本申请提供了一种液滴盒,所述液滴盒为一端具有开口的半封闭的盒体,所述液滴盒的内表面附有氧化层,所述液滴盒内部的底面设有多个第一凹陷部,所述第一凹陷部用于容纳待生成的液滴。本申请提供的液滴盒,通过在液滴盒的内表面附着氧化层,能够减少液滴盒在荧光条件下产生的折光反射效果,提高了荧光条件下液滴轮廓的清晰度,便于区分阳性液滴和阴性液滴,保证了运用液滴盒进行数字PCR检测的精准度。证了运用液滴盒进行数字PCR检测的精准度。证了运用液滴盒进行数字PCR检测的精准度。
【技术实现步骤摘要】
液滴盒
[0001]本申请属于生物医药
,更具体地说,是涉及一种液滴盒。
技术介绍
[0002]聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)提出至今已有20年时间,期间PCR已发展成为分子生物学领域的一项关键技术和常规技术,极大地推动了生命科学各个领域的发展。特别是90年代后期,美国ABI公司推出的实时荧光定量PCR(real time PCR,qPCR)技术及相关产品更是将PCR由体外合成及定性/半定量检测技术发展成为一种高灵敏、高特异性和精确定量的基因分析技术。
[0003]尽管经过十几年时间的迅速发展,qPCR技术已经用于除外伤和营养缺乏症外所有疾病的诊断,但是,在PCR扩增过程中影响其扩增效率的因素有很多,不能保证在反应过程中扩增效率保持不变和实际样品与标准样品以及不同样品之间的扩增效率是相同的,由此导至其定量分析所依赖的基础——循环阈值(CT)不是恒定不变的。因此qPCR的定量只是“相对定量”,其准确度和重现性依然不能够满足分子生物学定量分析的要求。
[0004]20世纪末,Vogelstein等提出数字PCR(digital PCR,dPCR)的概念,通过将一个样本分成几十到几万份,分配到不同的反应单元,每个单元包含一个或多个拷贝的目标分子(DNA模板),在每个反应单元中分别对目标分子进行PCR扩增,扩增结束后对各个反应单元的荧光信号进行统计学分析。与qPCR不同的是,数字PCR不依赖于CT值,因此不受扩增效率影响,扩增结束后通过直接计数或泊松分布公式来计算每个反应单元的平均浓度(含量),能够将误差控制在5%以内,数字PCR可以不需要对照标准样品和标准曲线来实现绝对定量分析。
[0005]数字PCR(也可称单分子PCR)一般包括两部分内容,即PCR扩增和荧光信号分析。在PCR扩增阶段,与传统技术不同,数字PCR一般需要将样品稀释到单分子水平,并平均分配到几十至几万个单元中进行反应。不同于qPCR对每个循环进行实时荧光测定的方法,数字PCR技术是在扩增结束后对每个反应单元的荧光信号进行采集。最后通过直接计数或泊松分布公式计算得到样品的原始浓度或含量。
[0006]由于数字PCR是一种核酸分子绝对定量技术,相较于传统的qPCR,能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量,因此特别适用于依靠CT值不能很好分辨的应用领域,例如拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究(如等位基因不平衡表达)、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。
[0007]在数字PCR操作时,通常需要使用到承载液滴的液滴盒,然在荧光条件下,液滴盒容易反光,影响到液滴轮廓的清晰度,无法区分阳性液滴和阴性液滴。而且,扩增后的液滴容易出现堆叠融合且大小不均一的现象。
技术实现思路
[0008]本申请实施例的目的在于提供一种液滴盒,以解决现有技术中存在的液滴盒容易
反光影响到液滴轮廓的清晰度以及扩增后的液滴容易出现堆叠融合且大小不均一的技术问题。
[0009]为实现上述目的,本申请采用的技术方案是:提供一种液滴盒,用于数字PCR检测,所述液滴盒为一端具有开口的半封闭的盒体,所述液滴盒的内表面附有氧化层,所述液滴盒内部的底面设有多个第一凹陷部,所述第一凹陷部用于容纳待生成的液滴。
[0010]可选地,所述氧化层表面附有疏水层。
[0011]可选地,所述液滴盒为用导热材料制作而成的盒体。
[0012]可选地,所述导热材料为铜合金。
[0013]作为另一种可选方案,所述导热材料为铝合金。
[0014]可选地,所述液滴盒内部的底面设有多个第二凹陷部。
[0015]可选地,所述第一凹陷部为矩形槽,所述矩形槽的长度为6毫米
‑
10毫米,宽度为6毫米
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10毫米,深度为1.5毫米
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2.5毫米。
[0016]可选地,所述第二凹陷部为圆形槽。
[0017]可选地,所述疏水层的材料为硅胶、聚对二甲苯、环氧树脂和丙乙烯中的任意一种。
[0018]可选地,多个所述第一凹陷部成矩形阵列分布。
[0019]可选地,所述液滴盒具有开口的一端设有把手。
[0020]本申请提供的一种液滴盒的有益效果在于:与现有技术相比,本申请的液滴盒,主要用于数字PCR检测,通过在液滴盒的内表面附着氧化层,能够减少液滴盒在荧光条件下产生的折光反射效果,提高了荧光条件下液滴轮廓的清晰度,便于区分阳性液滴和阴性液滴,保证了运用液滴盒进行数字PCR检测的精准度。
附图说明
[0021]为了更清楚地说明本申请实施例中的技术方案,下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动性的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0022]图1为本申请实施例提供的液滴盒的立体结构示意图;
[0023]图2为本申请实施例提供的液滴盒的俯视结构示意图;
[0024]图3为图2中A
‑
A剖面视图;
[0025]图4是图3中B局部放大示意图。
[0026]其中,图中各附图标记:
[0027]1‑
开口;
[0028]2‑
氧化层;
[0029]3‑
第一凹陷部;
[0030]4‑
疏水层;
[0031]5‑
第二凹陷部;
[0032]6‑
把手。
具体实施方式
[0033]为了使本申请所要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白,以下结合附图及实施例,对本申请进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本申请,并不用于限定本申请。
[0034]需要说明的是,当元件被称为“固定于”或“设置于”另一个元件,它可以直接在另一个元件上或者间接在该另一个元件上。当一个元件被称为是“连接于”另一个元件,它可以是直接连接到另一个元件或间接连接至该另一个元件上。
[0035]需要理解的是,术语“长度”、“宽度”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系,仅是为了便于描述本申请和简化描述,而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作,因此不能理解为对本申请的限制。
[0036]此外,术语“第一”、“第二”仅用于描述目的,而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此,限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本申请的描述中,“多个”的含义是两个或两个以上,除非另有明确具体的限定。
[0037]请一并参阅图1
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图4,现对本申请实施本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种液滴盒,其特征在于,所述液滴盒为一端具有开口(1)的半封闭的盒体,所述液滴盒的内表面附有氧化层(2),所述液滴盒内部的底面设有多个第一凹陷部(3),所述第一凹陷部(3)用于容纳待生成的液滴。2.如权利要求1所述的液滴盒,其特征在于,所述氧化层(2)表面附有疏水层(4)。3.如权利要求1所述的液滴盒,其特征在于,所述液滴盒为用导热材料制作而成的盒体。4.如权利要求3所述的液滴盒,其特征在于,所述导热材料为铜合金或铝合金。5.如权利要求1所述的液滴盒,其特征在于,所述液滴盒内部的底面设有多个第二凹陷部(5)。6.如权利要求5所述的液滴盒,其特征在于,所述第二凹陷部(5)为圆形槽...
【专利技术属性】
技术研发人员:徐涛,
申请(专利权)人:晶准生物医学深圳有限公司,
类型:发明
国别省市:
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