Fr.D7七部分；
[0015]甲醇
‑
水(20～50％)洗脱部分Fr.D5进行正相硅胶200～300目柱层析，用乙酸乙酯
‑
丙酮体系15:1，10:1，5:1，3:1，2:1，1:1，v/v和甲醇洗脱，得到Fr.D
5.1
、Fr.D
5.2
、Fr.D
5.3
、Fr.D
5.4
、Fr.D
5.5
、Fr.D
5.6
和Fr.D
5.7
七个部分；
[0016]乙酸乙酯
‑
丙酮10:1～5:1洗脱部分Fr.D
5.5
经Sephadex LH
‑
20凝胶柱层析(MeOH洗脱)纯化得到主要组分Fr.D
5.5.4
；
[0017]从Fr.D
5.5.4
中取约1/5通过半制备高效液相色谱纯化得到铁皮石斛二糖苷B即PFG13；Fr.D
5.5.4
剩余部分再通过半制备高效液相色谱法分离为Fr.D
5.5.4.1
、Fr.D
5.5.4.2
、Fr.D
5.5.4.3
、Fr.D
5.5.4.4
和Fr.D
5.5.4.5
五部分；Fr.D
5.5.4.2
通过半制备高效液相色谱纯化得到铁皮石斛二糖苷A即PFG20。
[0018]药物组合物，包括治疗有效量的化合物异佛莱心苷(PFG22)、芹菜素6
‑
C
‑
β
‑
D
‑
吡喃葡萄糖基
‑
(1
→
2)
‑
α
‑
L
‑
吡喃阿拉伯糖苷(PFG25)中的一种或两种，和至少一种可药用载体。
[0019]化合物异佛莱心苷(PFG22)、芹菜素6
‑
C
‑
β
‑
D
‑
吡喃葡萄糖基
‑
(1
→
2)
‑<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.如下结构式所示的化合物铁皮石斛二糖苷A即PFG20和铁皮石斛二糖苷B即PFG13，2.药物组合物，包括治疗有效量的权利要求1所示的化合物PFG20和PFG13中的一种或两种，和至少一种可药用载体。3.权利要求1所述的化合物PFG20和PFG13在制备酪氨酸酶抑制剂中的应用。4.权利要求1所述的化合物PFG20和PFG13在制备化妆品中的应用。5.权利要求1所述的化合物PFG20和PFG13的制备方法，其特征在于：该方法包括下述步骤：铁皮石斛叶，粉碎后经90～95％乙醇超声提取，再经过滤浓缩得到浸膏，浸膏加入1L水，制成混悬液，加入3L石油醚萃取，重复8次；萃取后的水相用6M盐酸调节pH至2～3，用3L乙酸乙酯萃取，重复5次；萃取后的水相用50％氢氧化钠水溶液调节pH为9～10后，用2L二氯甲烷萃取，重复5次；萃取后的水相用6M盐酸调节pH值至7左右，用2L正丁醇萃取，重复5次，回收溶剂后得到正丁醇萃取部分；对正丁醇萃取部分进行正相硅胶80～100目柱层析，用二氯甲烷
‑
甲醇体系20:1，10:1，5:1，3:1，2:1，1:1，v/v和甲醇洗脱，得到Fr.A、Fr.B、Fr.C、Fr.D、Fr.E和Fr.F六个组分；二氯甲烷
‑
甲醇3:1洗脱部分Fr.D经过反相RP C
18
硅胶柱，甲醇
‑
水，5％，10％，20％，30％，50％，70％，100％得到Fr.D1、Fr.D2、Fr.D3、Fr.D4、Fr.D5、Fr.D6和Fr.D7七部分；甲醇
‑
水20～50％洗脱部分Fr.D5进行正相硅胶200～300目柱层析，用乙酸乙酯
‑
丙酮体系15:1，10:1，5:1，3:1，2:1，1:1，v/v和甲醇洗脱，得到Fr.D
5.1
、Fr.D
5.2
、Fr.D
5.3
、Fr.D
5.4
、Fr.D
5.5
、Fr.D
5.6
和Fr.D
5.7
七个部分；乙酸乙酯
‑
丙酮10:1～5:1洗脱部分Fr.D
5.5
经Sephadex LH
‑
20凝胶柱层析MeOH洗脱纯化得到主要组分Fr.D
5.5.4
；从Fr.D
5.5.4
中取约1/5通过半制备高效液相色谱纯化得到铁皮石斛二糖苷B即PFG13；Fr.D
5.5.4
剩余部分再通过半制备高效液相色谱法分离为Fr.D
5.5.4.1
、Fr.D
5.5.4.2
、Fr.D
5.5.4.3
、Fr.D
5.5.4.4
和Fr.D
5.5.4.5
五部分；Fr.D
5.5.4.2
通过半制备高效液相色谱纯化得到铁皮石斛二糖苷A即PFG20。6.药物组合物，包括治疗有效量的化合物异佛莱心苷即PFG22和芹菜素6
‑
C
‑
β
‑
D
‑
吡喃葡萄糖基
‑
(1
→
2)
‑
α
‑
L
‑
吡喃阿拉伯糖苷即PFG25中的一种或两种，和至少一种可药用载体。7.化合物异佛莱心苷即PFG22、芹菜素6
‑
C
‑
β
‑
D
‑
吡喃葡萄糖基
‑
(1
→
2)
‑
α
‑
L
...

【专利技术属性】
技术研发人员：王跃虎，陈贻芳，罗吉凤，
申请(专利权)人：中国科学院昆明植物研究所，
类型：发明
国别省市：